子宫上皮细胞FH检测在宫颈病变筛查中的应用价值

王桂花， 马新义， 许 励

(1. 杭州师范大学附属医院 病理科， 浙江 杭州 310015；2.杭州迪安医学检验中心 病理实验室， 浙江 杭州 310012)

宫颈癌是妇产科常见的恶性肿瘤，病死率位居妇科恶性肿瘤病死率的第2位。近年来，宫颈癌发病人群呈年轻化发展趋势，严重威胁女性的健康及生命[1-2]。随着宫颈癌发生发展机制的阐明及筛查方法的完善，宫颈癌可实现早期预防和治疗。在基层医疗机构的临床实践中，探索更为简便、快速的宫颈癌诊断筛查技术十分重要。本研究旨在探讨宫颈渗液细胞游离亚铁原卟啉(cells free ferrous protoporphyrin， FH)检测在宫颈病变筛查中的应用价值，以期为宫颈癌的早期防治提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018年5月—2019年5月在杭州师范大学附属医院拟诊的宫颈异常女性患者173例，年龄23～65岁，平均(45.23±8.07)岁。纳入标准：①有性生活史，无宫颈手术史，无妇科肿瘤病史及家族史；②近期无阴道用药史；③无盆腔放射治疗史；③初次诊断，未接受系统治疗。排除标准：①合并患有其他妇科恶性肿瘤者；②妊娠期妇女；③检查前24 h内有性生活者。本研究经医院伦理委员会批准，所选研究对象均签署知情同意书。

1.2 检测方法

1.2.1 FH检测 采样人员执笔式握持宫腔渗液采样器，将采样器通过阴道轻轻送入宫颈至宫颈管内口约1～2 cm。采样器于宫颈内旋转擦拭，取得带有子宫内膜细胞的宫腔渗液，混匀后送检。按《上皮细胞FH染色试剂(子宫上皮细胞稳定性FH检测)》规程[3]进行操作。FH诊断标准[4]：①FH染色细胞无着色或呈微蓝色为阴性；②细胞呈蓝色为阳性；③细胞呈深蓝色转红棕色或呈深黄色为强阳性。阳性与强阳性均判定为阳性。

1.2.2 宫颈液基薄层细胞(TCT)检测 将一次性宫颈刷置入宫颈口处，顺时针旋转4～5圈，获取足量宫颈口脱落细胞，将标本置于标本管中充分搅拌送检。采用推荐的TBS分类标准[5]：①正常或炎症(WNL)；②意义不明的不典型鳞状细胞(ASC-US)；③非典型鳞状细胞，不能排除高级别鳞状上皮内病变(ASC-H)；④低度鳞状上皮内病变(LSIL)，相当于宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ级，即CINⅠ；⑤高度鳞状上皮内病变(HSIL)，相当于CINⅡ、CINⅢ和原位癌；⑥鳞状细胞癌(SCC)。TCT检查结果以≥ASC-US为阳性。

1.2.3 病理活检 阴道镜下于宫颈3、6、9、12点方向活检钳多点或单点取材，采用双盲法，由经验丰富的高年资医师进行诊断。若诊断不一致，则由2位医师在双镜头下达成共识。根据世界卫生组织(WHO)分类诊断标准[6]分为：炎症、CIN I、CIN II、CIN III和微小浸润癌，其中>CIN I为阳性。

1.3 统计学方法 采用SPSS 20.0统计软件，计量资料采用F检验；计数资料采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 FH、TCT和病理结果 173例受检者行病理组织学检查阳性58例， 阴性115例。FH检测阳性71例，阴性102例；TCT检测阳性66例，阴性107例。 见表1。

表1 FH、TCT和病理结果(例)

2.2 FH和TCT诊断价值比较 以病理学诊断为金标准，FH检测的敏感度为86.2%(50/58)，特异度为81.7%(94/115)，准确度为83.2%(144/173)，阳性预测值为70.4%(50/71)，阴性预测值为92.2%(94/102)，FH检测与病理诊断结果的相关性检验(χ2=43.56，P<0.01)；TCT检测的敏感度为89.7%(52/58)、特异度为87.8%(101/115)、准确度为88.4%(153/173)，阳性预测值为78.8%(52/66)，阴性预测值为94.4%(101/107)，TCT检测方法与病理诊断结果相关性检验(χ2=64.09，P<0.01)。

2.3 FH和TCT诊断的ROC曲线 FH检测的ROC曲线下面积(AUC)为0.708，95%CI：0.554～0.876；TCT检测的AUC为0.735，95%CI：0.612～0.907；见图1。

图1 FH和TCT诊断的ROC曲线

3 讨论

宫颈癌的筛查遵循三阶梯技术，即宫颈细胞学检查、阴道镜检查及组织病理学检查[7]。TCT检查可较完全地保存细胞，薄层涂片及湿固定的细胞检出率达86.1%，明显高于传统涂片技术。但由于标本采集、固定、染色、制片、阅片等环节的质控缺乏，导致我国宫颈细胞学诊断水平参差不齐[8]。宫颈HPV检测敏感度高、阴性预测值高，具有客观、可靠、易于重复等优点，被认为是客观有效的宫颈癌筛查手段。但宫颈HPV检测检查花费高、耗时长、工序繁琐，在基层及资源较缺乏的地区不易推广普及。

FH在人体的多种细胞中广泛存在，可与不同的蛋白结合而发挥出不同的生理功能。FH可对细胞产生一定的氧化损伤，并对子宫上皮细胞的稳定性产生影响。当人体细胞发生癌变时，恶性肿瘤细胞内的代谢会出现紊乱现象，使FH水平增高。这一现象与上皮细胞的恶性程度呈正比，在细胞自稳调节失调早期即可表现出来[9]。因此有研究[10]提出，采用脂溶性较强的物质使FH快速进入细胞或细胞器中，可通过氧化—还原反应着色程度判断细胞是否具有恶变的可能。近年来，FH检测逐渐应用于宫颈癌筛查中。本研究结果显示，FH检测CIN II、CIN III及宫颈癌的敏感度、特异度分别为86.2%、81.7%，与李姗等[11]、员周慧等[12]报道的水平接近。本研究结果还显示，FH和TCT检测的ROC曲线AUC均大于0.7，提示两种检查方法均具有较好的诊断性能。FH检测CIN II、CIN III及宫颈癌的敏感度、特异度、准确度、阳性预测值及阴性预测值均稍低于TCT检测，但差异均无统计意义(P>0.05)，与胡玉芹等[13]、施丽洁[3]报道的结果接近，提示FH检测的敏感度与TCT相当，对宫颈癌筛查有一定的临床应用价值。FH检测属于无创取样，操作简单、快捷，在实用性方面更具优势。因此，FH检测在宫颈病变筛查，特别是基层和大规模筛查中具有较高的应用价值。而对于FH检测阳性结果，需要联合其他诊断手段进一步评估病情，确诊疑似病例，避免漏诊、误诊。本研究结果后续有待扩大样本量进行验证。

综上，属于无创取样的FH检测在宫颈病变筛查中具有较好的诊断性能，在宫颈癌筛查中具有一定的临床应用潜在价值。