胃癌CT征象及血管生成相关因子及抑癌基因表达的相关因素分析

谭华伟

胃癌是消化系统中最常见的恶性肿瘤之一，其发病机制尚不明确。研究表明，胃癌的发生和发展与癌前发生的病变密切相关[1]。胃癌术前CT检查为可对淋巴结转移情况进行分期，但是判断标准及准确性仍有争议，淋巴结转移的判断标准目前尚未统一[2]。研究表明[3]，胃癌的发生和发展是1个多阶段、多步骤的过程，涉及多种原癌基因的激活，肿瘤抑制基因的缺失或分子生物学发生异常。关于胃癌中内皮抑素抑癌基因endostatin的研究很少，胃癌的新生血管形成是其发展和侵袭的重要基础。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在诱导内皮细胞增殖中与肿瘤生长和转移中起重要作用[4-5]。本研究以胃癌患者为研究对象，观察胃癌患者的CT征象、癌组织和癌旁组织及抑癌基因阳性表达的差异，分析影响胃癌患者癌组织VEGF及endostatin表达的因素。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年2月至2018年8月在我院接受治疗的胃癌患者为研究对象。纳入标准：①年龄≥18周岁；②病理检查确诊为胃癌者；③无其他原发性肿瘤疾病者。排除标准：①临床资料不全者；②不愿参与本项研究者。根据标准共纳入病例数100例，其中男性65例，女性35例，年龄48～70岁，平均(59.35±4.11)岁。临床分期：Ⅱ期40例，Ⅲ期35例，Ⅳ期25例；有淋巴结转移35例。本项研究经医院伦理委员会评审通过。

1.2 研究方法

采用GEPropeedAi，螺旋CT机。受试者禁食超过8小时。试验前，向肌肉注入20 mg山莨菪碱，在检查床前取500 ml水，选择最佳位置。从前静脉压注射器给予100 ml碘伏，注射速度分别为3 ml/s。在注射开始后25 s，65 s和2～3 min收集图像。局部胃壁组织超过5 mm，伴随着多层结构的消失或异常增强，作为诊断胃癌的基础。淋巴结直径<10 mm时可观察到显着增强；或淋巴结直径> 9 mm，CT值> 100 HU，短轴与长轴比>0.7，确诊为淋巴结转移[6]。通过CT鉴别患者的病理特征。胃癌所在层面在常规连续观察后，确定最大病变累及范围的层面，测量肿瘤的长径。

进行常规HE染色和免疫组织化学检测VEGF、endostatin：VEGF试剂盒购自北京中宾金桥生物科技有限公司，endostatin多克隆抗体购自美国santa cruz生物技术公司，都由同一病理医师进行，标准化严格控制。VEGF、endostatin阳性率的评价方法：用细胞质染成棕色颗粒正，随机选择10个倍视野，计算阳性细胞的百分比并取其，阳性细胞数≥25%为阳性，阴性为<25%[7]。

将单因素分析有意义的因素作为因变量，将胃癌患者血管生成相关因子及抑癌基因阳性表达作为自变量进行回归分析，分析影响胃癌患者血管生成相关因子及抑癌基因阳性表达的因素。

1.3 评价指标

观察胃癌患者的CT征象、癌组织和癌旁组织血管生成相关因子及抑癌基因阳性表达的差异，分析影响胃癌患者癌组织血管生成相关因子及抑癌基因表达的因素。

1.4 统计学处理

数据采用Excel录入后，应用SPSS 11.5软件分析。计数和计量资料分别采用例和均数±标准差表示，采用t检验、卡方检验和回归分析法进行统计学处理。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 胃癌患者CT征象观察

胃癌患者经CT检查效果良好，通过CT可明显鉴别患者的病理特征：T3期患者病灶浆膜面光整，周围脂肪间隙清晰；T4期患者病灶浆膜面毛躁，局部外突表现，周围脂肪间隙密度增高，部分条索状改变。

2.2 癌组织和癌旁组织血管生成相关因子及抑癌基因阳性表达的比较

癌组织中VEGF阳性率为85%，高于癌旁组织的12%，endostatin阳性率为10%，低于癌旁组织的95%，差异有统计学意义(χ2=106.676、144.862，P<0.001)。

2.3 不同特征胃癌患者血管生成相关因子及抑癌基因阳性表达的比较

由表1显示，有淋巴结转移、临床分期为Ⅳ、肿瘤直径≥5 cm、CT最大径线≥55 mm的胃癌患者VEGF阳性率较高，有淋巴结转移、肿瘤直径≥5 cm、CT最大径线≥55 mm的胃癌患者endostatin阳性率较低。

表1 不同特征胃癌患者血管生成相关因子及抑癌基因阳性表达的比较/例

2.4 影响胃癌患者血管生成相关因子及抑癌基因阳性表达的因素分析

将单因素分析有意义的因素作为因变量，将胃癌患者血管生成相关因子及抑癌基因阳性表达作为自变量进行回归分析，结果显示，淋巴结转移、CT最大径线是影响胃癌患者血管生成相关因子及抑癌基因阳性表达的因素。见表2。

表2 影响胃癌患者血管生成相关因子及抑癌基因阳性表达的因素分析

3 讨论

胃癌的CT检查已在临床实践中广泛使用，并且CT增强特征被普遍认可。

用于局部胃壁增厚超过5 mm，同时消除了正常胃壁的多层结构的消失或显著的异常增强是胃癌的CT诊断标准[8]。本文主要关注CT强血管生成与胃癌血管生成，VEGF在肿瘤中新血管的形成起促进作用。研究表明[9]，endostatin及其类似物可抑制内皮细胞的生长和迁移，显著缩小和抑制体内原发肿瘤和转移瘤的生长，并下调肿瘤细胞和蛋白质的表达。最近几年，关于胃癌血管生成因子的报道很多，其与胃癌的分期，淋巴结转移和预后密切相关，血管生成抑制因子的报道很少见。endostatin在小鼠和人神经胶质瘤中的蛋白质表达，在不同细胞类型的肿瘤中显示不同的表达水平[10-11]。本次研究了胃癌患者癌组织VEGF及endostatin表达的表达情况及其影响因素，并探讨了其临床价值。

良好的CT图像可以准确预先分期胃癌，这可以为胃癌术前手术切除提供更准确的评估，也可以为胃癌患者选择最佳治疗提供可靠的指导。避免盲目手术探查[12]。

本研究结果显示：胃癌患者经CT检查效果良好，TN分期较显著。癌组织中VEGF阳性率高于癌旁组织，endostatin阳性率低于癌旁组织，差异有统计学意义。表明具有较高染色强度的癌细胞大多位于浸润前部和局部坏死组织周围，一些血管内皮细胞显示弱阳性染色，表明该表达与血管生成位点一致。endostatin阳性物质可出现在肿瘤细胞、内皮细胞和浸润淋巴样细胞中[13]。因此，在细胞质中，被抗体染色的细胞不一定产生endostatin，endostatin蛋白可能来自血液循环，然后再与这些细胞结合。有研究发现[14]组织坏死的某些区域有强烈的阳性染色，在一些间质中也发现阳性染色，这与我们结果一致。表明在肿瘤局部组织中存在有血管生成的调节机制。

本研究表明：有淋巴结转移、临床分期为Ⅳ、肿瘤直径≥5 cm、CT最大径线≥55 mm的胃癌患者VEGF阳性率较高，有淋巴结转移、肿瘤直径≥5 cm、CT最大径线≥55 mm的胃癌患者endostatin阳性率较低。胃癌组织endostatin表达下调与胃癌病理分期及转移有关。结果发现胃癌旁组织endostatin显著高于胃癌组织，而临床分期为Ⅳ、肿瘤直径≥5 cm、CT最大径线≥55 mm的胃癌患者endostatin的阳性率低，提示基因及其编码的endostatin蛋白在胃癌发生及演进过程中具有重要作用，这与徐步远等得到的结果一致[15]。同时实验显示胃癌组织基因编码蛋白表达情况与胃癌淋巴道转移和局部的脉管浸润密切相关。在胃癌患者中，伴淋巴结转移endostatin蛋白阳性率较低，提示endostatin的失活或降低表达可能促进胃癌细胞的转移，推测其与胃癌的发生转移密切相关。肿瘤抑制基因的突变和或缺失可通过上调VEGF和下调endostatin表达而引起胃癌的局部血管刺激因子和抑制因子的减少从而促进肿瘤血管生成，表明肿瘤血管生成受肿瘤细胞基因水平的调节。

CT的术前判断具有重要的临床价值，CT图像能准确反映胃壁增厚程度，淋巴结转移和器官转移情况，为临床评估患者病情提供参考依据。CT增强值与VEGF表达阳性率和endostatin表达密切相关。检测VEGF和endostatin对判断患者预后有重要价值，为临床治疗提供了重要依据。

将有意义的因素作为因变量，将胃癌患者VEGF及endostatin阳性表达作为自变量进行回归分析，结果显示，淋巴结转移、CT最大径线是影响胃癌患者VEGF及endostatin阳性表达的因素。因此我们认为联合检测胃癌组织中VEGF、endostatin的表达状况，有助于明确胃癌的生物学行为，可作为预测肿瘤预后的指标。

本研究虽然取得了理想的实验结果，但也存在不足之处，本研究纳入病例数较少，实验结果可能存在一定程度的偏倚，在接下来的研究中需要更大的样本数来支持。

综上所述，胃癌患者癌组织血管生成相关因子阳性表达率较高，抑癌基因阳性表达率较低，且与患者CT最大径线和有无淋巴结转移相关。