左西孟旦联合高容量血液滤过对脓毒症心肌损伤患者免疫功能的影响

吕品

脓毒症是感染性因素、烧伤等原因引起的临床常见急危重症，其发病率在全球范围内呈不断上升趋势[1,2]。合并心肌损伤是脓毒症最常出现的并发症，患者病死率高达70%～90%[3,4]。研究显示，免疫功能紊乱在脓毒症发生发展中发挥重要作用，是导致心肌损伤的重要病理机制[5,6]。高容量血液滤过(HVHF)是治疗脓毒症及其并发症的重要措施，能够有效清除炎性介质，恢复内环境稳态，改善预后[7]。左西孟旦是一种新型钙离子增敏剂，因其正性肌力、扩血管作用已经应用于多种心脏疾病的治疗中[8]。本研究探讨了左西孟旦联合HVHF对脓毒症心肌损伤患者免疫功能的影响，以期为此类疾病的治疗提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 将2016年1月至2019年1月我院收治的脓毒症心肌损伤患者60例纳入研究范围，随机分为对照组和治疗组，每组30例。对照组男18例，女12例；年龄41～72岁，平均年龄(56.18±7.05)岁；治疗组男20例，女10例；年龄42～68岁，平均年龄(54.76±6.32)岁。2组基线资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 纳入与排除标准 纳入标准：(1)符合脓毒症诊断标准[9]，且心肌酶谱异常，超声检查显示左心室射血分数下降>50%，提示伴有心肌损伤[10]；(2)患者自愿加入本研究，且签署知情同意书。排除标准：(1)既往有心绞痛、心肌炎、心肌梗死等基础心脏疾病者；(2)重要脏器功能障碍者；(3)消化道溃疡、血液系统疾病、自身免疫性疾病患者；(4)恶性肿瘤患者；(5)对左西孟旦过敏者。

1.3 治疗方法 2组均给予营养支持、机械通气、抗感染、纠正水电解质紊乱、去甲肾上腺素维持血压等基础治疗。对照组实施早期HVHF治疗，股静脉或颈内静脉穿刺、留管，建立血管通路，采用床边血液透析机进行血液滤过治疗，20 h/d，持续6 d；治疗组在对照组基础上加用左西孟旦注射液(齐鲁制药有限公司)，首负荷剂量12 μg/kg，静脉注射时间≥10 min，随后维持量0.1 μg·kg-1·min-1静脉滴注24 h，2 h后调整为0.2 μg·kg-1·min-1，持续静脉滴注。

1.4 观察指标

1.4.1 Treg/Th17、Th1/Th2:采用患者空腹静脉血，流式细胞仪测定Treg、Th17、Th1、Th2。

1.4.2 细胞因子:采用患者空腹静脉血，离心取上清，采用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定白介素6(IL-6)、IL-10、IL-17、γ干扰素(IFN-γ)、IL-4。

1.4.3 转录因子:采用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞，TRIzol提取细胞总RNA，逆转录试剂盒合成cDNA第一链，Real time-PCR法测定T-bet、GATA3 mRNA表达量，设β-actin为内参照基因，目的基因表达相对值为2-ΔΔCt。

1.4.5 免疫球蛋白:采用放射免疫法测定外周血IgA、IgG、IgM。

2 结果

2.1 2组Treg/Th17比较 2组治疗前Treg、Th17、Treg/Th17比较差异无统计学意义(P>0.05)；2组治疗后Treg、Th17、Treg/Th17均较治疗前显著降低(P<0.05)，且治疗组改善程度更明显(P<0.05)。见表1。

表1 2组Treg/Th17比较

2.2 2组Treg/Th17相关细胞因子比较 2组治疗前IL-6、IL-10、IL-17比较差异无统计学意义(P>0.05)；2组治疗后IL-6、IL-17均较治疗前显著降低，IL-10均较治疗前显著升高(P<0.05)，且治疗组改善程度更明显(P<0.05)。见表2。

表2 2组Treg/Th17相关细胞因子比较

2.3 2组Th1/Th2比较 2组治疗前Th1、Th2、Th1/Th2比较差异无统计学意义(P>0.05)；2组治疗后Th1、Th1/Th2均较治疗前显著降低，Th2均较治疗前显著升高(P<0.05)，且治疗组改善程度更明显(P<0.05)。见表3。

表3 2组Th1/Th2比较

2.4 2组Th1/Th2相关细胞因子比较 2组治疗前IFN-γ、IL-4比较差异无统计学意义(P>0.05)；2组治疗后IFN-γ均较治疗前显著降低，IL-4均较治疗前显著升高(P<0.05)，且治疗组改善程度更明显(P<0.05)。见表4。

表4 2组Th1/Th2相关细胞因子比较

2.5 2组Th1/Th2相关转录因子比较 2组治疗前T-bet mRNA、GATA3 mRNA、T-bet/GATA3比较差异无统计学意义(P>0.05)；2组治疗后T-bet mRNA、T-bet/GATA3均较治疗前显著降低，GATA3 mRNA均较治疗前显著升高(P<0.05)，且治疗组改善程度更明显(P<0.05)。见表5。

表5 2组Th1/Th2相关转录因子比较

表6 2组T淋巴细胞亚群比较

2.7 2组免疫球蛋白比较 2组治疗前IgA、IgG、IgM比较差异无统计学意义(P>0.05)；2组治疗后IgA、IgG、IgM均较治疗前显著升高(P<0.05)，且治疗组改善程度更明显(P<0.05)。见表7。

表7 2组免疫球蛋白比较

3 讨论

脓毒症发病机制复杂，其中促炎和抗炎因子失衡在疾病发生早期发挥关键作用，但随着病情进展，炎症级联反应容易造成免疫功能紊乱，并刺激T淋巴细胞、巨噬细胞等分泌大量细胞因子，导致免疫失调及治疗难度增加[11,12]。其中Treg通过直接作用或分泌抗炎因子IL-10抑制淋巴细胞激活和炎性反应，而Th17能够分泌促炎因子IL-6、IL-17，发挥与Treg相反的功能。Treg、Th17相互作用，相互抑制，二者及其分泌的细胞因子保持平衡状态，在调节炎性反应和免疫功能中发挥重要作用[13,14]。脓毒症患者外周血Treg、Th17、Treg/Th17、IL-6、IL-17明显升高，IL-10明显降低，提示脓毒症患者机体存在严重的细胞免疫功能紊乱。本研究结果显示，2组治疗前Treg、Th17、Treg/Th17、IL-6、IL-10、IL-17比较差异无统计学意义(P>0.05)；2组治疗后Treg、Th17、Treg/Th17、IL-6、IL-17均较治疗前显著降低，IL-10均较治疗前显著升高(P<0.05)，且治疗组改善程度更明显(P<0.05)，说明提示左西孟旦联合HVHF治疗脓毒症心肌损伤能够通过调节细胞因子的分泌影响Treg、Th17分化并维持Treg/Th17平衡，这对于重建机体免疫稳态具有重要作用。

综上所述，左西孟旦联合HVHF治疗脓毒症心肌损伤能够有效调节Treg/Th17、Th1/Th2水平，改善细胞免疫和体液免疫功能。