不同基因型HCV感染患者重叠HBV或HIV感染的病毒学特征

彭亚柏 朱秀云 刘赛云 王敏 龙寿斌 程文兵 蔡侃儒 刘甲野

丙型肝炎病毒（Hepatitis C virus，HCV）和乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus，HBV）感染慢性化程度高，可导致肝硬化和肝癌，是严重威胁人类健康的主要传染病［1-4］。HBV与HCV存在相似的传播途径，所以HBV/HCV重叠感染较常见。同样的，HCV与HIV（Human immunodeficiency virus，HIV）两者共有的传播方式也容易造成这两种病毒共感染。有研究显示HCV和HBV均为嗜肝病毒，两者重叠感染后HCV RNA水平与单纯丙型感染者无明显差异，但加速了肝脏疾病的进行性恶化，更易形成肝硬化和肝癌［5-8］。但也有研究认为HCV和HBV重叠感染后也会存在相互抑制的现象［9］。慢性HCV感染重叠HIV时，与 单独HCV感染者相比，其血液中存在更高的HCV RNA滴度，HIV可促进HCV对肝脏的攻击，从而加速了肝细胞的损伤［10］，同时HCV/HIV重叠感染患者，其发生机会性感染及死亡率也高于未重叠感染HIV患者［11］。HCV存在众多基因型，但不同基因型HCV发生HBV或HIV重叠感染时的病毒学特征研究较少。故本文拟研究不同基因型HCV重叠HBV或HIV感染时，HCV的病毒学特征。

1 对象和方法

1.1 一般资料

选取2017至2020年于本院就诊筛查HCV基因型的1 292名患者，以其中既完成HCV RNA，又进行HBV和HIV检测的丙肝患者为研究对象，共入组397名符合条件的丙肝患者。所有患者及家属均已签署知情同意书。排除标准：混合基因型感染；合并其他病毒性急性肝炎；排除同时合并HBV和HIV。本研究已通过本院伦理委员会批准通过。

1.2 方法

采用PCR荧光探针法（泰普生物科学有限公司）检测HCV基因分型，按照HCV基因分型检测试剂盒说明书中的标准判定分型结果。使用罗氏Cobas TaqMan试剂检测HCV RNA载量，同时依据检测试剂盒说明书中的标准判定结果。对于乙肝五项及HIV的检测，均使用酶联免疫法，根据要求判定阴性或阳性结果。

1.3 统计学方法

采用SPSS 18软件进行数据分析，计数资料用n（%）表示，不符合正态分布的计数资料，用中位数、四分位距描述，采用中位数和（25%、75%分位数）表示，统计分析采用χ2检验或非参数检验，以中位数（25%、75%分位数）表示。P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 对所有进行基因分型检测的丙肝患者的基因型构成特点进行分析

2017至2020年期间筛选的1 292名丙肝患者中，共检测出5种基因型，分别为1b型、6a型、2a型、3b型、3a型，其所占比例如图1。结果显示1b型比例最高，3a型比例最低，除2a型外，其余基因型中男性患者高于女性患者。

图1 检测的丙肝患者的基因型构成特点Figure 1 Proportion of genotype in patients with Hepatitis C infection

2.2 对丙肝患者不同基因型中重叠HBV或HIV特征进行分析

符合入组的397例丙肝患者。丙肝重叠HBV或HIV感染率分别为9.1%（36/397）与6.3%（25/397）。见表1。

表1 丙肝患者不同基因型中HBV或HIV共感染率Table 1 Prevalence of co-infection with HBV or HIV in Hepatitis Cpatients stratified by HCV genotype

2.3 分析重叠HBV或HIV感染后不同基因型的HCV病毒载量的变化

未重叠HBV感染与重叠HBV感染的1b型HCV RNA滴度的中位数（25%，75%IQR）分别为1.55×106（3.12×105，3.25×106）IU/mL和2.64×105（6050，9.41×105）IU/mL，两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。相似的，对于6a型，其分别是1.52×106（1.44×105，7.11×106）IU/mL和1.48×106（1.45×105，4.81×106）IU/mL，两组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。而对于3a型、3b型、2a型，其重叠HBV感染的样本量少，未进行统计。同样地，未重叠HIV感染与重叠HIV感染的1b型HCV RNA滴度的中位数（25%，75%IQR）分别为1.27×106（2.80×105，3.04×106）IU/mL和1.99×106（1.28×105，4.26×106）IU/mL，相似的，对于6a型及3a型，其分别是1.46×106（1.44×105，6.86×106）IU/mL和3.44×106（1.29×105，8.08×106）IU/mL，1.84×106（3.48×105，7.31×106）IU/mL和3.60×106（6.61×105，6.03×106）IU/mL。在1b型、6a型及3a型，未重叠HIV感染与重叠HIV感染，其HCV RNA的滴度在两组间的差异无统计学意义（P＞0.05），而对于3b型、2a型，由于其重叠HIV感染的样本量少，未进行统计（图2）。

图2 重叠HBV或HIV感染后不同基因型的HCV病毒载量的差异Figure 2 The difference of HCV viral load in different genotypes after superimposed HBV or HIV infection

3 讨论

HCV是一种单股线性正链黄病毒［12］，基因易变异，目前至少可分为6个基因型及多个亚型，其中1型、2型、3型、6型是我国常见的四种HCV基因型。对于这些基因型还有不同亚型的存在，我国以1b型、2a型常见，6a型是我国南方地区流行的HCV主要亚型［13］。不同基因型HCV病毒的致病力和对抗病毒治疗的反应不同，而分析合并HIV或HBV的HCV感染者的基因型分布对于共感染者的HCV病毒学特征及抗病毒治疗可提供重要的依据。

付［14］等人对广东省丙型病毒性肝炎的流行概况和流行特征中发现，深圳市报告丙型肝炎病例数位于全省第三位。本研究显示深圳地区慢性HCV感染以1b及6a型为常见基因型，慢性HCV感染者重叠HBV或HIV感染率对于不同基因型其重叠感染率不同。有研究显示虽然HCV 1b型最为常见，但对于HBV易感性来说，与其他基因型相比，无明显易感性增强的表现。邓［15］的一项研究显示，HCV重叠HIV感染者与HCV感染者其感染的HCV基因型构成比存在差异，HCV/HIV重叠感染中HCV基因型以6a型为主，2a型未见重叠感染。故HCV重叠感染HBV或HIV的基因型分布特点不同于HCV基因型分布特点。

HCV与HBV在体内共存较常见，均为嗜肝病毒，有研究显示两者重叠感染后更易发生免疫系统紊乱，这种改变可能表现为相互干扰或抑制现象［6，9］。但合并感染时是否存在HBV对不同基因型HCV感染者病毒载量的影响鲜有报道［9，16］。本研究发现重叠HBV或HIV感染后不同基因型的HCV病毒载量与单纯HCV感染组不同。丁［17］的一项研究显示，HCV重叠HBV感染者HCV RNA滴度与单纯HCV感染者的病毒载量无明显差异，但是丁未对HCV感染者的不同基因型重叠感染HBV后进行分析。同时Jamma［18］应用新的细胞生物模型也显示出两种病毒在同一肝细胞内复制而互不影响，进一步验证了丁的实验结果。但也有研究发现HCV对HBV存在抑制作用，其强弱与HCV基因型有关，表现出1b型强于基因3a和1a型［19］，本研究未探讨HCV对HBV的作用。总之，本研究发现对于不同HCV基因型，HBV对HCV作用的表现形式也不一样。

HCV和HIV共有的血液传播方式，使两者发生重叠感染机会增加，对于HCV重叠HIV感染后，HIV对不同基因型HCV感者病毒载量变化的研究甚少。但是此两项研究均未探讨对于不同HCV基因型重叠感染HIV后，HIV是否表现为一样的作用。由于HCV基因型的分布存在地域差异，不同地区的研究其HCV基因型分布特点不一样，焦的研究是地区是中国北方，本研究地是中国南方。本研究的主要不足为部分基因型样本量少，无法进行统计计算，未来需要全国范围各个区域的多中心研究来验证和补充我们的结论。

总之，本研究发现深圳地区慢性HCV感染者重叠HBV或HIV感染率较高；重叠HBV感染的1b型患者HCV RNA复制减弱，重叠HIV感染的患者，各基因型HCV RNA滴度无明显变化。