我院2012—2017年女性泌尿生殖道分离支原体的药敏分析

高亮

(锦州医科大学附属第一医院检验科，辽宁 锦州 121000)

支原体是一种类似细菌但不具有细胞壁的原核型微生物，侵入人体后在生殖道上皮细胞粘附，可引起泌尿生殖道感染。女性感染支原体可导致子宫内膜炎、尿道炎、阴道炎，甚至导致流产、新生儿脑膜炎、肺炎和血流感染等[1]。近年来，支原体引起的非淋菌性尿道炎和生殖道炎症逐年增加，而且由于抗生素滥用或不规范使用，导致支原体耐药现象日趋增加[2]。本研究通过对2012—2017年从女性患者采集的标本中分离出的4511株支原体及药物敏感试验结果进行分析，了解女性支原体感染的检出率以及对抗生素的耐药情况，为临床规范药物治疗提供依据。

1 资料和方法

1.1 标本来源

2012—2017年锦州医科大学附属第一医院检验科微生物组收集5329份支原体阳性标本，其中来自女性患者的有4511份。标本类型为宫颈分泌物。

1.2 方法

1.2.1 主要试剂 支原体培养、鉴定和药敏的试剂盒为珠海丽珠试剂股份有限公司解脲脲原体和人型支原体培养鉴定药敏试剂盒。质控菌株为Uu ATCC 27813。

1.2.2 标本采集 女性患者采集前常规消毒外阴，用阴道窥器扩张后，先用无菌棉球清除宫颈口分泌物，另取棉拭子插入患者宫颈1～2 cm处，旋转3～5圈，放入配套的容器内，立即送检。

培养鉴定及药敏试验 取出冷冻干燥培养基，滴加稀释液到培养瓶中，充分摇匀，培养基完全溶解后液面至标签标线处。将50 μL培养基加入空白孔中作为阴性对照。接种分泌物标本，将无菌拭子采集的标本插入培养基中，挤压旋转拭子次数，使拭子中的标本渗入，弃掉拭子。然后往试剂条的每一孔中滴加一滴石蜡油，并盖上盖子。将剩余培养基连同试剂条一起置于35～37 ℃隔水恒温培养箱中培养，分别于24 h、48 h观察结果。

1.3 统计学方法

应用SPSS 16.0软件进行描述性统计学分析。进行卡方检验进行数据分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 支原体检出率

本院自2012—2017年共检出5329份支原体阳性标本，其中女性标本为4511份，其中3543份标本分离出解脲脲原体，157份标本分离出人型支原体，811份标本为两种支原体混合感染，经χ2检验P<0.05，女性的阳性率>男性的阳性率，见表1。分离出支原体的阳性标本来自不同年龄的女性患者，女性患者的年龄分布，见表2。

表1 2012—2017年支原体检出情况(%)

表2 不同年龄女性患者支原体感染情况

2.2 药物敏感试验结果

本研究采用的试剂盒有12种抗生素，分别是强力霉素、美满霉素、红霉素、交沙霉素、克拉霉素、罗红霉素、阿奇霉素、环丙沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星、司帕沙星和加替沙星。药物敏感试验结果显示解脲脲原体对强力霉素、美满霉素和交沙霉素敏感性较高，分别是98.1%、96.4%和90.6%。对环丙沙星和司帕沙星的耐药性较高，分别是81.7%和38.7%，P<0.05，见表3。人型支原体较敏感的抗菌药物是强力霉素(89.1%)、美满霉素(85.4%)和交沙霉素(80.4%)，耐药性较高的是红霉素(96.5%)和加替沙星(85.8%)，P<0.05，见表4。解脲脲原体对12种抗生素的耐药率见表3。混合感染(同时分离出解脲脲原体和人型支原体)的标本对强力霉素、美满霉素的敏感性较高，分别是90.1%、87.2%。对罗红霉素和氧氟沙星的耐药性较高，分别是49.6%和47.8%，P<0.05，见表5。

表3 解脲脲原体阳性标本的药敏试验结果(%)

表4 人型支原体感染标本的药敏试验结果(%)

表5 解脲脲原体和人型支原体混合感染标本的药敏试验结果(%)

3 讨 论

解脲脲原体是人类泌尿生殖道最常见的寄生菌之一，为条件致病菌，致病机制可能与侵袭性酶和毒性产物有关[3]。由于女性生理结构的特点，较男性更容易发生解脲脲原体感染。我院2012—2017年接受的4511份女性宫颈分泌物标本中，分离出解脲脲原体标本为3543份，证实了女性解脲脲原体感染中相当高的感染率。这与之前的研究结果相近[4]。人型支原体主要寄居在生殖道，可通过性接触传播，引起附睾炎、宫颈炎、盆腔炎和产褥热[5]。本研究结果显示人型支原体与解脲脲原体混合感染的女性患者标本为811份，占女性患者阳性标本的17.98%。本研究表明，在不同年龄段，女性患者支原体阳性率明显不同，其中20～40岁阳性率最高，为34.76%，这可能与此阶段女性性行为活跃有关。

支原体是能在细胞外生存的最小的原核型微生物，没有细胞壁，只有细胞膜，因此支原体对作用于细胞壁的抗生素如β-内酰胺类和头孢菌素类药物普遍耐药，但是对于抑制细菌蛋白质合成和肽链延伸的大环内酯类药物如红霉素，阿奇霉素等较敏感[6]。本研究药敏结果显示解脲脲原体敏感性较高的抗生素分别是环丙沙星、四环素、交沙霉素，耐药率较高的是红霉素和司帕沙星，这个研究结果与近年来其他研究报道比较接近[7]。解脲脲原体和人型支原体混合感染的标本药敏试验的结果与解脲脲原体单一感染的结果有很大差异，敏感性较高的抗生素分别是环丙沙星、四环素、交沙霉素，耐药率较高的是红霉素和司帕沙星，这个研究结果提示临床医师应根据每个标本具体的药敏试验结果来制定用药方案。

解脲脲原体对干燥和热敏感，因此采集标本后应立即送检并及时接种到培养基中，以免造成假阴性[8]。有研究表明，女性下生殖道中存在解脲脲原体正常寄生的情况，解脲脲原体在女性下生殖道中是一种条件致病菌[9]。解脲脲原体培养阳性结果是否具有临床意义，需要结合临床症状和半定量计数结果解释。解脲脲原体半定量计数结果大于104CCU的情况，处于感染状态的危险性高。临床采集的大部分标本都属于不均一的分泌物，或者标本中支原体浓度较低，可能导致试剂条微孔接种量不均一，药物敏感性试验结果不合理。这样的实验结果没有意义，应重新做药物敏感性试验或弃用此药物。

总之，女性是解脲脲原体的易感人群，遇到疑似泌尿生殖道非淋球菌感染的患者，特别是年轻女性患者应采集宫颈拭子进行支原体培养，鉴定及药物敏感性试验。根据药敏试验结果合理选择抗菌药物，避免滥用抗生素，以免加速耐药率的上升。