盐酸普拉克索片的处方工艺与质量控制

孟晨晨,高威风,李蒙蒙,魏 惠,程铁峰

河南大学 药学院,河南 开封475004

盐酸普拉克索(Pramipexole dihydrochloride)是一种非麦角类衍生物,有保护神经多巴胺的作用,可用于治疗帕金森病的整个阶段到疾病的晚期[1-3]。盐酸普拉克索能够改善早期及晚期的帕金森病运动症状,并能有效缓解帕金森病所伴发的抑郁[4-5],是国内外治疗帕金森病的首选药物[6-7]。目前,临床上所使用的盐酸普拉克索片规格为0.25 mg和1.0 mg。主药在处方中所占含量较低,常规的混合方法很难使主药与辅料均匀地混合。因此我们通过等量递加法和溶剂分散法分别制备了盐酸普拉克索片。为有效控制制剂含量,建立了高效液相色谱法对其含量均匀度和溶出度进行测定。

1 仪器和试药

1.1 仪器

高效液相色谱仪(LC-20AT,日本岛津公司),UV-2600紫外可见分光光度计(日本岛津公司),智能溶出试验仪(ZRC-8D,创兴电子设备制定有限公司),电子分析天平(CP214,奥豪斯仪器有限公司),旋转式压片机(ZP17E,上海天和制药机械公司),电热恒温鼓风干燥箱(DHG-9140A,上海一恒科技有限公司),片剂硬度测定仪(YDP-200C,黄海药检仪器有限公司)以及超声波清洗器(宁波新芝生物科技股份有限公司)等。

1.2 试药

盐酸普拉克索(武汉江民华泰医药有限公司),乳糖、淀粉、微粉硅胶、聚乙烯吡咯烷酮(PVP K30)等辅料(湖州展望药业有限公司),磷酸二氢钾、氢氧化钠(分析纯,天津基准化学试剂有限公司),三氟乙酸、三乙胺(阿拉丁公司),乙腈(天津四友精细化学品有限公司)和蒸馏水等。

2 方法与结果

2.1 处方工艺研究

2.1.1 溶剂分散法称取一定量的盐酸普拉克索、乳糖、淀粉、微粉硅胶,分别过100目筛。取过筛后的盐酸普拉克索加入到适量体积分数为50%乙醇中溶解,然后加入到已经混合均匀的乳糖和淀粉中充分混合均匀后,再加入配好的8%PVP K30水溶液黏合剂；过40目筛制粒,于50℃烘箱中烘干1 h后整粒；最后加入润滑剂于制备好的颗粒中混合均匀,压制成每片0.1 g,规格0.25 mg。

2.1.2 等量递加法

称取一定量的盐酸普拉克索、乳糖、淀粉、微粉硅胶,分别过100目筛。将过筛后的乳糖和淀粉充分搅拌混合均匀,取盐酸普拉克索及等量混合均匀的乳糖和淀粉加入混合均匀,再取等量的乳糖和淀粉加入混合均匀,直至加完处方量的乳糖和淀粉；再加入体积分数为50%的乙醇溶液及配好的PVP K30水溶液黏合剂,过40目筛制粒,在50℃烘箱中烘干1h后整粒；最后加入润滑剂于制备好的颗粒中混合均匀,压制成每片0.1 g,规格0.25mg。

2.2 盐酸普拉克索含量分析方法的建立

参考有关文献[8-12],本研究通过多次试验建立了高效液相色谱法对两种方法制备的盐酸普拉克索片进行含量均匀度、溶出度的测定。

2.2.1 检测波长的确定

用磷酸盐缓冲溶液分别配制适量浓度的盐酸普拉克索溶液和除盐酸普拉克索之外的辅料溶液,在200～400nm范围内进行紫外扫描,确定检测波长。结果见图1。

图1 盐酸普拉克索及辅料的紫外扫描图谱

由图1知,盐酸普拉克索在264 nm处有明显的紫外吸收,而辅料在264 nm处无紫外吸收,对其无干扰,因此选择264 nm作为盐酸普拉克索的检测波长。

2.2.2 色谱条件

色谱柱：Agilent SB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)；流动相：三氟乙酸-三乙胺缓冲液(每1 L中含三氟乙酸0.9 m L、三乙胺0.5 m L)∶乙腈(94∶6)；进样量：100μL；流速：1 m L/min；柱温：30℃；检测波长：264 nm；理论塔板数按照盐酸普拉克索计算不低于3 000。

2.2.3 专属性考察

取适量的除原料药之外的辅料溶液,过0.22μm的微孔滤膜,取续滤液,即得阴性对照试液。按照2.2.2项下的色谱条件进样测定,记录色谱峰,结果见图2。

精密称取一定量的盐酸普拉克索原料药,转移到容量瓶中,用配制好的磷酸盐缓冲液溶解后定容到刻度线,过0.22μm微孔滤膜,取续滤液,即得样品溶液。按照2.2.2项下的色谱条件进样测定,记录色谱峰,结果见图3。

图2 阴性对照高效液相图谱

图3 盐酸普拉克索样品高效液相图谱

由图3知,在2.2.2的色谱条件下盐酸普拉克索的保留时间在4.0～4.5 min之间,峰型较好,分离度较高。空白辅料溶液的色谱图上无色谱峰出现,表明空白辅料对盐酸普拉克索的含量测定无干扰,专属性良好。

2.2.4 标准工作曲线的绘制

精密称取10 mg的盐酸普拉克索原料药,转移到100 m L的容量瓶中,用配制好的磷酸盐缓冲液溶解后定容到刻度线,即得浓度为100μg/m L的标准储备液,分别精密量取盐酸普拉克索标准储备液20μL、50μL、100μL、300μL、500μL、1 m L转移至10 m L的容量瓶中,用溶剂定容至刻度线并摇匀,即得0.2μg/m L、0.5μg/m L、1μg/m L、3μg/m L、5μg/m L、10μg/m L的溶液,分别取适量不同浓度的溶液,过0.22μm微孔滤膜,在2.2.2色谱条件下进样测定。将浓度(X)作为横坐标,对应的峰面积(Y)作为纵坐标并绘制标准曲线,见图4。得到盐酸普拉克索标准曲线方程为

表明了盐酸普拉克索在0.2～10μg/m L浓度范围内线性关系良好。

图4 盐酸普拉克索标准曲线

2.2.5 含量测定分析方法的建立

本实验选择高效液相方法对盐酸普拉克索进行含量测定,建立的高效液相方法精密度RSD为0.86%、重复性RSD为0.98%、稳定性RSD为1.21%、方法回收率为98.63%、RSD为0.6%,RSD均小于2%。说明该方法精密度良好、重复性好、稳定性高、且峰型对称,可用于快速检测盐酸普拉克索片的含量均匀度和溶出度。

2.3 盐酸普拉克索片质量检查

2.3.1 含量均匀度的测定

按照中国药典2015年四部通则中含量均匀度检查法检查,取供试品10片,照各品种项下规定的方法,分别测定每一个单剂以标示量为100的相对含量xi,求其均值X-和标准差S以及标示量与均值之差的绝对值A。

如A+2.2S≤15.0,则供试品的含量均匀度符合要求。

表1 含量均匀度测定

由表1可知,溶剂分散法与等量递加法制得的盐酸普拉克索片的含量均匀度均符合中国药典的规定。等量递加法制备的盐酸普拉克索片所测得的含量明显高于溶剂分散法所制备的盐酸普拉克索片。从平均含量、标准差及含量均匀度来分析比较,等量递加法相较于溶剂分散法优越。

2.3.2 溶出度的测定

通过溶出度测定法(中国药典2015年版四部通则第一法),取本品以枸橼酸盐/磷酸盐缓冲液(p H 6.8)500 m L作为溶出介质,转速为50 r·min-1,按照方法操作,分别在1、3、10、30、60、120 min吸取1 m L,随即进行同时补液1 m L,将所取试液滤过,取续滤液作为供试品溶液。按照2.2.2项测量溶出度,计算每片的溶出量,绘制溶出曲线,结果见图5。

图5 溶出曲线图

由图5可以看出,两种方法制得的盐酸普拉克索片在60 min内的溶出行为能很好地反应出不同工艺之间的差别。在前5 min内,可以看出溶剂分散法相较于等量递加法的溶出较多,10 min～30 min时间内溶剂分散法的溶出速率较快,30 min之后两种方法制备的盐酸普拉克索片的溶出度均趋于平衡状态,60 min时两种方法制备的盐酸普拉克索片均达到了85%以上。

3 结论

目前临床上所应用的盐酸普拉克索片规格为0.25 mg和1.0 mg。主药在处方中所占含量较低,常规的混合方法很难使主药与辅料混合均匀。本研究通过两种方法成功制得盐酸普拉克索片,并且建立的高效液相色谱法精密度良好、重复性好、且峰型对称。可用于快速检测盐酸普拉克索片的含量均匀度和溶出度,并进行有效的质量控制。