抗感败毒口服液对靶动物鸡的安全性试验

冯文丽，刘升，吕凤霞，刘联盟，岳旭龙，郝小倩，舒刚

（1.河南牧翔动物药业有限公司郑州 451162；2.四川农业大学动物医学院成都 611130）

抗感败毒口服液由黄芩、栀子、板蓝根、连翘、绵马贯众和野菊花依据传统中兽医理论组方而成，黄芩清肺经实火，燥湿凉血；栀子通泻三焦实热，凉血解毒共为主药；连翘疏风散热，解毒散结；贯众清气分实热，凉血止血共为臣药；板蓝根，野菊花清热解毒，凉血利咽止痛，共为佐使。全方合用，共奏疏风散热，清热解毒之效。该制剂具有清热解毒，用于鸡外感发热[1]，症见体温升高、精神萎靡、羽毛蓬松、呼吸困难伴有咳嗽等。为了评价该制剂在临床使用的安全性及安全剂量范围，本试验根据农业部第1596号公告《兽用中药、天然药物临床试验技术指导原则》[2]中靶动物安全试验的要求考察抗感败毒口服液的安全性，旨在为临床应用提供数据资料。

1 材料

1.1 试验动物

80只健康雏鸡，体重80±5g，购自雅安凤茗谷禽类养殖专业合作社。

1.2 受试药物

抗感败毒口服液，河南牧翔动物药业有限公司生产，批号：20180601，规格：每1mL相当于原生药量为1.49g。

1.3 仪器设备

AU5800全自动生化分析仪，购自美国贝克曼库尔特公司；SQP型电子天平，购自赛多利斯公司；LEICA RM2025型组织切片机，购自德国Leica公司。

2 方法

2.1 试验动物分组及给药

将80只鸡随机分为4组，每组20只，分别为抗感败毒口服液高、中、低剂量组和空白对照组。其中高剂量组为临床推荐剂量的5倍量（5.0mL/L·天），中剂量组为临床推荐剂量的3倍量（3.0mL/L·天），低剂量组为临床推荐剂量的1倍量（1.0mL/L·天）；饮水给药，连续30d；空白对照组不给药，自由饮水与采食。

2.2 观察及检查指标

1）一般临床观察：试验期间每天观察各组试验鸡的精神状态、采食量等情况，并记录死亡情况及其他异常。如果出现死亡，对死亡试验鸡进行病理剖检和组织学检查。

2）平均增重：试验前及试验结束时逐只称重，计算各组增重情况，以此考察本品对鸡生长性能的影响。

3）血液学和血液生化学检查：试验结束后采集试验鸡血样进行血常规检查，进行红细胞总数（RBC）、白细胞总数（WBC）、白细胞分类计数、血红蛋白（HGB）等指标的测定。红细胞和白细胞采用血细胞计数法测定。并进行血液生化检查，用全自动生化分析仪测定血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、白蛋白（ALB）、总蛋白（TP）、总胆红素（TBiL）、血糖（GLU）、尿素（UREA）、肌酐（Crea）指标。

4）脏器指数：试验结束后，每组随机扑杀10只鸡，收集心、肝、脾、肺、肾等组织，称重后计算脏器指数。脏器指数=器官鲜重（g）/活体重（g）×100%。

5）组织病理检查：给药及观察结束后，各组随机抽取10只鸡进行剖检，观察心、肝、脾、肺、肾等脏器是否出现裸眼病变；如有裸眼病变则做组织石蜡切片，作进一步微观病变镜检。

2.3 数据处理

采用SPSS18.0软件对试验数据进行统计分析，试验数据以“平均数±标准差”表示，组间数据差异性采用单因素方差分析。

3 结果与分析

3.1 抗感败毒口服液对雏鸡临床表现的影响

试验期间，各给药试验组与空白对照组鸡精神状态均良好，采食饮水正常，粪便没有发生明显异常变化，各组无死亡情况发生。

3.2 抗感败毒口服液对体重的影响

给药前和给药后分别称量各组试验鸡体重，根据试验数据可知，高、中、低给药剂量组与空白对照组相比，给药30d后体重增重差异性不显著（P＞0.05），由此可见，抗感败毒口服液对鸡生长性能不会产生负面作用。

表1 抗感败毒口服液对鸡体重的影响

3.3 抗感败毒口服液对血液生理指标的影响

不同剂量组及空白对照组分别在给药后30d后采血测定各项血常规指标值，根据试验数据得知，红细胞（RBC）、血红蛋白（HGB）、白细胞（WBC）、淋巴细胞百分率（Ly）、中性粒细胞百分率（NEU）、单核细胞百分率（Mn）与空白对照组无显著差异（P＞0.05）。这表明，试验后各组鸡的各项血常规指标正常，至少5倍剂量的抗感败毒口服液给药30d不会引起鸡血液生理指标异常。

3.4 抗感败毒口服液对鸡血液生化指标的影响

通过对试验鸡血清生化指标测定，各剂量组与空白对照组在谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、血清总胆红素（Tbil）、血糖（Glu）等多项指标上对比，均未有显著性差异（P＞0.05）。这表明，至少5倍剂量的抗感败毒口服液连续给药30d不会引起鸡血液生化指标异常。

表2 给药后血液生理指标

表3 给药后血液生化指标

3.5 抗感败毒口服液对脏器指数的影响

给药后各组鸡的脏器指数变化见表4。从表中可以看出，给药组鸡的心、肝、脾、肾的脏器指数与空白对照组无显著差异（P＞0.05）。这表明抗感败毒口服液对鸡脏器的生长无明显影响。

表4 给药后鸡脏器指数的变化

3.6 抗感败毒口服液对鸡重要器官病理组织学的影响

经过剖检，各组鸡经肉眼观察内脏器官未见明显病理变化，大小、组织形态、颜色均未见明显异常改变。组织病理学切片检查表明，高剂量组鸡的心、肝、脾和肾均未发现明显病理学变化。心肌纤维致密，相互连结成网状；肝脏中央静脉明显，肝细胞以中央静脉为轴心呈放射状，有不规则的窦状隙；脾脏脾窦和小静脉结构明显，淋巴细胞均匀分布；肾脏组织中肾小管密集，肾小体、远曲小管和近曲小管结构完整。表明至少5倍剂量抗感败毒口服液不会造成鸡实质性器官的病理损伤，具体见图1。

图1 病理组织切片

4 讨论

抗感败毒口服液由黄芩、栀子、板蓝根、连翘、绵马贯众和野菊花组方而成，这几味中药材均被临床广泛应用。王永彬等[3]研究表明长期服用板黄口服液无毒副作用。徐春燕等[4]研究银翘蓝芩口服液对靶动物鸡是安全的。贾兴等[5]研究表明长期服用复方芩蓝口服液无不良作用。段梦迪等[6]对抗感败毒口服液对大鼠的生长和血液理化指标的影响进行研究，结果表明长期应用抗感败毒口服液对大鼠生长和血液理化指标无显著影响，临床用药安全。本试验对投喂抗感败毒口服液推荐剂量1、3、5倍剂量的受试鸡进行了安全性研究和评估。从试验结果可以看出，使用抗感败毒口服液推荐剂量1～5倍剂量的受试鸡均未出现明显的临床症状，血液生理和血液生化指标等参数与空白对照组相比也无显著差异。病理组织学观察显示，高剂量组心脏、肝脏、肾脏等实质脏器均未出现明显的病理组织学变化。由此可以说明，抗感败毒口服液按推荐剂量（1mL/L）饮水给药对靶动物鸡是安全的。