王彩先,李燕平 *,任克良
(1.山西农业大学动物医学学院太原 030032;2.山西农业大学动物科学学院太原 030032)
山西省朔州市某养兔场113 日龄的断奶肉兔发病,精神不振,生长发育和增重变慢,出现零星死亡。该养殖场饲养伊拉肉兔2,000 余只,兔笼为“品”字型结构,机械清粪,自动饮水,半开放式兔舍。本次发病兔舍内饲养有600 余只幼兔,其中450 余只兔表现出不同程度的发病。养殖场采用常规抗菌药物进行防控,收效甚微。经实地观察,并携带病兔在实验室进行诊断,最终确诊并采取联合用药措施,兔病得到控制,详细诊治如下。
病兔表现为精神沉郁,食欲下降,生长发育和增重缓慢,逐渐消瘦。大多病兔出现有腹胀、腹泻,肛门和后肢常会沾有稀便,有时可见尿频症状。有的病兔出现咳嗽和张嘴呼吸,有时还出现尖叫。部分病兔的颈部、颌下、股内侧等部位可见有白色小脓疱。病兔出现零星死亡,死亡率约为7%。
对病兔进行剖检,可见有的肠道充血和出血,尤其是在盲肠和小肠等部位。有呼吸道症状的病兔在剖检后还表现为肺脏肿大,有脓性病灶和白色脓性渗出物,肺脏边缘坏死,有肉样变。
用剖检后病兔的心血、肺脏进行涂片,经革兰氏染色镜检,在涂片中可以见到染成紫色的球菌,在视野中排列成为葡萄串样。
从病死兔的肺脏、肝脏、心脏等部位挑取病料,无菌划线接种于普通营养琼脂、鲜血琼脂上培养观察,经37℃恒温培养24h 后,可见普通琼脂上形成圆形、凸起、有光泽的菌落,菌落大小约为1~2mm。鲜血琼脂上生长的菌落周围形成透明的溶血环。
将培养的病原进行生化试验,分离的病原菌能够分解葡萄糖、麦芽糖、海藻糖、蔗糖,产酸不产气。甲基红反应阳性,VP 反应阴性,不能分解精氨酸和尿素,碱性磷酸酶试验阳性,可以还原硝酸盐。参照《伯杰氏手册(第八版)》[1]确定所培养的病原菌为金黄色葡萄球菌。
采用K-B试纸扩散法进行药敏试验[2]。挑取纯培养后的单个菌落均匀划线于营养琼脂,用灭菌后的镊子夹取药敏纸片分别贴于平板表面,纸片间隔24mm。经37℃恒温培养24h后测量抑菌圈的直径,以标准质控菌株ATCC25922作参照,根据CLSI手册中的标准进行判断[3]。18种抗菌药物进行的药物敏感性试验结果见表1。
由表1结果可见,分离菌对阿米卡星、庆大霉素和卡那霉素高敏。
表1 金黄色葡萄球菌药敏试验结果
使用饱和盐水漂浮法检查病兔粪便和肠道内容物[4]。取病兔粪便和肠道内容物,加入饱和生理盐水,通过双层纱布除去粪渣,将滤液分装在试管内,确保液面略微凸出于管口,静置10min后使用干净的载玻片接触液面,加盖盖玻片后置于高倍显微镜下检查,可在视野内发现球虫卵囊。
根据临床症状和病理变化可以对本次发病做出初步诊断,通过实验室的涂片镜检、病原分离培养、生化试验以及粪便镜检,最终确诊本起病例为兔球虫病继发葡萄球菌感染。
针对本次伊拉肉兔发病,根据诊断结果和药敏试验,制定出相应的治疗措施。针对球虫病采用饮水中添加妥曲珠利溶液,剂量为25mg/kg·bw,首次使用加倍,连用3d。针对葡萄球菌根据药敏试验结果使用庆大霉素,使用的剂量为3,000~5,000IU/kg,连续用药5d,同时使用提升免疫力的药物进行辅助治疗,加强兔舍内的清扫和消毒工作,用药5d后兔群基本恢复正常。
兔球虫病是兔养殖过程中最多发的寄生虫疾病,其对养兔业的危害非常巨大,是最严重的兔病之一,也是长期存在的一个难题[5]。王新秋等[6]通过流行病学调查得知,在我国主要养兔地区,兔球虫病的感染率非常高,尤其是幼兔感染率更高,其中陕西榆林地区和河北部分地区感染率最高,分别高达100%和96.70%。感染率最低的内蒙古包头地区也达到了25.33%。本起兔场的发病兔舍内几乎全部感染,可见兔球虫病在山西某些兔场感染比较严重。询问该场主获知,该场对种兔未进行球虫病预防,同时该批商品兔饲料中添加地克珠利,按常规剂量的2倍进行添加,说明要重视种兔球虫病的防控工作。同时建议适当加大抗球虫药物的使用剂量,及时更换抗球虫药的种类。
金黄色葡萄球菌是家兔的重要致病菌[7]。本病通常在全年均可感染发生,但以温暖潮湿的季节多发,不同品种和日龄的兔均可感染[8]。感染兔常见症状为乳房炎和脚皮炎,皮下脓肿少见[9]。本起兔场发病,均以呼吸道症状和皮下脓肿为主要临床症状,属于较为少见的葡萄球菌感染情况。
兔葡萄球菌病和球虫病是养兔生产中常见多发病,但这两种病混合感染的情况较为少见,韦强等[10]报道球虫混合感染巴氏杆菌病,且不易被发现和确诊。
本起兔群出现球虫病继发葡萄球菌病,提示养兔企业(户)在做好兔球虫病综合防控的同时,注意其混合感染。