免疫组织化学检测在NSCLC鉴别诊断中的应用

程化朋

据相关统计数据，近几年肺癌的发病率在全球范围内表现为上升的趋势，并且拥有极高的致死率，在恶性肿瘤致死的患者中，肺癌在男性患者和女性患者中分别占到第一位和第三位。虽然现阶段人们明确认知到烟草所具备的危害性，但我国烟民总数仍处于较高水平，对于年龄超过40岁的男性而言，肺癌仍为重要致死因素[1]。作为恶性肿瘤疾病之一，肺癌的诊断往往具有一定的滞后性，多数患者都是肺癌晚期才得以确诊，而且以活检小标本为主要获取源，其中约有50%左右无法准确分型非小细胞癌组织学[2]，分子靶向治疗时代的来临，组织学分型面临着巨大的挑战，对此，WHO提出，免疫组化在肺癌组织分型中具有积极意义[3-4]。所以本次以我院于2018年1月—2019年8月期间经病理检查确诊为非小细胞肺癌的120例患者为研究对象，通过免疫组化Envi-sion二步法展开如下研究。

1 资料与方法

1.1 一般资料

以我院于2018年1月—2019年8月期间经病理检查确诊为非小细胞肺癌的120例患者为研究对象，纳入标准：患者或其家属了解并授权本次研究；排除标准：（1）检查前存在放化疗史；（2）存在靶向治疗史；本研究通过医学伦理委员会审核；120例患者中包括男性93例，女性27例，年龄区间为33岁～77岁，均值（61.34±10.20）岁；其中鳞癌组59例，腺癌组61例。

1.2 方法

以4%中性甲醛对所有标本固定，常规石蜡包埋切片，HE染色对其组织形态进行观察，通过免疫组化Envi-sion二步法检测，以PBS代替一抗充当阴性对照，而阳性对照则为已知阳性片，EDTA抗原热修复切片，然后滴加TTF-1、NapsinA、P63以及CK5/6一抗，常规孵育、洗涤，然后取DAKO提供的辣根过氧化物酶滴加，充当二抗，常规孵育，DAB显色之后，对细胞核进行复染，然后脱水、封片、镜检。

1.3 观察指标

分析腺癌、鳞癌患者的蛋白表达情况，包括TTF-1、NapsinA、P63以及CK5/6。判定标准如下：无色或是阳性细胞分＜10%，记作0分；浅黄色、黄色，或是阳性细胞分区间为10%-50%，记作1分；棕黄色，或是阳性细胞分＞50%，记作2分；若两项结果超过2分，属于阳性，反之为阴性[5]。

1.4 统计学方法

本次研究所采用的统计学工具为SPSS 19.0，研究数据记录形式以计数资料为参考，即例数/百分比（n/%），经χ2检验，若结果显示P＜0.05，则判定差异有统计学意义存在。

2 结果

腺癌组患者在TTF-1、NapsinA方面的阳性表达率更高，而鳞癌组患者在P63、CK5/6方面的阳性表达率更高，二者对比，组间差异存在明显的统计学意义（P＜0.05）。如表1。

3 讨论

作为世界范围内发生率较高的一种恶性肿瘤类疾病，肺癌对人们生命安全具有较高的威胁性，据有关资料统计[6]，现阶段，肺癌在我国的发生率以及致死率均居于癌症首位。而肺癌患者中，约有80%左右为非小细胞肺癌，常见的包括大细胞癌、鳞癌以及腺癌，近些年，有关腺癌、鳞癌的临床鉴别逐渐受到关注，分析原因，主要包括两个方面：其一，近十年，随着医疗技术的发展，肺癌分子靶向治疗面临着更高的要求，例如腺癌普遍存在基因活化情况，而晚期鳞癌普遍存在PD-1单抗Nivolumab[7-8]；其二，只有非鳞非小细胞肺癌才能接受培美曲塞、贝伐单抗等药物的治疗，若患者为鳞癌，误用上述药物，会出现重度不良反应，严重的甚至会致死[9]。对此，WHO提出，免疫组化在肺癌组织分型中具有积极意义，认为患者的TTF-1、P63均呈现阴性结果，有很高的特异性可以认定为腺癌[10]；若TTF-1呈现阴性，P63呈现阳性，则属于鳞癌；若TTF-1、P63均呈现阳性，需要检测患者的CK5/6，若为阴性结果，且TTF-1、P63比值较低，认为鳞癌可能性较大[11]；而NapsinA也具有较高的特异性，若腺癌患者TTF-1呈现阴性低分，NapsinA常见于阳性[12]。基于上述研究理论，本次以我院于2018年1月—2019年8月期间经病理检查确诊为非小细胞肺癌的120例患者为研究对象，通过免疫组化Envision二步法展开研究，结果显示，腺癌组患者在TTF-1、NapsinA方面的阳性表达率更高，而鳞癌组患者在P63、CK5/6方面的阳性表达率更高，二者对比，组间差异存在明显的统计学意义（P＜0.05）。可见通过对肺癌活检标本进行免疫组化检测，可以有效鉴别非小细胞肺癌分型。

表1 腺癌、鳞癌患者蛋白表达阳性率对比[例（%）]

综上所述，以免疫组织化学检测方法检测肺癌活检标本，观察非小细胞肺癌中蛋白的具体表达，可以有效鉴别鳞癌、腺癌，提供确诊率，有利于患者的后期治疗。