猴头菇子实体对运动后细胞氧化损伤的保护作用*

于学考，刘海东

（1.四川商务职业学院，四川 成都 611131；2.成都师范学院体育学院，四川 成都 611130）

猴头菇（Hericium erinaceus） 属于药食兼用真菌，作为食用菌王国的珍品，以其药用价值受到广大消费者的青睐。新鲜的猴头菇子实体呈白色球形，干制品的猴头菇子实体色泽白中带黄，其肉质、内实，无柄，因其形状似猴子的头而得名。猴头菇富含多种人体必需氨基酸、蛋白质等营养元素[1]，自古就有“山中猴头，海味鱼翅”的说法，与鱼翅、熊掌、燕窝并誉为四大名菜。中医认为“猴头菇性平味甘，有利五脏、能够助消化、滋补身体”，常被用于胃病的治疗[2]；而现代医学研究表明，猴头菇还能够提高人体免疫力、延缓衰老，具有抗疲劳、滋养气血等功效，猴头菇子实体中的多糖是提高人体抗氧化能力和免疫力的活性物质来源，也是其药理活性的主要成分。猴头菇多糖具有抗肿瘤、抗衰老、提高人体免疫力等作用，可清除人体内各类活性氧自由基[3]。而自由基生物医学理论研究表明，人体内氧自由基的产生和清除是基本平衡的，当机体内的自由基过量时就会引起细胞内多种物质的不良变化等，导致运动细胞损伤，引起衰老、疲劳等现象。通过针对猴头菇多糖营养成分进行测定分析，并对其氧化和还原稳定性开展试验，研究分析猴头菇多糖的含量和相关的理化性质进行测定，研究其对运动细胞氧化损伤的保护作用，为猴头菇多糖产品的研制提供一定的理论依据。

1 试验试剂

试验主要材料为猴头菇子实体粉，提取正常采用水提法制备猴头菇多糖样品溶液备用。

2 猴头菇多糖体外抗氧化活性试验

2.1 对超氧阴离子（O2-）清除能力的测定

用 10 mmol·L-1HCl配置 30 mmol·L-1邻苯三酚溶液0.4 mL；取pH 8的50 mmol·L-1三羟甲基氨基甲烷缓冲液5.4 mL，加入0.2 mL猴头菇多糖样品溶液摇匀；将两溶液同时放入水浴锅在（25±2）℃下静置15 min，取出后迅速混合均匀，在320 nm处用分光光度计每隔30 s测量一次吸光度，共计时6 min，取12次吸光度的平均值作样品组；用等量蒸馏水代替猴头菇多糖样品溶液，作为空白组；用10 mmol·L-1HCl溶液代替邻苯三酚溶液，用等量蒸馏水代替猴头菇多糖样品溶液，作为对照组进行对比试验，清除率（OE，%）计算公式为：

式中：X为样品吸光度；X1为对照组吸光度；X0为空白组吸光度。

2.2 对1，1-二苯基-2-苦苯肼自由基（DPPH·）清除能力的测定

用无水乙醇为溶剂配置1 mL，0.03 mg·mL-1的DPPH·溶液，加入猴头菇多糖样品溶液2 mL，混合均匀后在室温下静置30 min，在520 nm处的测量其吸光度，作为样品组；以2 mL蒸馏水代替猴头菇多糖样品溶液作为空白组；用2 mL无水乙醇混合液作为对照组进行对比实验，DPPH·清除率（DE，%）计算方式为：

式中：X为样品吸光度；X2为对照组吸光度；X0为空白组吸光度。

2.3 对羟自由基（·OH） 清除能力的测定

通过芬顿（Fenton） 反应来得到·OH[4]，羟自由基和水杨酸的反应会产生一种有色物质，通过测量这种有色物质的吸光度来测量·OH的清除能力。取猴头菇多糖样品溶液1 mL，依次加入4 mmol·L-1硫酸亚铁液1 mL、0.01%H2O2溶液1 mL，每次加入均需混合均匀后再加入下一溶液，将最终的混合溶液放入恒温水浴锅，在（35±2）℃下水浴30 min。最后加入4 mmol·L-1的水杨酸溶液1 mL，混合均匀后在520 nm处测量其吸光度，作为样品组；用1 mL蒸馏水代替1 mL水杨酸溶液，测量猴头菇多糖样品溶液的吸光度，作为本底组；用蒸馏水代替抗氧化剂作为空白对照组，·OH清除率（OHE，%）计算公式为：

式中：X为样品吸光度；X3为对照组吸光度；X0为本底吸光度。

3 试验结果与分析

3.1 对超氧阴离子（O2-）清除效果

对猴头菇多糖样品进行O2-的清除效果，结果如图1所示。

由图1可知，猴头菇多糖对O2-的清除效果明显，并随猴头菇多糖样品溶液浓度升高，对O2-的清除效果越好，1 mg·mL-1浓度时对O2-的清除率可达到35.2%，当浓度达到了10 mg·mL-1时O2-清除率可达58.5%，说明猴头菇多糖具有较强的清除O2-的活性，且清除效果与多糖浓度成正比。

3.2 对1，1-二苯基-2-苦苯肼自由基（DPPH·）清除效果

对猴头菇多糖样品进行DPPH·自由基的清除效果，结果如图2所示。

由图2可知，猴头菇多糖对DPPH·的清除效果明显，并随猴头菇多糖样品溶液浓度升高，对DPPH·的清除效果越好，1 mg·mL-1浓度时对DPPH·的清除率可达42.3%，当浓度达到10 mg·mL-1时DPPH·清除率可达74.1%，说明猴头菇多糖具有较强的清除DPPH·的活性，且清除效果与多糖浓度成正比。

3.3 对羟自由基（·OH） 清除效果

对猴头菇多糖进行·OH的清除试验，结果如图3所示。

由图3可知，猴头菇多糖对·OH的有较高的清除率，是一种较好的·OH清除剂。并且随着多糖的浓度升高，对·OH的清除效果越好，1 mg·mL-1的猴头菇多糖对·OH的清除率为22.3%，10 mg·mL-1的猴头菇多糖对·OH的清除率达55.6%，说明猴头菇多糖也是一种较好的·OH清除剂。

4 结论

以猴头菇子实体为原料，对猴头菇子实体的体外抗氧化性进行了研究。通过对O2-、DPPH·、·OH的清除效果试验表明，猴头菇多糖具有良好的清除多种自由基的能力，且清除效果与多糖的浓度成正比关系。这说明猴头菇多糖有良好的体外抗氧化活性，可以对运动细胞氧化损伤直到一定的保护作用。