PTX-KT凝胶对痔疮模型的效果

(1山东医学高等专科学校，山东 临沂276000；2鲁南制药集团股份有限公司新药安评中心)

痔疮临床常见，其症状主要表现为炎性疼痛、出血。研究证实，直肠静脉回流障碍是其发病的重要原因，马应龙痔疮膏对水肿、出血、疼痛等有较好疗效，临床常用[1-2]。己酮可可碱(Pentoxifylline，PTX)主要用于各种微循环障碍引起的疾病。酮咯酸氨丁三醇(Ketorolac Tromethamine，KT)是一种非甾体类抗炎药，能抑制前列腺素生物合成，临床主要适用于急性较严重疼痛的短期治疗[3]。本研究将PTX和KT联合制备成凝胶制剂，在痔疮模型中取得了理想的效果，现报道如下。

1 材料与方法

1.1材料 (1)药品及试剂。PTX-KT凝胶由公司实验室自制，巴豆油、伊文思蓝、吡啶、甲醛购自国药集团化学试剂有限公司，乙醚购自天津市申泰化学试剂有限化司，生理盐水购自山东长富洁晶药业有限公司。(2)实验动物。SD大鼠，体重200～220 g；KM小鼠，体重18～20 g。由山东新时代药业有限公司动物中心提供[合格证号：SCXK(鲁)2006 0019]。(3)仪器。紫外分光光度计(尤尼斯上海仪器有限公司)；电子分析天平(d=0.0001 g)，北京赛多利斯仪器系统有限公司；组织病理设备(上海莱卡公司)。

1.2方法

1.2.1直肠溃疡动物模型的制作 动物模型制作根据参考文献[4]。取SD大鼠60只，雌雄各半，体重(180±20)g，将大鼠随机分为6组：模型组(空白)、马组(给予马应龙痔疮膏)和4个PTX-KT凝胶组(A组0.1%PTX+0.5%KT，B组0.1%PTX+1.0%KT，C组0.3%PTX+0.5%KT，D组0.3%PTX+1.0%KT)，分别直肠内给药，2次/d，连续3 d，最后1天巴豆油造模后2 h，每鼠再给药1次，6 h后全部大鼠处死后统一留取肛门处直肠，其中一半按照参考文献[4]计算直肠肛门系数，另一半用10%福尔马林固定，苏木精、伊红染色，400倍镜采集图片。

1.2.2福尔马林疼痛模型制作 另取SD大鼠60只，雌雄各半，体重(180±20)g，按前述分为6组并直肠内给药1次后，用福尔马林在直肠内注射造成炎性疼痛，分别在不同时间进行评分[5]。

1.2.3小鼠尾部出血时间的测定 取KM小鼠60只，雌雄各半，体重(20±2)g，按前述分为6组，将全部小鼠尾部用小圈皮筋绑扎，5 h后松开皮筋，对小鼠尾部每天按前述药物涂抺，2次/d，连续给药3 d，末次给药1 h后，剪去小鼠尾尖0.4 cm，每10 s用干净的滤纸片轻轻接触小鼠尾尖，吸去血滴，直到没有血迹出现，并记录时间。

2 结果

2.1各组相关指标的比较 直肠肛门系数：各组总的比较有统计学意义，两两比较显示，C组与模型组有统计学意义(q=4.93，P<0.05)，A、B、C、D及马组之间无统计学意义。疼痛评分：0-15 m、15-30 m时，C组与模型组有统计学意义(q=4.29，4.54；P<0.05)，其他各组之间均无统计学意义；30-45 m、45-60 m时，各组之间均无统计学意义。出血时间：各组之间均无统计学意义。见表1。

表1 各组相关指标的比较

2.2各组典型病理变化 见封二图1-6。从病理图片可见，图5模型组直肠组织黏膜层广泛变性坏死，可见大量坏死组织脱落于管腔内，粘膜下层组织有明显充血和水肿，可见造模成功；图6马组与A组可见局部直肠粘膜组织变性坏死，有轻度的水肿和充血；B组与D组未见组织变性坏死，但存在轻度水肿与散在充血；C组粘膜上皮组织排列整齐，粘膜及粘膜下组织未见明显坏死及充血和水肿。

3 讨论

痔是临床最常见的病病之一，发病率可达67%[4]，它的形成主要是由于便秘、腹泻、妊娠等造成静脉回流障碍，使肛管和肛门缘静脉血管曲张，形成1个或多个静脉团，直至断裂并伴有静脉丛淤血、扩张、融合，甚至夹杂细小的动、静脉瘘，最后形成痔，痔形成后，必然会出现一系列炎症并发症，严重者可形成瘘或窦道[1]。动物四肢行走，其直肠静脉与心脏几乎处于同一水平，血液回流较好，不会产生痔疮，因此动物痔疮模型多数只能看作是近似模型，与痔疮发病的真实情况有较大差异。如何制作与人类痔疮较为一致的动物模型是痔疮药效学研究中亟待解决的问题。本文利用各种实验方法，把人类痔疮的病理生理一一分解开来，逐一用动物模型模拟出来。

PTX可抑制TNF生成，减轻IL-1、IL-2诱导的损害，可恢复下降的细胞功能，改善组织的供血和供氧，舒张血管和增加循环，可有效改善微循环[6]，针对直肠周围静脉曲张和微循环不良造成的出血有良好的阻断作用。KT属非甾体抗炎药，临床主要用于术后镇痛[3]。本研究将二者合用，采用不同的剂量组合，与模型组及马组对照，结果显示，在直肠肛门系数、镇痛、出血时间等方面以0.3%PTX+0.5%KT组合效果最好。

总之，PTX与KT合用对巴豆油造成的大鼠直肠溃疡与炎症模型、福尔马林所致大鼠直肠疼痛模型均有良好的治疗结果。