C/EBPβ和vimentin在肝癌组织中的表达及临床意义

周霜霜 张伯

（1苏州大学附属张家港医院＜张家港市第一人民医院肿瘤内科＞ 江苏 张家港 215600）

（2苏州大学附属张家港医院＜张家港市第一人民医院普外科＞ 江苏 张家港 215600）

原发性肝癌是全球范围内最常见、死亡率较高的恶性肿瘤，而肝细胞癌（HCC）占原发性肝癌的90.0%，全球约有HCC新发病例50万例，而我国占全球新发病例的50.0%，成为世界上肝癌发生率最高的国家[1]。既往研究表明[2]：肝癌恶性程度相对较高，发展迅速，再加上患者发病隐匿，容易被患者忽视，导致患者治疗后5年生存率较低。C/EBPβ是转录因子CCAAT/增强子结合蛋白家族成员，能与DNA增强子区域结合，加强下游基因转录效率[3]；vimentin是一种细胞骨架蛋白，能直接参与、调节细胞的运动与增殖，在肿瘤细胞的侵袭和转移中发挥重要作用。因此，本研究以肝癌患者作为对象，探讨C/EBPβ和 vimentin 在肝癌组织中的表达及临床意义，报道如下。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选择2018年4月－2019年3月肝癌患者60例作为对象，所有患者均拟行手术治疗，手术过程中取病灶组织及配对癌旁组织（距离病灶≥3cm）。其中，男44例，女16例，年龄23～79岁，平均（53.19±5.63）岁。患者中，有乙肝携带42例，无乙肝携带18例；TNM分期：-I、Ⅱ期36例，Ⅲ、IV期24例。纳入标准：（1）符合原发性肝癌诊断标准，均经病理组织检查确诊；（2）均拟行手术治疗，且患者均能耐受；（3）意识清楚，能与医生进行沟通、交流。排除标准：（1）合并精神异常、认知功能障碍或入院资料不全者；（2）合并凝血异常、严重心、肾异常者或伴有自身免疫疾病者。

1.2 方法

（1）仪器与设备。C/EBPβ抗体、vimentin 抗体试剂盒（购置于苏州优宁维生物技术服务有限公司）、S-P试剂盒、DAB显色试剂盒（福州迈新生物技术开发）、无水酒精、梯度浓度酒精；（2）检测方法。患者拟行手术治疗，手术过程中取病灶组织及配对癌旁组织，采用免疫组织化学法测定不同组织中C/EBPβ和vimentin 表达水平，取上述获得的病灶组织与癌旁组织，利用多聚甲醛4%常温下固定，经石蜡包埋后制备4um切片，向切片中加入浓度为3%的H2O2阻断内源性过氧化物酶，分别加入C/EBPβ和vimentin一抗（以PBS代替一抗作阴性对照），4℃下过夜，然后加入生物素标记的C/EBPβ和vimentin二抗，常温下完成10min孵育，利用DAB显色后进行苏木素染色，利用中性树胶常规封固。免疫组化染色下随机取10个非重叠视野，完成细胞阳性比例计算；②判断方法。C/EBPβ和vimentin阳性信号位于胞和、胞浆，上述抗体的阳性对照染色强度均记为2分；0分：待测组织细胞无信号，1分弱于对照；2分与对照相仿；3分：强于对照组，估算阳性区域百分比[4]。

1.3 统计学分析

数据采用SPSS18.0统计软件进行统计分析，计数资料采用率（%）表示，进行χ2检验，计量资料采用（±s）表示，进行t检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。

2.结果

2.1 不同组织中C/EBPβ与Vimentin蛋白的表达比较

肝癌病灶组织中C/EBPβ与Vimentin蛋白阳性率，均高于癌旁组织（P＜0.05），见表1。

表1 不同组织中C/EBPβ 与 Vimentin 蛋白的表达比较[n(%)]

2.2 原发性肝癌不同病理下C/EBPβ与Vimentin蛋白阳性率比较

原发性肝癌C/EBPβ与 Vimentin 蛋白阳性率与年龄、性别、AFP水平、是否有门静脉侵犯、肝功能分级及肝硬化不具有统计学意义（P＞0.05）；原发性肝癌C/EBPβ与 Vimentin 蛋白阳性率与肿瘤直径、分化类型、TNM分期具有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 原发性肝癌不同病理下C/EBPβ与 Vimentin 蛋白阳性率比较

3.讨论

vimentin 主要表达于间充质细胞，多种上皮源性肿瘤均可出现波动蛋白异常表现，能直接参与肿瘤的发生、发展，能作为上皮源性肿瘤的预测指标。既往研究表明：vimentin是EMT的重要间质标记，是间质细胞迁徙的重要调节者，在肝癌、胃癌等恶性肿瘤中均能直接促进肿瘤的侵袭、转移。C/EBPβ属于转录因子CCAAT/增强子结合蛋白家族重要成员，能与DNA增强子区域结合增强下游基因转录效率。既往研究表明：C/EBPβ能调节细胞增殖，直接参与炎症反应。国外学者研究表明：C/EBPβ表达失调与肿瘤恶化存在紧密的联系，能提高肿瘤细胞的存活率，促进肿瘤的发生、发展[5]。本研究中，肝癌病灶组织中C/EBPβ与Vimentin蛋白阳性率，均高于癌旁组织（P＜0.05）；原发性肝癌C/EBPβ与Vimentin 蛋白阳性率与肿瘤直径、分化类型、TNM分期具有统计学意义（P＜0.05），说明C/EBPβ和vimentin在肝癌组织中呈高表达，且与临床病理存在紧密联系，能直接参与疾病的发生、发展。

综上所述，C/EBPβ和 vimentin 在肝癌组织中呈高表达，且与患者恶性程度有关，能反映患者预后，指导临床治疗。