一起家庭食源性疾病事件的病原学及分子生物学调查分析

沈静 张静 王姗 金虹飞

（上海市虹口区疾病预防控制中心 上海 200082）

食源性疾病事件在突发公共卫生事件中占有很大的比例，因而明确该事件的致病菌，加强日常食源性疾病的管控就显得尤为重要。2019年6月14日15时55分我中心急传科接辖区某医院电话报告，称该院肠道门诊接诊一名腹泻病人，自述本人及家中其余2名家属食用酱鸭后均有腹泻症状。随即，本疾病预防控制中心应急办派工作人员赴医院及病例家中开展流行病学调查和处置工作，经调查该家庭3名成员分别出现不同程度的发热、腹泻症状。于此同时，本单位实验室也对流调人员采集的现场标本开展系列微生物学检测。

1.资料与方法

1.1 样品来源

2019年6 月14 日20 时收到流调人员送检的病例肛拭标本1件；家属肛拭样品2件；食品酱鸭1件。

1.2 检测方法

1.2.1 检测标准依据《感染性腹泻诊断标准》WS 271-2007,《食品安全国家标准 食品微生物学检验》GB 4789.4—2016[1]对送检样本开展增菌、分离培养、生化鉴定、血清学鉴定等致病菌检测。

1.2.2 PFGE检测参照美国CDC提供的PFGE分子分型的标准实验室规程对肠炎沙门氏菌进行脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析[2]。

1.2.3 药敏检测依据美国CLSI推荐的微量肉汤稀释法,购置商品化药敏板进行药敏试验,选用30种抗生素包括：氨苄西林AMP、氨苄西林-舒巴坦AMS、四环素TET、氯霉素CHL、复方新诺明SXT、头孢唑林CFZ、头孢噻肟CTX、头孢他啶CAZ、头孢西丁CFX、庆大霉素GEN、亚胺培南IMI、萘啶酸NAL、阿奇霉素AZI磺胺异噁唑SUL、环丙沙星CIP、阿莫西林-克拉维酸AMC、头孢噻肟-克拉维酸CTX-T、头孢他啶-克拉维酸CAZ-C、多粘菌素E CT、多粘菌素B PB、米诺环素MIN、阿米卡星AMI、氨曲南AZM、头孢吡肟FEP、美罗培南MEM、左氧氟沙星LEV、多西环素DOX、卡那霉素KAN、链霉素STR、吉米沙星GEM。根据CLSIM100-S27(2017)出版的药敏试验指南进行耐药判定,质控菌株为大肠埃希氏菌ATCC25922。

2.结果

2.1 细菌培养及鉴定结果

样品中分离出4株肠炎沙门氏菌。其中1株来自病例，2株来自其家属，另一株来自于食品酱鸭（购置于单位食堂）。

2.2 PFGE分型结果

4株肠炎沙门菌依次编号HKSM19007～`HKSM19010基因组DNA经XbaI内切酶酶切后,产生4条条带数目和分子量大小完全一致的条带，见下图1。通过BioNumerics软件分析形成了聚类图,可见条带数目和位置也完全相同，相似度达100%,可见来自同一克隆株,具有同源性，见图2。

图1 肠炎沙门菌脉冲场凝胶电泳分型图

图2 4株肠炎沙门氏菌的聚类树状图

2.3 药物敏感性试验结果

经药敏试验4株肠炎沙门氏菌对AMP,NAL,Sul,STR的耐药率为100%；对CFZ的耐药率为75%；对AMS的耐药率为50%，对其余24种抗生素敏感性为100%，可见具有相似的耐药谱，结果见表。

表 4株肠炎沙门氏菌的耐药谱

3.讨论

此次事件通过对细菌培养及鉴定结果、分子溯源分析以及细菌耐药谱的分析，可以认为该事件是由于家庭成员食用了被肠炎沙门氏菌污染的酱鸭所导致的一起聚集性食源性疾病事件。此次调查过程中所采集的标本包括了可疑食物和病例，分离到了相同血清型的沙门氏菌，并且经PFGE分子分型获得了完全一致的条带为判定肠炎沙门氏菌引起的食源性疾病事件提供了可靠的证据。但是，据流调显示可疑食物酱鸭购买于患者儿子单位食堂，没能采集到食物加工的环节是本次事件证据链的重要缺失，希望今后遇到此类事件相关部门能协同合作采集到更完整的样本。

PFGE分型被认为是目前细菌分子流行病学研究的“金标准”[3]。此次事件就是我们实验室将PFGE 技术在病原菌分子溯源方面一次有效的实践。然而，我们国家对于肠道致病菌的脉冲场数据库包含的数据资料还十分有限,因而加快建设国家致病性识别网体系就显得非常重要。

肠炎沙门菌是沙门菌食物中毒最常见的血清型之一[4]。为了避免此类食源性疾病的发生，我们普通老百姓最好采购新鲜的食材，应避免使用冰箱内久置存放的食品，减少隔夜菜的摄入，本次事件经流行病学调查，正是由于食用了放置于冰箱的隔夜酱鸭所致。当下天气炎热，食品极其容易腐败变质，卫生监督部门，应加大对餐饮业，集体食堂，学校等各类场所的监查力度，着重加强督查食品采购、贮存、加工、销售中容易造成食源性疾患的重要环节[5]。