辅助使用叶酸对H型高血压并冠心病模型大鼠炎性因子的影响*

王长录，郑昭芬，邹琼超，彭 翔，向媛媛，张 乐，唐铭翔

（湖南省人民医院心血管内科，湖南 长沙 410000）

H型高血压属原发性高血压，患者同型半胱氨酸（HCY）异常升高，炎性反应严重，可导致动脉粥样硬化等而影响其他心脑血管系统，其中，冠状动脉粥样硬化性心脏病（简称冠心病）是常见并发症[1]。因此，及时有效地防治H型高血压及心功能损伤具有重要意义。近年来多个研究发现，叶酸治疗H型高血压效果较好[2-3]。本研究中探讨了叶酸对H型高血压并冠心病模型大鼠炎性因子及心肌损伤的影响，旨在为叶酸辅助治疗该病提供依据。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 动物、仪器与试药

动物:SPF级自发性高血压SD大鼠60只，雄性，8周龄；SPF级SD大鼠，雄性，8周龄，均购自北京维通利华生物有限公司，动物生产许可证号为SCXK（京）2012-0001。标准条件饲养，自由进食、饮水，适宜温度、湿度，人工黑暗／光照交替喂养。常规标准饲料均购自北京维通利华实验动物技术有限公司。

仪器:7020型全自动生化分析仪（日本Hitachi公司）；MC4000型大鼠无创血压测量系统（美国Harvard Apparatus公司）；5418R型离心机（德国Eppendorf公司）。

试药:异丙肾上腺素（华润双鹤药业股份有限公司，批号为1102）；2%蛋氨酸（张家港市华昌药业有限公司，批号为20145033）；阿托伐他汀钙片（辉瑞制药有限公司，批号为20151407）；马来酸依那普利片（杭州默沙东制药有限公司，批号为20160083）；叶酸片（常州制药厂有限公司，批号为32023302）。

1.2 方法

分组与建模:60只大鼠随机分为A组、B组和C组，各20只，均饮用含2%蛋氨酸水8周，以建立H型高血压模型，大鼠血浆HCY＞10 μmol／L即为建模成功。取上述大鼠，腹部皮下注射异丙肾上腺素（30 mg／kg）1次，以建立H型高血压并冠心病模型。建模成功后，A组和B组大鼠均灌胃阿托伐他汀（每天1次，每次20 mg），马来酸依那普利（每天1次，每次10 mg）；B组大鼠增加灌胃叶酸（每天1次，每次0.8 mg）；C组大鼠灌胃等体积0.9%氯化钠溶液，每天1次，均连续2周。

观察指标:取尾静脉血2mL，4℃条件下静置30min，3000 r／min离心10 min，采用全自动生化分析仪测定血浆Hcy、炎性因子[血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）]和心肌酶指标[天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）和肌酸激酶（CK）]水平，试剂盒均购自上海仁捷生物科技有限公司，按相关说明书操作。采用大鼠无创血压测量系统测定大鼠血压，将大鼠尾巴穿过尾套后将尾套连接换能器，36℃预热15 min，待大鼠尾动脉完全扩张后给尾套加压，待脉搏信号完全消失后缓慢放气至脉搏信号恢复正常，连续测定3次取平均值。

1.3 统计学处理

采用SPSS 22.0统计学软件分析。计数资料以率（%）表示，行 χ2检验；计量资料以表示，行t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

与C组比较，A组和B组大鼠血浆Hcy，TNF-α，IL-6，AST，LDH，CK 水平及舒张压（DBP）均显著降低（P＜0.05）；与A组比较，B组大鼠上述指标改善程度更优（P＜0.05）。详见表 1。

表1 3组大鼠检测指标水平比较（±s，n=20）

表1 3组大鼠检测指标水平比较（±s，n=20）

注:与 C 组比较，#P＜0.05；与 A 组比较，*P＜0.05。

组别A组B组C组CK（U ／L）156.69 ± 11.89#108.78 ± 8.05#*382.26 ± 12.77 HCY（μmol／L）10.12 ± 1.89#8.62 ± 1.15#*14.87 ± 3.22 DBP（mmHg）102.54 ± 12.78#88.45 ± 10.14#*129.72 ± 13.69 TNF- α（ng ／mL）3.24 ± 0.35#2.81 ± 0.28#*4.29 ± 0.25 IL-6（ng／mL）89.46 ± 6.58#78.21 ± 7.55#*110.78 ±9.45 AST（U ／L）21.15 ± 3.62#16.45 ± 3.87#*27.55 ± 3.06 LDH（U ／L）66.87 ± 7.22#43.65 ± 6.48#*97.22 ± 8.45

3 讨论

HCY 异常升高（＞ 10 μmol／L）的原发性高血压为H型高血压[4]。血压长期异常可明显影响患者的血管功能，导致冠心病等心脑血管疾病的发生，而其高HCY水平与动脉粥样硬化密切相关，因此，H型高血压患者可出现心功能损伤和合并冠心病等心血管疾病，可进一步加重其病情而影响预后[5]。本研究中，H型高血压模型大鼠的心肌酶指标异常升高，证实了H型高血压可造成明显的心功能损伤。

HCY是食物蛋氨酸衍生的含巯基氨基酸，亚甲基四氢叶酸还原酶基因单核苷酸多态性降低相关酶活性、B族维生素和辅助因子叶酸缺乏均可导致其生成的增加，而血液中HCY水平异常升高可增加动脉粥样硬化及脑卒中等脑血管疾病的发病风险，患者心血管功能可出现明显损伤，心肌细胞亦可受到明显影响[6-7]。研究认为，HCY是蛋氨酸代谢中间产物，其高HCY水平与体内叶酸缺乏密切相关[8]。因此，叶酸辅助治疗H型高血压可取得较好疗效[9-10]。本研究结果显示，叶酸辅助使用可更快速、有效地降低模型大鼠血压及HCY水平，证实了HCY高水平与叶酸缺乏有关。

炎性反应亦是高血压疾病重要病理过程，与血管疾病密切相关[11]。本研究结果显示，H型高血压模型大鼠炎性细胞因子表达水平进一步升高，提示高HCY水平可能加重炎性反应，辅助使用叶酸可更快速、有效地降低其炎性因子水平。

综上所述，辅助使用叶酸可降低H型高血压并冠心病模型大鼠炎性因子水平。