化学发光免疫法检测肿瘤标志物CA199及AFP对原发性肝癌的诊断价值

杨 丽

(郑州市第七人民医院，河南郑州 450000）

肝癌为临床常见的发病率和死亡率均较高的恶性肿瘤之一，在各种癌症致死率中排第二位[1]。有调查发现，我国每年新发肝癌人数约25万，严重危害着国民的生命健康[2]。由于肝癌早期无明显症状，多数发现时肿瘤已发展至中晚期，治疗困难且预后差。检测血清肿瘤标志物是目前临床诊断肝癌的重要方法之一，而在血清肿瘤标志物的检测方法中，化学发光免疫法是应用较为广泛的一种。为证实化学发光免疫法在肝癌诊断中的应用价值，本研究以54例原发性肝癌患者和50例肝脏良性病变患者作为研究对象，探讨了化学发光免疫法检测肿瘤标志物糖类抗原19（9CA199）、甲胎蛋白（AFP）诊断原发性肝癌的价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2018年2月-2019年1月我院54例原发性肝癌患者纳入肝癌组，并取同期50例肝脏良性病变患者作为对照，为良性病变组。肝癌组男40例，女14例，年龄40～78岁，平均（58.73±8.55）岁；良性病变组（单纯性肝囊肿23例，局灶性结节增生11例，肝血管瘤10例，炎症性病变6例）男31例，女19例，年龄37～77岁，平均（57.69±9.41）岁。两组性别、年龄比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 检测方法和判断标准 在清晨空腹状态下，采集两组受试者静脉血5ml，并于不加抗凝剂的条件下分离血清，使用BHP 9507型全自动化学发光免疫分析仪（购自西门子公司）检测血清肿瘤标志物CA199和AFP的水平，严格依据说明书进行操作。CA199、AFP的正常值分别为CA199≤39U/L、AFP≤20μg/L，超过正常值范围即判断为阳性。

1.3 统计分析 利用SPSS 19.0统计软件处理数据资料。计数资料用（%）表示，行Fisher精确检验；计量资料用（±s）表示，两两比较采用t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。以ROC曲线确定CA199、AFP诊断原发性肝癌的最佳截断点，并计算灵敏度、特异度和准确度。

2 结果

2.1 两组受试者血清CA199、AFP水平比较 肝癌组血清CA199和AFP水平均明显高于良性病变组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表1：

表1 两组受试者血清CA199、AFP水平比较（± s ）

表1 两组受试者血清CA199、AFP水平比较（± s ）

组别例数CA199（U/ml）AFP（μg/L）肝癌组 54 108.73±47.22 319.45±146.78良性病变组 50 25.51±9.47 37.20±15.16 12.232 13.526 P＜0.05 ＜0.05 t

2.2 两组受试者血清CA199、AFP阳性率比较 肝癌组CA199、AFP阳性率均显著高于良性病变组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2：

表2 两组受试者血清CA199、AFP阳性率比较[n(%)]

2.3 CA199、AFP诊断原发性肝癌的ROC曲线 血清CA199、AFP诊断原发性肝癌的ROC曲线见附图。CA199、AFP曲线下面积（AUC）分别为0.889、0.857。根据ROC曲线，CA199、AFP诊断原发性肝癌的最佳截断点分别为76.91U/ml、207.84μg/L，二者诊断原发性肝癌的灵敏度分别为79.63%、85.19%，特异度均为84.00%。

附图 血清CA199、AFP诊断原发性肝癌的ROC曲线

2.4 血清CA199、AFP单独检测及联合检测对原发性肝癌诊断效能比较 血清CA199与AFP联合检测诊断原发性肝癌的准确度均明显高于血清CA199、AFP单独检测（P＜0.05），灵敏度和特异度与血清CA199、AFP单独检测差异无统计学意义（P＞0.05）。见表3：

表3 血清CA199、AFP单独检测及联合检测对原发性肝癌诊断效能比较

3 讨论

原发性肝癌为发生于肝脏的恶性肿瘤，发病原因多样，主要包括肝炎病毒感染、黄曲霉素感染、酗酒、肝脏代谢疾病等，但确切的发病机制暂无明确结论[3-4]。血清肿瘤标志物水平检测为原发性肝癌重要的诊断项目，其检测结果的准确性有助于指导医生治疗，改善患者预后。

现阶段，临床检测患者血清肿瘤标志物的方法较多，其中使用度较高的为化学发光免疫法。该方法是上世纪80年代兴起的一种免疫测定技术，实现了定性与定量的结合，具有高灵敏度及高特异性，与荧光免疫、酶联免疫等技术比较更加先进[5-6]。化学发光免疫法的检测原理与放射免疫分析、酶联免疫吸附法相似，但也有不同之处：化学发光免疫法是以发光物质为检测标记物，通过足量标记抗体与有限已知抗原及待测物进行非竞争性结合来检测待检物水平。随着检验技术与设备的不断改进，化学发光免疫法在临床中的应用（如激素检测、肿瘤标志物检测等）越来越广泛，被认为是一种高效、稳定且可靠的临床检测技术，得到了众多医学研究的认可。化学发光免疫法的优势主要有以下几点[7-8]：⑴该方法属于超微量分析方法，与其它检测方法比较检测速率可提高约3～8倍，能够明显缩短检测时间，保证检测样本质量，并且能减少人为误差，提高检测结果的准确性；⑵该方法采用同位素标记法，标记未使用致癌物质，有效避免了放射性污染，且标记物与试剂盒的有效时间均较长，有利于维持检测过程中的稳定性；⑶该方法实现了定量分析与定性分析的结合，且操作简便，基本能够实现自动化操作。

本研究采用化学发光免疫法检测了原发性肝癌患者、肝脏良性病变患者血清肿瘤标志物CA199和AFP水平，以期为原发性肝癌的诊断提供依据。AFP主要来自胚胎肝细胞，可促进肿瘤细胞生长增殖、抑制免疫功能和诱导淋巴细胞凋亡，正常情况下血清AFP的水平极低，但当肝脏病变发展至肝癌时，AFP的功能恢复，随着病情恶化AFP的水平迅速升高且变化幅度大，因此，既往临床一直将AFP作为原发性肝癌的特异性标志物[9]。但有相关报道指出[10-11]，部分肝硬化而不具有肝癌迹象的患者血清AFP水平也会升高，且较长时间内均处于高水平；另外，部分肝癌晚期患者AFP的水平持续较低，甚至AFP为阴性，因此AFP并不能完全作为原发性肝癌的确诊指标。CA199是一种粘蛋白型糖类蛋白，以唾液粘蛋白的形式存在于血液中，一般情况下血清中的水平较低，但发生癌性病变时，尤其是胰腺癌和肝胆癌，其血清含量会显著升高[12-13]。本研究结果显示，肝癌组血清CA199和AFP水平及阳性率均明显高于良性病变组，提示血清CA199和AFP对鉴别肝脏疾病具有一定作用。本研究进一步绘制了ROC曲线分析CA199、AFP对原发性肝癌的诊断效能，显示在最佳截断点时血清CA199、AFP诊断原发性肝癌的灵敏度分别为79.63%、85.19%，特异度均为84.00%，说明CA199、AFP对原发性肝癌均有较好的诊断效果。同时，本研究还显示，血清CA199和AFP联合检测诊断原发性肝癌的准确度为93.27%，均明显高于CA199（81.73%）或AFP（84.62%）单独检测，提示联合检测血清CA199和AFP诊断原发性肝癌的效能更佳。

综上所述，与CA199、AFP单独检测比较，采用化学发光免疫法联合检测CA199、AFP诊断原发性肝癌的效能更优。