680例胎儿脐血产前诊断结果分析

周 俊 郭晓辉 周 莉

深圳市人民医院产科，广东深圳 518000

染色体数目和结构异常是导致新生儿出生缺陷常见病因，目前尚无特异性的治疗方法[1]。目前常用的有创性产前诊断方法有羊膜腔穿刺、绒毛穿刺等，但其具有培养时间长，成功率不高等缺点[2-3]。对于孕周较大的孕妇，脐带穿刺已经成为一种安全、有效的常用性产前诊断方法[4]。本研究总结了2017 年5 月～2018 年6 月本院行脐带穿刺术脐血细胞培养以及染色体核型分析的680 例病例，阐述不同指征异常核型异常检出情况，并比较正常新生儿与异常新生儿肝肾功能指标差异，为临床脐血穿刺产前诊断提供参考，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017 年5 月～2018 年6 月本院产科进行产前检查或遗传咨询孕妇680 例，年龄21 ～45岁，平均（28.6±3.5）岁；孕周17 ～39 周，平均（31.74±2.85）周；产前诊断指征为高龄36 例，超声诊断胎儿畸形399 例，唐氏筛查高危88 例，不良孕产史36 例，羊水过多或过少83 例，夫妻双方地贫26 例，其他12 例。680 例具有不同诊断指征的高危孕妇中共娩出新生儿579 例，其中正常新生儿230 例，纳入正常新生儿组；异常新生儿349 例，包括早产109 例，过期新生儿85 例，合并各类新生儿疾病155 例，纳入异常新生儿组。正常新生儿组包括男婴112 例，女婴118 例。异常新生儿组包括男婴175 例，女婴174 例。两组新生儿性别比较，差异无统计学意义（P ＞0.05）。

1.2 方法

标本采集：术前常规行B 超检查，了解胎儿发育情况、胎心、胎盘和羊水等基本情况，脐带定位，选择穿刺点和角度，固定支架，在超声引导下行脐带管穿刺术，取脐血4mL，置于肝素钠抗凝的一次性取血管中送实验室培养；（2）细胞培养与染色体核型分析：将2mL 脐血接种于1640 培养基中37℃恒温培养箱中培养68h，加10μg/mL 的秋水仙素90 ～100μL 继续培养1.5h，常规收获刺片，胰酶消化G 显带，镜下观察每例均经分析计数20 ～ 30 个中期分裂相，配对分析5 个核型，如发现嵌合体则加大计数至50 ～100 个核型。（3）将抗凝处理后的脐血2mL 于高速冷冻离心机常温下进行离心，转速为3000r/min，离心10min，置于-20℃低温保存，通过放射免疫法测定β2-MG 含量，常规血生化法测定尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、门冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TBIL）水平。

1.3 统计学方法

采用SPSS23.0 统计学软件进行数据分析，计数资料以（表示，两组肝肾功能指标比较采用t 检验，核型异常检出率比较采用χ2检验，采用Logistic多因素回归分析脐血功能指标与新生儿预后之间的关系，P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同指征异常核型异常检出情况

680 例脐血染色体核型中，101 例核型异常，异常率为14.85%。高龄产妇36 例，超声诊断胎儿畸形399 例，唐氏筛查高危88 例，不良孕产史36 例，羊水或绒毛染色体异常63 例，夫妻双方地贫36 例，其他22 例，检出率分别为11.11%、16.79%、5.68%、8.33%、31.74%、5.56%、0.00%，羊水或绒毛染色体异常核型异常检出率高于其他指征，各类指征核型异常检出率差异有统计学意义（P ＜0.05）。见表1。

表1 不同指征异常核型异常检出情况

2.2 脐血染色体异常核型的类型及相应指征分布情况

101 例核型异常中，三体综合症共33 例，其中21-三体17 例，18-三体4 例，13-三体12 例，占总核型异常比例分别为16.83%、3.96%、11.88%；性染色体异常10 例，占总核型异常比例为9.90%；嵌合体22 例，占总核型异常比例为21.78%；倒位11 例，占总核型异常比例为10.89%；其他21 例，占总核型异常比例为20.79%。见表2。

2.3 正常新生儿与异常新生儿脐血肝肾功能指标比较

680 例具有不同诊断指征的高危孕妇中共娩出新生儿579 例，异常新生儿组肝肾功能指标β2-MG、BUN、Cr、ALT、AST、TBIL 含量均高于正常新生儿组，差异有统计学意义（P ＜0.05）。见表3。

表2 脐血染色体异常核型的类型及相应指征分布情况

表3 正常新生儿与异常新生儿脐血肝肾功能指标比较（）

表3 正常新生儿与异常新生儿脐血肝肾功能指标比较（）

组别 n β2-MG（μg/mL） BUN（mmol/L） Cr（μmol/L） ALT（U/L） AST（U/L） TBIL（μmol/L）正常新生儿组 230 2.35±0.56 4.12±1.23 53.98±17.85 8.12±3.71 5.12±1.07 30.35±8.47异常新生儿组 349 3.28±1.08 4.39±1.27 70.79±16.83 9.87±4.85 5.98±1.41 37.65±9.12 t 12.034 2.535 11.479 4.648 7.845 9.693 P 0.000 0.012 0.000 0.000 0.000 0.000

表4 脐血肝肾功能指标与新生儿预后Logistic多因素回归分析

2.4 脐血肝肾功能指标与新生儿预后Logistic回归分析

脐血肝肾功能指标β2-MG、BUN、Cr、ALT、AST、TBIL 含量是影响新生儿预后的独立危险因素。见表4。

3 讨论

完善的产前诊断措施，为优生优育提供了有力保障，在孕中晚期，随着胎儿的生长发育以及超声影像技术的应用，越来越多的胎儿畸形被发现，当孕周＞25 周时，羊水细胞逐渐老化，胎脂增多，培养困难，培养周期较长，此时行脐带血核型检查对胎儿评估具有重要作用[5-6]。

脐血的产前诊断应用范围广泛，包括胎儿有无遗传性疾病、宫内感染以及血液系统疾病，因此，脐静脉穿刺和染色体核型分析是孕中晚期重要的产前诊断技术和方法[7]。同时，脐血染色体核型分析亦可作为病因诊断的有效手段，产前脐血进行细胞遗传学及肝肾代谢功能诊断，可为胎儿评估以及胎儿预后情况提供重要参考价值[8]。

本研究中680 例脐血染色体核型中，101 例核型异常，异常率为14.85%，高于李素萍等[9]研究结果。本文中高龄孕产妇染色体异常检出率达到11.11%，随着年龄的增长，孕产妇卵细胞染色体纺锤体老化，导致染色体不分离的频率较高，从而增加了染色体三体发生风险，核型异常检出率较高。本研究中羊水或绒毛染色体异常受检人数为63 例，异常检出率为31.74%，低于林秀华等[10]研究结果，绒毛及羊水细胞随着孕周的增长逐渐老化，产前诊断时间受到限制，同时羊水细胞培养易出现假性嵌合体，造成误诊，脐血诊断不仅为孕中晚期胎儿染色体产前诊断提供了技术支持，还可进一步诊断核实羊水细胞诊断结果，弥补了绒毛和羊水检测的缺陷。本研究中B 超异常受检例数为399 例，占总例数的一半以上，为进行脐血检查的主要指征，胎儿畸形与染色体关系密切，此组共检出67 例异常，检出率为16.79%，占异常核型的66.33%，与汤丽霞等[11]研究结果相近，因此当B 超检测表现出一些非特异性的超声征象时，如脑室轻度扩张、胎儿水肿以及心脏强光点等，应进行产前诊断，以排除染色体异常。唐氏筛查高危组受检例数88 例，占总例数的12.94%，5 例核型异常，检出率为5.68%，由此脐血染色体可用于排查各项高危指征产妇胎儿染色体异常情况，卢丽华等[12]研究结果支持本结论。

染色体数目异常尤其是三体综合症，是严重出生缺陷的主要病因，表现为严重的生长发育障碍、智力低下、多发畸形等[13]。少部分21-三体综合症B 超显示无明显结构畸形，只有通过核型诊断进行确诊[14]。本研究中。本文中染色体数目异常共43例，其中三体综合症33 例，性染色体异常10 例，染色体三体为妊娠中晚期的主要异常核型，染色体数目和结构的异常常涉及到多个基因数量的增减，因此常表现为胎儿器官结构异常，且大部分三体胎儿为多发畸形，仅小部分21 三体表现为微小的器官结构异常。染色体倒位，普遍认为基因无缺失，一般临床表现正常，属于遗传多态，少数认为有基因的位置效应，可增加流产率[15]。本文中染色体倒位共11 例，其中9 号倒位5 例，6 号倒位2 例，3 号倒位3 例，8 号倒位1 例。

本研究中异常新生儿组脐血肝肾功能指标检测β2-MG、BUN、Cr、ALT、AST、TBIL 指标含量均高于正常新生儿组，且通过Logistic 多因素回归分析结果显示各项肝肾功能指标联合检测是影响断新生儿预后的因素，脐动脉血为胎儿体内代谢后的血液，可反映胎儿体内代谢状态，高危因素对胎儿肾小球滤过功能造成不同程度的影响和损害，造成电解质紊乱，肾血流量减少，影响肾小管的吸收，因此产前脐血肝肾功能指标检测，可为胎儿预后状态提供参考价值，提前做好相应预防措施，有利于保障产妇及胎儿生命安全。

综上所述，妊娠中晚期脐血穿刺产前诊断可有效减少先天缺陷儿的出生，落实优生政策，为胎儿预后情况提供参考价值，有利于保障产妇与胎儿生命安全。