胶乳增强透射免疫比浊法与电化学发光免疫分析法检测癌胚抗原结果比对

闫红娟

（平凉市人民医院，甘肃 平凉744000）

癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）是一种由641个氨基酸组成的酸性糖蛋白，分子量为150～300kD，碳水化合物的含量约在45%～60%［1］。CEA类似于AFP，属于在胚胎时期产生的胎儿癌性抗原组［2］。癌胚抗原是一种比较广谱的肿瘤标志物［3］，临床上多用该指标作为大多数癌症的诊断、鉴别诊断、预后判断、放疗、化疗及手术疗效观察的指标［4］。目前CEA的检测方法有很多，主要检测方法有：放免法、酶联免疫法及化学发光分析法［5］。我们就国产胶乳增强透射免疫比浊法和市场上主流检测方法电化学发光免疫分析法两种方法进行比较，现介绍如下。

材料和方法

1 样本来源

收集医院新鲜成年人、非孕血清204例，其中男性99例，女性105例，包括患者及健康体检人群，年龄22～96岁。

2 试剂与仪器

ROCHE公司生产的Cobas e 411电化学发光仪和日本HITACHI公司生产的7180全自动生化分析仪；试剂为与ROCHE电化学发光配套的CEA检测试剂盒和北京九强生产的金斯尔胶乳增强透射免疫比浊法试剂盒。校准均选择试剂配套的校准品，所有试剂均在有效期内。

3 检测方法

3.1 电化学发光免疫分析法 严格按照德国ROCHE公司生产的《癌胚抗原试剂盒》操作手册进行。仪器状态良好，质控在控。

3.2 胶乳免疫增强法 严格按照北京九强公司生产的《癌胚抗原试剂盒》操作手册进行。仪器状态良好，质控在控。

4 采用的参考范围

Roche化学发光法CEA：＜4.70ng／mL；金斯尔胶乳免疫增强法CEA：＜5.00ng／mL。

5 统计学处理

采用SPSS24.0软件进行分析，非正态分布的配对数据，两两比较采用Wlicoxon配对秩和检验，测得CEA浓度用中位数（四分位数范围）［M（P25～P75）］描述。相关分析用Spearman相关分析，并进行相关分析和曲线评估，用显著性水平a＝0.05作为判断性水准，判断是否有差异。采用Microsoft Office 2007软件进行分析，进行线性相关和准确性分析。

结 果

1 CEA水平的差异

经正态性检验，所有指标均不符合正态性分布（P＜0.001），两检测方法测定的血清CEA水平以中位数（四分位数范围）描述其集中趋势和离散趋势；采用Wlicoxon配对秩和检验，204例标本在两种检测方法上差异无统计学意义（P＝0.632）。用Spearman进行相关分析，相关系数为0.982，认为两种方法结果间具有极高度的相关性（P＜0.01）见表1。

表1 胶乳增强透射免疫比浊法与电化学放光法癌胚抗原水平统计描述与相关分析

2 金斯尔胶乳增强透射免疫比浊法与ROCHE化学发光的线性相关分析

图1显示金斯尔CEA和罗氏化学发光法CEA检测结果，线性回归方程为：Y＝0.9944X+0.026，R2＝0.9956。R2大于0.95，说明比对方法的样本检测范围足够宽，能够满足样本比对要求，CEA样本浓度范围内检测两方法间之间的线性关系良好，回归统计的截距和斜率均可靠。

图1 电化学放光法与胶乳增强透射免疫比浊法癌胚抗原线性相关图

3 金斯尔胶乳增强透射免疫比浊法与ROCHE化学发光的准确性分析

通过数据处理（见表2），得出ROCHE化学发光与金斯尔胶乳增强透射免疫比浊法检测CEA的真阳性率为100%、真阴性率为100%、假阳性率为0、假阴性率为0、诊断准确度为100%、Youden指数为1［6］。证明两种方法在阴阳性判断上识别是一致的。阳性样本共32例，男性21例（47～87岁），女性11例（54～80岁），其中确诊癌症的样本为25例，直肠癌11例，直肠癌术后1例，肺癌6例，结肠癌2例，乳腺癌3例，食管癌1例，子宫恶性肿瘤1例，及其他病因7例。

表2 胶乳增强透射免疫比浊法与电化学放光法检测癌胚抗原阴阳性样本例数

讨 论

胶乳免疫比浊法的原理是将抗体标记在纳米级别的胶乳微球表面，血清的癌胚抗原与试剂中的抗体在液相中相遇，结合成抗原-抗体复合物，产生一定的浊度，胶乳微球可以相应的放大该浊度变化。通过与相应的标准曲线做对照，可以由浊度变化计算得出血清中的癌胚抗原的浓度［7］；癌胚抗原作为非特异性的肿瘤标志物，在多种癌症的辅助诊断方面有一定的临床意义。CEA为大分子细胞表面糖蛋白，较为广泛的存在于肿瘤的上皮细胞中，特别是腺癌组织中，在大肠癌中的表达率极高，但不具有特异性，在乳腺癌、肺癌、胃癌均可发现升高的CEA［8］。但CEA的阳性率也不同，胰腺癌为88%～91%，肺癌为76%，结肠癌为73%，肝癌为88%～96%，乳腺癌、卵巢癌为73%。不仅如此，CEA对治疗效果的观察上同样有着不可忽略的作用。对于手术的患者，术后切除彻底的话，通常在6周内降至正常水平。术后如有转移或者复发，出现症状的10个星期前至13个月内，CEA就已经开始升高了。因此CEA的水平也可显示术后是否预后不良［9］。从本文的实验数据可以看出，用九强金斯尔的胶乳增强透射免疫比浊法的试剂与ROCHE电化学发光试剂检测癌胚抗原，共204例标本，在两种检测方法上差异无统计学意义，且相关性良好；在阴阳性区分上达到完全一致。九强金斯尔试剂盒采用高纯度的单克隆抗体，测定结果与进口电化学发光试剂盒有很好的相关性，且具有操作简单、反应快速、成本低廉、无需其他昂贵仪器及无放射性污染等优点，值得在临床上推广使用。但建议各地区基层医院实验室建立本实验室参考范围。