降血脂乳酸菌的筛选及发酵工艺的优化

王丽 陶志强 马雁 陈萱 赵瑞峰 张栋 陆震 印伯星 关成冉

摘  要：目的：筛选具有显著降低血清中的血脂水平功能的乳酸菌。方法：选取实验室中7株乳酸菌，对其降胆固醇和降甘油三酯的能力进行测定，筛选出具有较高降血脂能力的菌株，并进一步研究接菌量、发酵温度、初始pH值、发酵时间等不同发酵工艺条件对乳酸菌降胆固醇和降甘油三酯能力的影响。结果：降胆固醇能力最好的菌株是Y10，降甘油三酯能力最好的菌株是X1。对发酵工艺条件优化，Y10降解胆固醇的最优发酵条件为接菌量4%、温度40℃、pH值6.0、发酵时间30h。X1降解甘油三酯的最优发酵条件为接菌量4%、温度40℃、pH值6.5、发酵时间36h。

关键词：乳酸菌;发酵条件;降胆固醇;降甘油三酯

中图分类号 TS201.3 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2019）11-0023-5

Abstract：Objective：Lactic acid bacteria were to be screened whichhave a significant function of lowering blood lipid levels in serum.Method：This research selected seven lactic acid bacteria preserved in the lab.The ability to reduce cholesterol and lower triglycerides were determined and the strain with strong lipid-lowering capacity were selected.Furthermore，the amount of bacteria，fermentation temperature，initial pH value，fermentation time and other fermentation processes for the ability to reduce cholesterol and cholesterol and lower triglycerides were optimized.Result：The strain with the best cholesterol-lowering ability was Y10，and the strain with the best triglyceride-lowering ability was X1.The cholesterol-degrading ability of Y10 was best under the fermentation conditions of 4% inoculation，40℃，pH 6.0 and 30h.The degradation ability of X1 to triglyceride is best under the fermentation conditions of 4% inoculation，pH 6.5 and 40 °C for 36h.

Key words：Lactic acid bacteria;Fermentation condition;Cholesterol-reducing;Triglyceride-reducing

据统计，全世界每年约有3000万人死于高血脂引起的相关疾病，目前治疗心脑血管疾病主要还是依靠药物治疗1]。然而，药物治疗不仅成本较高，而且造成的副作用影响较大[2]。研究表明[3]，降低血清中的血脂水平，可大幅避免心血管疾病造成的死亡。血脂中的主要成分是甘油三酯和胆固醇，乳酸菌作为人体内最主要的益生菌，已被证实可以显著改善血清中的血脂水平[4-6]，并使肠道系统发生长期有益的变化，且具有较高的安全性[7-8]。与其他降血脂的方法相比，乳酸菌降血脂具有专一性强、降解率高、副作用较小等显著特点。本课题通过体外实验研究乳酸菌的降血脂能力，并对菌株降血脂能力的发酵条件进行优化，为开发降血脂水平的乳酸菌功能性制品提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 实验试剂 盐酸、胆盐3号、胆固醇、氢氧化钠、牛胆盐、吐温-80，國药集团化学试剂有限公司;甘油三酯，北京索莱宝科技有限公司;胆固醇试剂盒、甘油三酯试剂盒，生工生物工程股份有限公司。

1.2 实验菌株 实验使用乳酸菌由江苏省乳品生物技术与安全控制重点实验室分离保藏，分别命名为：F5、X1、Y5、Y10、Grx10、K01-4、S7。

1.3 实验主要仪器和设备 高压蒸汽灭菌锅SX-500，日本TOMYG公司;超净工作台SW-CJ-1F，苏州净化设备有限公司;全自动微生物生长曲线分析仪，Bioscreen公司;高速冷冻离心机Legend mach1.6R，美国Thermo Fisher SCIENTIFIC有限公司;超纯水仪Millipore Direct8，美国Millipore公司;电子天平PL2002，梅特勒公司;恒温培养箱DNP-9272，上海精宏实验设备有限公司。

1.4 培养基 MRS培养基：参考相关文献[9]的方法配置。胆固醇培养基：胆固醇0.10g溶解于20mL的吐温-80中（可加热），称取胆盐3g，加入1000mL的MRS培养基中，调pH至6.0±0.2，121℃灭菌15min，冷却备用。甘油三酯培养基：甘油三酯0.20g溶解于20mL的吐温-80中（可加热），加入1000mL的MRS培养基中，调pH至（6.0±0.2），121℃灭菌15min，冷却备用。

1.5 实验方法

1.5.1 乳酸菌的活化 将实验室所分离保藏的7株乳酸菌按3%接种量接种到MRS液体培养基中，培养18h～36h，置于4℃冷藏备用。