高速离心消除脂血对肝功能项目检测干扰的分析

解春宝，罗江蓉，向娜娜，传良敏△

(1.四川省医学科学院·四川省人民医院检验科，四川成都 610072；2.四川省医学科学院·四川省人民医院运营部，四川成都，610072；3.川北医学院，四川南充 637000)

目前用超速离心法将脂蛋白分为乳糜微粒(CM)、极低密度脂蛋白(VLDL)、低密度脂蛋白(LDL)、中间密度脂蛋白(IDL)、高密度脂蛋白(HDL)。CM主要在小肠黏膜中合成，颗粒最大，三酰甘油水平约为90%～95%，VLDL颗粒直径次之，三酰甘油水平约为50%～65%，随着血清中CM及VLDL水平升高，血清逐渐浑浊甚至呈奶油样外观。生化肝功能项目是评价肝脏功能的重要指标，提示临床及指导临床用药。但在实际检验工作中，易发现脂血标本，尤其是高CM标本，其中含大量三酰甘油，检测时大量的CM对生化结果产生影响。据文献报道高速离心能消除脂血对生化检测项目的干扰[1]。现采用高速离心法处理样本后对比离心前后数据，分析高速离心是否能消除脂血对生化肝功能项目[总蛋白(TP)、清蛋白(ALB)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰基转肽酶(GGT)、总胆汁酸(TBA)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)]检测的影响。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1样本 收集50例临床脂血标本，标本管为红色真空采血管(不含抗凝剂)，血清标本外观为奶白色。

1.1.2检测项目 TP、ALB、AST、ALT、ALP、GGT、TBA、TBIL、DBIL共9项指标。

1.1.3仪器与试剂 仪器：HITACHI LABOSPECT 008全自动生化分析仪；中科中佳HC-2514高速离心机。试剂：TP：四川迈克(批号：507244)；ALB：四川迈克(批号：507236)；AST：四川迈克(批号：508271)；ALT：四川迈克(批号：510347)；ALP：四川迈克(批号：150817)；GGT(批号：160111)；TBA：四川迈克(批号：151124)；TBIL：四川迈克(批号：510332)；DBIL：四川迈克(批号：508268)。

1.1.4质控品和校准品 质控品购自美国伯乐，校准品购自四川迈克。

1.2方法

1.2.1质量控制 检测标本前检测液体质控血清，当质控结果在控后开始样本分析。

1.2.2样本检测 将50例样本经3 000 r/min离心5 min，在生化分析仪上检测以下项目：TP、ALB、AST、ALT、ALP、GGT、TBA、TBIL、DBIL。再将标本经18 000 r/min离心10 min处理，此时上层为悬浮脂质，下层为清亮血清，弃去上层用吸管取下层清亮血清在生化分析仪上检测。

2 结 果

高速离心组与常规离心组结果比较：ALP、GGT、TBIL 3项在高速离心后水平均升高，差异有统计学意义(P<0.01)。TP、ALB、AST、ALT、TBA、DBIL六项指标在高速离心前后水平无明显变化，差异无统计学意义(P>0.01)，见表1。

表1 高速离心前后生化结果比较

3 讨 论

全自动生化分析仪目前多采用双试剂、双波长技术，结合凹面光栅进行后分光，分光后的波长由8～16个固定检测器同时接收，对其中两个波长的信息用两具前置放大器放大并进行对数放大，求出其吸光度。当标本中三酰甘油水平过高，外观表现为奶白色，其中大量的CM对入射光产生散射，对结果产生影响[2-3]，甚至出现负值。据文献报道为消除脂血对检测结果的影响临床可采用的方法有以下几种：生理盐水稀释法、乙醚抽提法、沉淀分离法、干化学法和高速离心法[1,4]。较常用的有高速离心法、生理盐水稀释法和乙醚抽提法[5-7]。这3种方法各自有其优缺点：乙醚抽提法效率高，但其本身对某些生化项目有不确定影响，影响生化结果的准确性，而且乙醚为有机化学溶剂，对于长期在实验室工作的人员健康不利；生理盐水稀释法简单快捷，但随着稀释次数增加，检测误差也随之增加；高速离心法可行性强，方法简单易行，易于标准化。有研究报道高速离心方法本身对大部分生化项目无影响，但对一部分项目如肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、α-羟基丁酸脱氢酶(HBDH)、肌酐(CRE)、尿酸(UA)、TP有差异，呈直线相关关系[8]。另外有研究发现高速离心法对血脂正常、外观清亮的临床标本及轻中度脂血标本无明显意义，而对重度脂血标本某些生化项目有意义[9]。本实验针对TP、ALB、AST、ALT、ALP、GGT、TBA、TBIL、DBIL等9项生化项目采用高速离心法进行，分析高速离心是否能消除脂血对生化肝功能项目检测的影响。

本研究结果发现经高速离心与常规离心检测结果比较TBIL、GGT、ALP 3项水平差异有统计学意义(P<0.01)，而TP、ALB、AST、ALT、TBA、DBIL 6项水平差异无统计学意义(P>0.01)，同时提示高速离心降低脂血标本中CM干扰后，对部分生化肝功能检测结果有意义。谢艳艳等[10]研究发现高速离心与常规离心比较大部分生化项目测定结果差异不明显，部分生化结果CK-MB、DBIL、HBDH、LDH、CREA、UA、GLU有差异，呈直线相关。本文研究结果与文献[11-13]报道不完全一致，可能原因如下：(1)标本量及标本所含三酰甘油不一样，本实验选取50例脂血标本(外观奶白色)，标本量及脂血水平不一致可能是导致实验结果不一致的原因；(2)实验所用仪器、试剂及条件不一致；(3)脂血标本高速离心心后处理程序并没有标准化，本实验离心后采用吸管吸取下层清亮血清，与其他研究人员方法有一定的差异。

4 结 论

本研究提示高速离心可以消除脂血对部分肝功能检测项目的影响，但是很有必要建立标准操作程序。