滕 坤,张一鹏,雷家宝,张海丰
人参是一种名贵的药材,历来被视为百草之王,味甘略苦,具有强身壮体的作用[1].多年来,各国研究学者对人参进行了广泛的药理研究、临床监察和流行病的调查,证实了人参具有提高学习记忆,刺激垂体-肾上腺皮质系统,降低血糖并能调节体内的能量代谢等作用[2-3].除此之外,人参具有提高机体适应性,促进机体免疫功能,抑制血小板凝集,抗溶血、抗血栓及增强机体造血功能等多项现代药理作用[4].然而,在应用过程中发现,人参也有一定的不良反应,比如在服用人参的过程中可能会有血压升高、供血不足、鼻衄、精神异常兴奋、烦躁不安、失眠多梦等不良反应发生[5].所以人参通常炮制加工后使用,以减少其不良反应,增强其某方面药理作用.保鲜参是应用现代食品保鲜技术,加工而成的人参炮制品种之一,具有鲜参的优良品质,同时较鲜人参储存的时间长[6].本文通过相关实验来探讨保鲜参对小鼠耐缺氧、抗疲劳作用的影响,为今后的医药学研究奠定一定的基础.
昆明种小鼠,雌雄各半,体重(20±2)g,由辽宁长生生物技术有限公司提供,SPF级,许可证号:SCXK(辽)2015-0001.
人参(吉林省通化市长白山人参市场),钠石灰(上海钠石灰批发市场),亚硝酸钠(上海翔悦实业有限公司).
广口瓶,ZB-200疲劳转棒仪(成都泰盟软件有限公司),不锈钢式水桶,负重物(铅丝,按小鼠体重使用).
将外形完好、无破损的鲜人参人工刷洗干净,刷洗好后稍加晾晒,而后进行熏硫,目的是将人参漂白护色、杀灭细菌,然后将人参放入90~100℃水中漂烫4~6s,使人参细胞失活和脱硫,将漂烫好的人参立刻放入冷水中冷却,冷却到35℃以下后捞出晾干水分,放入预先配置好的保鲜液中浸泡,备用[7].
取出并沥干人参表面的保鲜液,低温烘干,粉碎后过100目筛[8-9],加蒸馏水将其配制成浓度为0.08g·mL-1和0.20g·mL-1的混悬液.
随机选取小鼠30只,再随机分成三组,即空白对照组、低剂量组、高剂量组,每组10只,按0.2mL 10g-1体重灌胃给水和对应药物,连续灌胃给药15天,第16天,末次给药1小时,然后进行分类实验.结果见表1.
表1 保鲜参对小鼠常压耐缺氧能力的影响
(1)亚硝酸钠中毒存活实验.亚硝酸钠中毒后会麻痹呼吸中枢及周围血管,导致胸部紧迫感及呼吸困难[10],所以对事先灌胃过保鲜参混悬液的小鼠进行亚硝酸钠中毒实验,记录小鼠中毒存活时间可考察保鲜参对小鼠的耐缺氧作用.
分组处理同上.对小鼠进行腹腔注射亚硝酸钠,剂量为180~220mg·kg-1,注射量为0.1mL·10g-1,立即计时,记录小鼠中毒后存活时间[11].与空白组比较,保鲜参低、高剂量组均能明显延长小鼠亚硝酸钠中毒后的存活时间,结果见表2.
表2 保鲜参对小鼠亚硝酸钠中毒存活时间的影响
(2)疲劳转棒仪实验.分组处理同上.将每组小鼠分别放在转棒仪上,待小鼠肌肉处于静力紧张状态[12],开始进行疲劳转棒试验,转速设定为30rpm.每组小鼠进行实验前对其进行适当的训练,小鼠在转棒仪上跌落3次后,开始记录小鼠由于肌肉疲劳从转棒仪上跌落下的时间,平行3次.观察每组小鼠跌落下的时间,结果显示,与空白组相比,保鲜参低、高剂量组均能明显延长小鼠在转棒仪上停留的时间,结果见表3.
表3 保鲜参对小鼠转棒耐力时间的影响
(3)小鼠负重游泳实验.分组处理同上.每只小鼠的尾部系以负重物,重量按小鼠体重的10%计算[13].将小鼠放入深度25cm、温度30℃左右水温的浴槽中游泳[14],记录每只小鼠自入水后到沉入水底不再挣扎的时间.结果显示,与空白组比较,保鲜参低、高剂量组均能明显延长小鼠的负重游泳时间,结果见表4.
表4 保鲜参对小鼠负重游泳时间的影响
人参在美国、日本、韩国等国家作为食品应用.韩国是人参加工炮制、生产的主要国家.各国对人参及人参复方制剂的临床应用较为广泛,如高血压、糖尿病、肿瘤、肾脏疾病、中枢神经系统疾病等.日本常用的含有人参的方剂有人参汤、四君子汤、补中益气汤等.在美国,人参在药草专卖店或绿色食品连锁店整根销售或者以提取液、粉末的形式用于健康补助食品,或一般食品、饮料类、化妆品的添加物.但是,目前吉林省尚未开展地道药材产地鲜加工、炮制及其产品的研究开发一体化研究、开发和管理.
通过常压耐缺氧实验、亚硝酸钠中毒存活实验结果表明:保鲜参的高、低剂量组均能明显延长小鼠在缺氧环境中的存活时间,表明其具有良好的耐缺氧作用,实验结果具有显著性差异.缺氧是指因组织的氧气供应不足或用氧障碍,而导致组织的代谢、功能和形态结构发生异常变化的病理过程.尤其是影响机体的氧化功能,心、脑等主要器官缺氧而供能不足也是导致死亡的重要原因.在缺氧环境下,生物体内自由基代谢会发生一系列的变化,表现为抗氧化能力下降和脂质过氧化反应增强,严重危害生物体的健康.通过小鼠疲劳转棒仪实验、小鼠负重游泳实验可知,保鲜参的高、低剂量组均能明显延长小鼠疲劳转棒时间和负重游泳时间,表明其具有良好的抗疲劳作用,实验结果具有显著性差异.疲劳是生物体脑力或体力活动到一定的阶段时必然出现的一种生理现象,早在1976年美国疾病控制中心就对慢性疲劳综合症下了定义,据2000—2012年的调查结果显示,我国10万人中就有1.2万人患有至少长达6个月的慢性疲劳综合症,因此研究如何延缓或消除疲劳、如何延长机体耐缺氧时间具有十分重要的意义.