扶正解毒颗粒对鸡禽流感疫苗免疫效果影响的研究

◆作者：高志敏刘小艳袁照红梁祺琦黄显会郭世宁

◆单位：1.广东省农产品质量安全中心 2.广东温氏大华农生物科技有限公司3.华南农业大学兽医学院

禽流感是由正黏病毒科流感病毒属的A型流感病毒引起，发生于各种家禽和野鸟的一种急性传染病。禽流感病毒具有人畜共患的流行病学特性，因此，防疫显得尤为重要。疫苗的免疫是有效控制禽流感的有效手段，目前主要使用基因重组灭活疫苗对家禽进行禽流感防疫。由于禽流感基因重组苗的抗原漂移，使禽流感疫苗仅能提供70%的保护力。然而，许多中药具有抗病毒和增强免疫的作用，且应用安全，与疫苗联合使用可增加疫苗免疫效果。扶正解毒颗粒是由黄芪、淫羊藿、板蓝根等中药组成，目前国内外对于扶正解毒颗粒的研究不多，本研究是以广东温氏大华农动物生物技术有限公司动物保健品厂生产的扶正解毒颗粒为研究材料，比较了不同剂量的扶正解毒颗粒对鸡禽流感疫苗免疫效果的影响。

1 材料与方法

1.1 试验材料

扶正解毒颗粒，规格：100g(相当于原生药 100g)，包装：100g/瓶，批号：20130801，广东温氏大华农动生物科技有限公司动物保健品厂提供。

对照药物：临床试验选用黄芪多糖粉，规格：每1g黄芪多糖应不得少于 450mg，批号：1501231，爱迪森（北京）生物科技有限公司生产。

重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型，Re-6株），规格：500 羽份 /瓶，批号：0501047，广东温氏大华农生物科技有限公司提供。

1日龄AA白羽肉仔鸡

血凝抗原，批号：2014007，哈尔滨兽医研究所

1.2 试验方法

试验在华南农业大学兽医学院药理研究室进行，选用1日龄AA白羽肉仔鸡300只，平均体重50g。按照体重随机分为5组，每组60只。第一组为空白对照组（不免疫不给药）；第二组为空白免疫对照组（免疫不给药）；第三组黄芪多糖粉对照药物（按推荐剂量添加饮水中给药）处理组；第四组为扶正解毒颗粒低剂量（每升饮水添加0.5g）处理组；第五组为扶正解毒颗粒推荐剂量（每升饮水添加1.5g）处理组。

鸡只6日龄开始给药，连续给药5d。试验组和对照组均进行常规饲养管理，统一使用肉鸡全价饲料。全部鸡群在8日龄首免，23日龄进行第二次免疫，30日龄进行第三次免疫，见表2。于免疫前一天和首次免疫后14、21、28和40d，对实验组和对照组分别翅下静脉采血1mL，每组每次随机抽取采10只，4℃保存，供AI抗体检测使用。

试验期为7周。第1周鸡舍温度为 32～35℃，第 2周为30～32℃，以后每周下降2℃；4周后自然条件下饲养。

在 15、22、29 和 36 日龄每组随机抽取8只鸡处死，称量免疫器官的重量。计算免疫指数。

1.3 检测项目及方法

1.3.1 免疫器官指数的测定

在饲养试验的各阶段称重后，每组挑选8只接近平均体重的试验鸡宰杀，分别摘取胸腺、脾脏和法氏囊并称鲜重。

1.3.2 禽流感抗体效价

检查各种对照。阴性血清血凝抑制滴度应≤1∶4(22)，阳性血清血凝抑制滴度与已知滴度不应相差一个滴度以上。红细胞对照无血凝现象。

禽流感病毒的血清血凝抑制效价≥1∶16(24)判为阳性。

2 结果与分析

2.1 扶正解毒颗粒对健康肉鸡免疫器官生长发育的影响

2.1.1 扶正解毒颗粒对健康肉鸡胸腺指数的影响

由表1统计结果可以看出，15、22日龄时，与空白对照组及免疫不给药组相比，黄芪多糖组和扶正解毒颗粒低剂量组具有差异显著（P＜0.05），推荐剂量组差异极显著（P＜0.01）；黄芪多糖组和扶正解毒颗粒低剂量组与扶正解毒颗粒推荐剂量组具有差异显著（P＜0.05）。29日龄时，与空白对照组及免疫不给药组相比，黄芪多糖组和扶正解毒颗粒推荐剂量组具有差异显著（P＜0.05），扶正解毒颗粒低剂量组无差异显著（P＞0.05）；黄芪多糖组与扶正解毒颗粒推荐剂量组亦无差异显著（P＞0.05）。36日龄时，与空白对照组及免疫不给药组相比，黄芪多糖组、扶正解毒颗粒低剂量组和推荐剂量组具有差异显著（P＜0.05)，给药组之间无差异显著（P＞0.05）。

2.1.2 扶正解毒颗粒对健康肉鸡脾脏指数的影响

由表1统计结果可以看出，15日龄时，与空白对照组及免疫不给药组相比，黄芪多糖组和扶正解毒颗粒低剂量组无差异显著（P＞0.05），扶正解毒颗粒高剂量组具有差异显著（P＜0.05）。22日龄时，与空白对照组及免疫不给药组相比，黄芪多糖组、扶正解毒颗粒低剂量及推荐剂量组均有差异显著（P＜0.05），给药组之间无差异显著（P＞0.05）。29日龄时，与空白对照组及免疫不给药组相比，黄芪多糖组和扶正解毒颗粒低剂量组无差异显著（P＞0.05），扶正解毒颗粒推荐剂量组有差异显著（P＜0.05）；黄芪多糖组和扶正解毒颗粒低剂量组与扶正解毒颗粒推荐剂量组具有差异显著（P＜0.05），黄芪多糖组和扶正解毒低剂量组无差异显著（P＞0.05）。36日龄时，与空白对照组及免疫不给药组相比，黄芪多糖组无差异显著（P＞0.05），扶正解毒颗粒低剂量组和扶正解毒颗粒推荐剂量组具有差异显著（P＜0.05）；黄芪多糖组与扶正解毒颗粒低剂量组和推荐剂量组具有差异显著（P＜0.05），扶正解毒颗粒低剂量组和推荐剂量组相比无显著差异（P＞0.05）。

表1 扶正解毒颗粒对健康肉鸡免疫器官生长发育的影响

2.1.3 扶正解毒颗粒对健康肉鸡法氏囊指数的影响

由表1统计结果可以看出，15日龄时，与空白对照组及免疫不给药组相比，黄芪多糖组和扶正解毒颗粒低剂量组无差异显著（P＞0.05），扶正解毒颗粒推荐剂量组具有差异显著（P＜0.05）；黄芪多糖组与扶正解毒颗粒低剂量组之间无差异显著（P＞0.05）。22日龄时，与空白对照组及免疫不给药组相比，黄芪多糖组无差异显著（P＞0.05），扶正解毒颗粒低剂量及推荐剂量组具有差异显著（P＜0.05）；扶正解毒颗粒低剂量组与推荐剂量组之间无差异显著（P＞0.05）。29日龄时，与空白对照组及免疫不给药组相比，黄芪多糖组和扶正解毒颗粒低剂量组无差异显著（P＞0.05），扶正解毒颗粒推荐剂量组具有差异显著（P＜0.05）；黄芪多糖组和扶正解毒颗粒低剂量组之间无差异显著（P＞0.05）。36日龄时，与空白对照组及免疫不给药组相比，黄芪多糖组和扶正解毒颗粒低剂量组无差异显著（P＞0.05），扶正解毒颗粒推荐剂量组具有差异显著（P＜0.05）；黄芪多糖组与扶正解毒颗粒低剂量组之间无差异显著（P＞0.05）。

表2 禽流感抗体水平（log2）

2.2 扶正解毒颗粒对鸡禽流感抗体效价的影响

表2统计结果可以看出，免疫前，各试验组之间的抗体水平无差异显著（P＞0.05）。试验开始后，空白对照组抗体水平持续下降，其他组免疫后持续升高。三免之后抗体效价达到最高值。在整个试验过程中，免疫不给药组与空白对照组相比，抗体水平无差异显著（P＞0.05）。扶正解毒颗粒与空白对照组相比不同时间抗体水平均存在差异显著（P＜0.05）。黄芪多糖对照组自免疫后21d起，于空白对照组存在差异显著（P＜0.05），表明，扶正解毒颗粒较黄芪多糖粉起效更快。

免疫后14天，与免疫不给药组相比较，扶正解毒颗粒低剂量组的抗体水平存在差异显著（P＜0.05），扶正解毒颗粒推荐剂量组差异极显著（P＜0.01）。免疫后21天，与免疫不给药组相比，黄芪多糖组与扶正解毒颗粒低剂量组抗体水平存在差异显著（P＜0.05），扶正解毒颗粒推荐剂量组差异极显著（P＜0.01）。免疫后28天，与免疫不给药组相比，黄芪多糖组与扶正解毒颗粒低剂量组差异显著（P＜0.05），扶正解毒颗粒推荐剂量组差异极显著（P＜0.01）。免疫后 40天，与免疫不给药组相比，黄芪多糖组抗体水平差异显著（P＜0.05），扶正解毒颗粒低剂量组和推荐剂量组差异极显著（P＜0.01）。

3 结果与讨论

试验表明，扶正解毒颗粒可促进免疫器官的良好生长发育，直接增强了机体的细胞免疫功能和体液免疫功能。扶正解毒颗粒是一种良好的免疫调节剂，在免疫的同时，服用扶正解毒颗粒，能够提高机体的免疫应答，增加抗体效价，从而提高鸡群的整体抵抗力。但由于中草药具有双向调节作用，用量太小达不到效果、而用量过大可能起到抑制作用。通过本次试验，按临床推荐剂量使用扶正解毒颗粒：混饮，每1L水，0.5～1.5g，每日2次，连用3-5天，可用于禽流感疫苗免疫增强剂，提高机体的抗体水平。因此，扶正解毒颗粒在禽流感免疫预防中可以作为免疫增强剂，通过改善鸡体状况、增强免疫器官的机能来实现。在养鸡生产中合理应用，既可以提高免疫效果，提高疫苗的保护率，延长免疫期，又具有毒副作用小、无残留等优点，符合绿色环保的要求，对人类健康不会产生不良影响，符合市场的需求，有着广阔的应用前景。

参考文献：（略）