■张鑫蕊 闫俊书 宦海琳 林 勇 张 干 叶成智 周岩民 周维仁*
(1.南京农业大学动物科技学院,江苏南京 210095;2.江苏省农业科学院畜牧研究所,江苏南京 210014)
母体的营养水平会影响到子代生长发育[1],对于家禽来说,母体影响是直接的(资源供应)或间接的(遗传)[2]。种鸡的营养水平对子代非常重要,它可以调节种蛋中的营养含量,进而影响子代血液和组织中生长调节因子的含量,最终影响子代对营养物质的吸收[3]。一些母代效应可以增强后代的适应性[4]。子代胚胎期养分的积累受母代饲粮营养水平的直接影响,对子代孵化后的生长性能、肉品质等性状有一定的影响[5]。在母代饲粮中添加饲料添加剂已成为促进子代健康、提高生长性能、免疫功能、促进营养物质吸收等不可缺少的成分[6]。
核苷酸(Nucleotide,NT)是一种重要的低分子化合物[7]。饲料中添加核苷酸具有促生长、提高免疫应答、免疫效果等作用[8]。肌苷酸是一种重要的核酸代谢中间产物[9]。黄鑫等[10]研究表明肉鸡饲粮中添加酵母核酸能促进幼龄肉鸡肠道组织生长发育,进而改善肉鸡的生长性能。本团队前期研究发现,母代肉鸡饲粮添加肌苷酸增强了1~21日龄子代肉鸡体内的脂质代谢,提高了子代肉鸡生长与血清免疫相关激素水平和免疫因子含量[11]。然而,关于母代肉鸡饲粮外源添加肌苷酸是否影响子代肉鸡生长后期的生长及血清免疫指标,尚不明确,母代肉鸡饲粮肌苷酸添加量为多少时,对生长后期肉鸡有最佳效果,尚未定论。因此,本研究旨在研究母鸡饲粮中添加不同剂量肌苷酸对生长后期子代肉鸡的生长性能、血清免疫功能的影响,并对肌苷酸添加剂量进行探究,为更深层次的研究母源营养对子代的远期影响提供理论依据。
试验选取遗传背景相同、体重相近的20周龄健康AA肉鸡480只,随机分为4组:Ⅰ组(基础日粮)、Ⅱ组(基础日粮+0.2%肌苷酸)、Ⅲ组(基础日粮+0.5%肌苷酸)和Ⅳ组(基础日粮+1%肌苷酸),每组6个重复,每个重复20只,当母鸡产蛋率达到5%时进行试验处理,母鸡产蛋率达到50%时人工受精,母鸡产蛋率达到高峰时收集种蛋,收集7 d孵化。孵化后依据母代分组情况,将各组孵化所得1 920只1日龄仔鸡再分成4组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组和Ⅳ组),每组6个重复,每个重复80只,子代鸡饲喂基础日粮,试验期42 d,试验分组设计见表1。
本试验所用5’-肌苷酸二钠(IMP)购自希杰生物科技有限公司,纯度不低于97%。试验用种鸡、肉鸡饲料由江苏大地动物保健品有限公司生产,试验日粮配方及营养水平见表2。
表1 试验分组设计
表2 试验日粮配方及营养水平(风干基础)
1.3.1 生长性能指标的测定
于试验42 d早8:00以重复为单位空腹称重,结算耗料量,计算各重复肉仔鸡的平均日增重、料重比。
平均日增重(g)=[阶段末重-始重]/试验天数
平均日采食量(g)=阶段总采食量/试验天数
料重比=平均日采食量/平均日增重
1.3.2 血液生化指标测定
于子代42日龄时,每个重复中随机抽取2羽健康鸡,颈静脉采血,分离血清。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清中免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、白细胞介素2(IL-2),试剂盒购自美国Bethyl公司。
试验数据采用SPSS(Ver22.0)软件包中的GLM过程对试验数据进行方差分析,利用Duncan's法进行多重比较,利用Means过程计算平均数及标准误。结果以“平均值±标准误”的方式表示,显著水平为P<0.05。
表3 肉种鸡饲粮添加肌苷酸对子代肉鸡生长性能的影响
由表3可知,在子代肉鸡生长后期(22~42日龄),与Ⅰ组相比,Ⅲ组平均日增重有升高的趋势(P>0.05),并且Ⅲ组平均日采食量显著高于Ⅱ组(P<0.05),其他各组无显著差异(P>0.05)。
表4 肉种鸡饲粮添加肌苷酸对子代肉鸡血清免疫指标的影响(g/l)
由表4可知,在42日龄时,与Ⅰ组相比,Ⅲ组、Ⅳ组血清中IL-2的含量显著升高(P<0.05),Ⅱ组有升高的趋势,但不显著(P>0.05);而血清中IgA、IgG和IgM的含量无显著差异(P>0.05)。
作为一种潜在的核苷酸类饲料添加剂,肌苷酸在提高动物生长性能和免疫功能方面发挥着重要作用[12],Superchi等[13]研究发现断奶前饲粮补充核苷酸可提高仔猪的生长性能。肌苷酸作为一种单核苷酸[14],能够参与机体的代谢[15]。有研究表明,断奶仔猪早期采用高核苷酸饲料可提高生长性能、饲料摄取量和饲料利用率[16]。周慧琦等[17]报道,饲粮中添加较多5’IMP的核苷酸添加剂,可能有助于仔猪生长性能的提高。在鸭上也有研究表明,含有核苷酸的复合添加剂可提高鸭的生长性能[18]。Safari等[19]也报道,日粮核苷酸对小龙虾的生长性能有积极影响。以上研究均表明,饲粮中添加外源核苷酸对动物的生长性能等方面发挥重要的作用。在肉种鸡饲粮中添加外源肌苷酸的研究少有报道,本试验研究发现,母鸡饲粮中添加0.2%、0.5%和1.0%肌苷酸对22~42日龄子代肉鸡的生长性能无显著影响,这与本研究团队前期研究结果一致。这可能是由于母代饲粮添加外源肌苷酸未能引发母体效应,也可能是由于母代饲粮添加外源肌苷酸对胚胎期的子代肌纤维影响不显著,因而对子代肉鸡的生长性能影响不显著,其具体作用机理还有待进一步研究。
外源性核苷酸与机体免疫功能密切相关,其可通过中枢神经系统抑制皮质醇产生、促进可能提高免疫能力的细胞因子生成[20]。补充核苷酸能有效地修复淋巴细胞中DNA的氧化损伤[21]。细胞膜和血液中的免疫相关分子可能反映调节免疫功能。也是免疫应答和预防感染的重要因子,可促进细胞裂解,激活补体促进吞噬作用[22]。免疫球蛋白G(IgG)是体液免疫的重要抗体[23],具有免疫调节作用[24]。Campbell等[25]研究发现,新生仔猪对IgG的吸收可提高免疫能力,但本试验结果显示,母鸡饲粮中添加1.0%肌苷酸对子代肉鸡血清IgG含量有提高趋势,但对IgA、IgM含量无显著影响。
白细胞介素(IL)作为一种十分重要的细胞因子家族,在免疫细胞的成熟、活化及免疫调节等一系列过程中均起到重要作用[26]。IL-2是一种多效细胞因子,能够调节T细胞代谢[27],维持具有免疫调节功能的CD4+Foxp3+调节性T细胞分化、存活[28]。有研究表明超低剂量IL-2促进调节性T细胞和自然杀伤细胞的免疫调节功能[29]。本试验结果显示,母代饲粮中添加0.2%肌苷酸对子代肉鸡IL-2有提高趋势,添加0.5%和1.0%肌苷酸对子代肉鸡血清IL-2含量提高显著。表明母代饲粮添加肌苷酸对子代肉鸡机体免疫系统具有促进作用,母体饲粮添加IMP能够使子代肉鸡在整个生长期均能提高血清中相关免疫指标。
①母鸡饲粮添加肌苷酸对22~42日龄子代肉鸡的生长性能无显著影响。
②添加0.5%和1.0%肌苷酸对子代肉鸡血清IL-2含量提高显著,从而改善了子代肉鸡的免疫功能。