妊娠期糖尿病患者血清IL-17、IL-1β、IL-10水平变化及其与胰岛素抵抗、血脂的关系

李庆，徐金玲，方红娟，王静

(1淄博市第一医院，山东淄博 255200；2首都医科大学附属北京天坛医院；3青岛大学医学部基础医学院)

妊娠期糖尿病是指妊娠过程中首次产生或发现糖尿病，是妊娠期间最常见的并发症，据报道其发病率为1%～14%，近年发病率呈上升趋势[1]。妊娠期糖尿病孕妇并发妊娠期高血压比例为25%～32%，比正常妊娠孕妇高2～4倍，是引起自然流产、胎儿畸形、羊水过多、巨大儿及胎儿呼吸窘迫等围产期不良结局的重要因素[2]。炎症反应在生理性胰岛素抵抗(IR)向妊娠期糖尿病发展的过程中发挥重要作用，Th17细胞有促炎症作用，Treg细胞的免疫抑制效应可对抗炎症反应。2017年5月，我们检测了妊娠期糖尿病患者血清Th17/Treg细胞因子IL-17、IL-1β、IL-10及血糖、血脂等指标变化，并分析IL-17、IL-1β、IL-10与IR、血脂水平间的关系。

1 资料与方法

1.1 临床资料 筛选2017年5月～2018年5月于淄博市第一医院产检孕妇96例，纳入标准：①符合妊娠期糖尿病诊断标准；②年龄25～35岁；③妊娠24～32周；④取得研究对象知情，且签署知情同意书。排除标准：①伴高血压、冠心病等代谢性疾病者；②合并肝、肾、心、肺等脏腑功能严重障碍者；③既往有流产史者。根据葡萄糖耐量检测结果分为妊娠期糖尿病组52例和妊娠非糖尿病组44例。妊娠期糖尿病诊断标准：根据2011年美国糖尿病学会制定标准：空腹血糖(FPG)≥5.1 mmol /L，餐后1 h 血糖(1 h PG)≥10.0 mmol/L， 2 h PG≥8.5 mmol/L。确诊条件：具备上述3项中任何1项即可确诊。妊娠期糖尿病组51例，年龄25～31岁；孕周25～30周；孕前BMI为(28.03±4.09)kg/m2。妊娠非糖尿病组46例，年龄26～32岁；孕周24～30周；孕前BMI为(28.09±4.14)kg/m2。两组上述基线临床资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。本研究获得淄博市第一医院医学伦理委员会审查同意。

1.2 检测方法 ①血清IL-17、IL-1β、IL-10水平。晨起空腹下经肘静脉采集两组外周血约3 mL，室温静置1～2 h，3 000 r/min离心5 min，取血清，-70 ℃保存；采用双抗体夹心ELISA法检测血清IL-17、IL-1β、IL-10。所有操作严格按试剂盒说明进行。②血糖和胰岛素功能指标。采集空腹及服葡萄糖后1、2 h 的肘静脉血各2 mL，应用贝克曼·库尔特全自动生化分析仪己糖激酶法测定葡萄糖(FPG、餐后1 h PG、2 h PG)水平，罗氏电化学发光法测定空腹胰岛素，计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)，HOMA-IR=空腹血糖×空腹胰岛素/22.5。③血脂水平。采集两组空腹静脉血，采用贝克曼·库尔特全自动生化分析仪测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)及高密度脂蛋白(HDL)，试剂均原厂配套。

2 结果

2.1 两组血清中IL-17、IL-1β、IL-10水平比较 妊娠期糖尿病组血清IL-17、IL-1β水平高于妊娠非糖尿病组(P均<0.01)，而IL-10低于妊娠非糖尿病组(P<0.01)。见表1。

表1 两组血清IL-17、IL-1β、IL-10水平比较

注：与妊娠非糖尿病组比较，aP<0.01。

2.2 两组血糖、血脂及胰岛素功能比较 妊娠期糖尿病组FPG、1 h PG、2 h PG、HOMA-IR、TCH、TG水平均高于妊娠非糖尿病组(P均<0.01)。见表2。

表2 两组血糖、血脂及胰岛素功能比较

注：与妊娠非糖尿病组比较，aP<0.01。

2.3 妊娠期糖尿病组IL-17、IL-1β、IL-10与血糖、血脂及胰岛素功能的相关性分析 Pearson相关性分析显示，IL-17与FPG、1 h PG、2 h PG、TG、HOMA-IR呈正相关(r分别为0.612、0.625、0.716、0.644、0.693，P均<0.01)，与TC无关(r=0.110,P>0.05);IL-1β与FPG、1 h PG、2 h PG、TG、HOMA-IR呈正相关(r分别为0.609、0.529、0.701、0.662、0.612，P均<0.01)，与TC无关(r=0.103,P>0.05);IL-10与FPG、1 h PG、2 h PG、HOMA-IR呈负相关(r分别为-0.554、-0.639、-0.641、-0.540,P均<0.01)，与TC、TG均无相关(r分别为-0.091、-0.087，P均>0.05)。

2.4 HOMA-IR与IL-17、IL-1β、IL-10的关系 多元线性回归分析结果显示，IL-17、IL-1β水平与HOMA-IR呈独立正相关(r分别为0.334、0.315，P均<0.01)，IL-10与HOMA-IR呈独立负相关(r=-0.301，P<0.01)。

2.5 TG与IL-17、IL-1β、IL-10的关系 多元线性回归分析结果显示，IL-17、IL-1β水平与TG呈独立正相关(r分别为0.311、0.306，P均<0.01)，IL-10与TG无关(r=-0.062，P>0.05)。

3 讨论

妊娠期糖尿病患者体内存在慢性系统性炎症反应，炎性反应亦是妊娠期糖尿病的病理生理基础[4]。妊娠期糖尿病的慢性炎症反应由细胞因子介导所致，细胞免疫在该病发展过程中呈过度激活效应，即患者合并有促炎与抑炎平衡失调[5]。Th17是一种新发现的、能分泌细胞因子的T细胞亚群，通过分泌细胞因子介导机体的炎性反应过程，Treg 细胞是一种抑制性T细胞功能亚群，可抑制炎症发展。妊娠期糖尿病患者体内Th17细胞相关因子(IL-17、IL-1β)高表达及Treg细胞因子(IL-10)低表达，Th17/Treg及其相关细胞因子可能以炎症与抗炎症失衡的方式参与妊娠期糖尿病的炎症发病机制。本研究结果显示，妊娠期糖尿病患者血清IL-17、IL-1β水平高于妊娠非糖尿病组，而IL-10低于妊娠非糖尿病组。表明妊娠期糖尿病患者炎症平衡失调。

IL-17主要经外周血中活化Th17细胞释放，可特异性结合受体，促进T细胞活化，刺激上皮细胞、内皮细胞及成纤维细胞分泌多种细胞因子，促进炎症发展。研究显示，Th17细胞分泌的IL-17与胰岛细胞炎症性破坏联系密切，参与糖尿病发生[6]。IL-17可诱导胰腺腺泡旁肌成纤维细胞分泌化学趋化因子、炎性细胞因子，参与胰腺炎症反应，损伤胰岛β细胞。进一步研究发现，IL-17所致炎症反应通过损伤血管内皮，影响脂质代谢，促进脂质沉积，提高血脂水平[7]。IL-1β亦是Th17细胞因子的一种，是促炎细胞因子，可调节Th17细胞早期分化及协同其他炎性因子调节Th17细胞因子产生，促进炎性反应[8]。Bi等[9]报道，IL-1β通过介导胰岛β细胞凋亡或激活NF-κB通路，促进炎性细胞因子释放，进而诱发产生胰岛素抵抗，参与2型糖尿病的发生发展，是妊娠期糖尿病发生发展的重要促进因子。IL-1β+3953位点T等位基因与高脂血症易感性密切相关，IL-1β通过调节脂质代谢的改变，导致高脂血症。妊娠期糖尿病患者血清IL-17、IL-1β水平与C-反应蛋白呈正相关。本研究结果显示，妊娠期糖尿病组FPG、1 h PG、2 h PG、HOMA-IR、TC、TG水平高于妊娠非糖尿病组，差异有统计学意义，IL-17、IL-1β与FPG、1 h PG、2 h PG、TG、HOMA-IR呈正相关，IL-17、IL-1β为妊娠期糖尿病孕妇HOMA-IR和TG的独立影响因素。提示Th17细胞因子IL-17、IL-1β可能是妊娠期糖尿病的致病因素，亦可能是胰岛素抵抗的重要调节细胞因子。

IL-10是Treg细胞发挥抗炎因子的主要细胞因子之一，可抑制NF-κB 表达及其他细胞因子、趋化因子等炎症介质产生，进而抑制炎症反应[10]。既往研究报道了妊娠期糖尿病患者血清IL-10水平显著降低，且IL-10水平与C-反应蛋白、HOMA-IR呈负相关，参与了妊娠期糖尿病的发生发展[11]。研究证实，炎症细胞因子IL-10-592C/A的基因多态性与血脂水平密切关系，是脂质代谢异常的遗传学基础。本研究结果显示，IL-10与FPG、1 h PG、2 h PG、TG、HOMA-IR呈负相关；IL-10与TC无关；多元回归分析显示，IL-10为妊娠期糖尿病孕妇HOMA-IR的独立影响因素。Treg细胞因子IL-10可能参与妊娠期糖尿病的发病过程。

综上所述，妊娠期糖尿病患者血清Th17细胞因子IL-17、IL-1β水平升高，Treg细胞因子IL-10水平降低，三者与IR相关，IL-17、IL-1β与血脂有关。临床孕期保健常规检查中，可将妊娠期糖尿病发病细胞因子水平的炎症指标与常规检查指标联系，为临床及早发现或预测妊娠期糖尿病提供依据。