血清S100β蛋白水平与脑小血管病患者非痴呆型血管性认知障碍的相关性研究

高鸣，陈娇，赵倩倩，蒲爽，李雪梅

脑小血管病（cerebral small vessel disease，CSVD）是导致老年人认知功能下降和非痴呆型血管性认知障碍（vascular cognitive impairment with no dementia，VCIND）的主要原因之一[1]。VCIND是血管性认知障碍的早期阶段，是防治痴呆的关键时期。在早期阶段，大多数VCIND患者无明显临床症状，因此寻找对疾病预测有意义的因素十分重要。S100β蛋白是一种钙离子结合蛋白，主要由星型胶质细胞和少突胶质细胞产生，是一种小分子蛋白质，正常情况下在外周血中含量很低，但当血脑屏障被破坏时，它可以从损伤的细胞释放出来，通过血脑屏障，从外周血中可以检出[2-4]。目前关于S100β蛋白与VCIND之间的研究尚少，本研究着重于血清S100β蛋白水平与CSVD患者轻度认知障碍的相关性。

1 研究对象与方法

1.1 研究对象 连续收集2017年6月-2018年2月于潍坊医学院附属医院神经内科就诊的CSVD患者，符合以下标准：①依据中国CSVD诊治共识，患者表现为认知功能障碍、感觉及运动异常、步态异常等症状，头颅磁共振成像（magnetic resonance imaging，MRI）表现为腔隙性脑梗死、腔隙、脑白质病变、血管周围间隙扩大及脑微出血等[5-7]；②既往无卒中病史[8]；③年龄45～85岁。

根据蒙特利尔认知评估量表（Montreal cognitive assessment，MoCA）评分结果，CSVD患者被分为VCIND组（MoCA＜26分）和无认知障碍（no cognitive impairment，NCI）组（MoCA≥26分）[9]。收集同时期于潍坊医学院附属医院就诊的无CSVD的体检者为对照组，对照组与CSVD组年龄、性别及受教育年限相匹配，头颅MRI未见异常，且认知功能正常。

排除标准：①神经变性认知障碍（如阿尔茨海默病、路易体痴呆、帕金森病痴呆等）；②脑肿瘤、脑损伤、多发性硬化或其他中枢神经系统疾病的患者；③系统性疾病导致的认知功能障碍（如甲状腺功能低下、维生素缺乏等）；④中毒性认知障碍（如酒精中毒、药物慢性中毒等）；⑤伴有明显的视听觉、言语障碍；⑥抑郁、精神疾病。

本研究由潍坊医学院附属医院伦理委员会批准，所有患者均签署知情同意书。

1.2 临床资料收集 记录受试者的病史资料，包括人口统计学信息（年龄、性别、教育年限），既往史（高血压[10]、糖尿病[11]、高脂血症[12]、冠状动脉粥样硬化性心脏病[13]），吸烟、饮酒史。吸烟史：发病以前有吸烟史（＞10支/天），其中1年以上者可将吸烟作为卒中复发的危险因素。饮酒史：饮酒量的评估标准采用每周喝酒的杯数（drinks/week），一般将12.5 g酒精界定为1 drink。期间男性每周饮酒≥14 drinks，而女性≥7 drinks，即认为有饮酒史。

血清S100β蛋白及其他生化指标检测：采集受试者空腹肘静脉血（禁食时间＞8 h），将静脉血5 ml置于聚氯乙烯管中凝固，3000 r/min离心10 min，取上清液置于人血清S100β蛋白酶联免疫吸附测定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）试剂盒（江苏科特生物科技有限公司），检测其水平。测定总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白（lowdensity lipoprotein，LDL）、高密度脂蛋白（high-density lipoprotein，HDL）、同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）和空腹血糖等水平。

神经心理学测试：神经心理学评估采用MoCA量表。受试者15 min内完成单个量表，总分30分，教育年限≤12年加1分，总分＜26分被认为有认知障碍[14]。

1.3 统计学方法 采用SPSS 20.0软件进行统计学分析。计量资料符合正态分布的，用（表示，组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD-t检验，不符合正态分布的，用中位数和四分位数表示，组间分析采用Kruskal-Wallis检验。计数资料用率表示，组间比较采用卡方检验。采用Pearson相关分析对VCIND组患者血清S100β蛋白水平与MoCA进行相关性分析。将VCIND组和NCI组单因素分析中P＜0.2的因素纳入Logistic回归分析，进行多因素检验。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般资料 研究共入组CSVD患者60例，其中VCIND组30例，年龄54～79岁，平均（65.17±6.58）岁，男性9例（30.0%）；NCI组30例，年龄46～82岁，平均（64.30±7.80）岁，男性11例（36.7%）。对照组30例，年龄48～72岁，平均（62.60±6.15）岁，男性15例（50.0%）。

2.2 单因素分析结果 VCIND组、NCI组和对照组在性别、年龄、教育年限、高血压病史、糖尿病史、冠状动脉粥样硬化性心脏病史、高脂血症病史、吸烟史、饮酒史、空腹血糖、总胆固醇、甘油三酯、HDL、LDL方面的差异无统计学意义（表1）。

3组之间血清S100β水平差异有统计学意义（P＜0.001），进一步两两比较显示，VCIND组的血清S100β水平高于NCI组和正常对照组，NCI组的S100β水平高于对照组（均P＜0.001）。3组之间血清Hcy水平差异也有统计学意义（P＜0.001），进一步两两比较显示，VCIND组的血清Hcy水平高于NCI组（P=0.001）和正常对照组（P＜0.001），NCI组的Hcy水平高于对照组（P＜0.001）。

2.3 多因素分析结果 Logistic回归分析显示S100β[比值比（odds ratio，OR）2.056，95%可信区间（confidence interval，CI）1.643～2.573，P＝0.003]，Hcy（OR1.831，95%CI1.333～2.514，P＝0.001）是脑小血管病患者VCIND的独立危险因素。TG（P＝0.916）、HDL（P＝0.153）、冠状动脉粥样硬化性心脏病（P＝0.774）、高血压（P＝0.868）等因素不是脑小血管病患者VCIND的独立危险因素。

Pearson相关分析显示VCIND组血清S100β水平与MoCA总分呈负相关（r＝-0.618，P＜0.001）。

表1 VCIND组、NCI组和对照组的临床特征比较

3 讨论

CSVD包含一系列的病理过程，包括脑小动脉、小静脉、毛细血管结构和功能的改变，从而损害了大脑中与执行功能相关的额叶-皮质下环路和长联系纤维，最终导致患者认知功能出现障碍[14-16]。CSVD引起的认知障碍是以精神运动速度减慢、执行功能下降为主的全面认知功能下降[17]。因为血管性认知功能障碍可以通过早期干预阻止其进展甚至逆转病程，因此寻找轻度血管性认知功能障碍的标志物或危险因素，以早期识别并治疗是目前血管性认知功能障碍的研究热点。本研究通过对识别轻度认知障碍敏感性较高的MoCA量表将CSVD患者分为VCIND和认知功能正常组，通过VCIND与无脑小血管病和无认知障碍人群的比较，来探索轻度血管性认知障碍可能的生化标志物及临床危险因素[18]。

S100β蛋白属于一种酸性蛋白，可以与钙连接，影响信号转导通路，在中枢神经系统中大量存在，可有效维持机体神经细胞内外钙稳态，促进机体中枢神经系统胶质细胞生长与分化[19]。本研究结果显示，CSVD患者（包括VCIND组和认知功能正常组）血清S100β水平高于对照组，且VCIND组血清S100β水平高于无认知障碍组。多因素分析显示血清S100β是CSVD患者非痴呆型血管性认知功能障碍的独立危险因素。目前，S100β蛋白已被证明与多种疾病导致的认知障碍有关，如帕金森病、创伤性脑损伤、慢性脑灌注不足，但与CSVD患者认知功能障碍的关系研究尚少[20]。2016年Fei Wang等[21]对S100β蛋白与VCIND之间的相关性进行了研究，共纳入了172例CSVD患者和105例对照，结果表明VCIND组血清S100β水平高于NCI组和对照组，与本研究结果相似。除此之外，Fei Wang等的研究显示高血压和高LDL水平也是VCIND的独立危险因素，但是本研究中NCI组、VCIND组与对照组在高血压、糖尿病、血脂等临床特征之间的差异无统计学意义。结果不同可能与下述因素有关：疾病的病程、严重程度及诊治等方面会对研究结果造成一定的影响。另外，Qiang Gao等[22]对CSVD与S100β水平之间的相关性进行了研究，显示CSVD组S100β水平显著高于对照组，与本研究结果相似。

目前，Hcy已被作为动脉硬化性疾病的独立危险因素[23]。近年来流行病学研究表明，高Hcy与认知障碍性疾病的产生、进展和预后有一定的关系[24]。本研究也证实了Hcy是CSVD患者VCIND的独立危险因素。

本研究是横断面研究，不能解释血清S100β水平与脑小血管病患者非痴呆型血管性认知功能障碍的因果关系。其次神经心理学评估量表的评分、血清S100β水平的检测可能受到个人操作的影响，可能造成一定的偏差。最后，本研究样本量较少，存在一定局限性，还需进一步扩大样本量进行深入研究。