黄茶对草鱼幼鱼几种代谢酶活性的影响

王孝宇，杨严鸥

(安徽农业大学动物科技学院，安徽 合肥 230036)

宛晓春

(安徽农业大学茶与食品科技学院，农业部茶叶生物技术重点开放实验室，安徽 合肥 230036)

岳鼎鼎

(安徽农业大学动物科技学院，安徽 合肥 230036)

陈路

(农业农村部华南水产与畜禽饲料重点实验室，广东恒兴饲料实业股份有限公司，广东 湛江 524094)

钟娟

(安徽农业大学动物科技学院，安徽 合肥 230036)

我国茶叶种类繁多，按发酵程度与发酵时间，可分为绿茶、红茶、黄茶以及其他各类茶叶。近年来，人们将茶叶下脚料应用到水产养殖中，但主要是关于绿茶的利用研究[1～4]，也有研究探讨了红茶对草鱼肝脏几项关键调控酶的影响，显示红茶对草鱼转氨酶及脂肪代谢酶活性有抑制作用[5]。不同茶叶成分差异较大，绿茶是非发酵茶，茶叶中的重要成分是茶多酚，常占其干重的30%左右，而红茶是完全发酵茶，重要成分是茶多酚氧化后形成的茶色素[6～8]，黄茶是轻发酵茶，加工工艺近似绿茶，但在干燥过程的前或后有“闷黄”工艺，促使多酚等物质氧化。本研究选择我国重要的养殖品种草鱼(Ctenopharyngodonidellus)为试验对象，探讨黄茶对草鱼代谢酶活性的影响，以为在生产中更好地利用茶叶资源提供依据，为开发茶叶在鱼类健康养殖中的应用提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验鱼取自安徽合肥巢湖三珍养殖场，进入实验室后用2%食盐水消毒，放入循环水水族箱内暂养2周，暂养设施与试验设施相同，暂养期间投喂基础饲料。

基础饲料自行配制，具体配方参见文献[9]。试验饲料为在基础饲料中加入黄茶(霍山黄芽)，具体制作时选取黄茶加工后产生的下脚料磨成粉，过60目筛，再将茶粉按不同添加量与各种粉状饲料原料混匀，以饲料机制成粒径1.5mm 颗粒饲料，65℃烘干后于-20℃保存备用。

1.2 试验方法

试验饲料共7种，其黄茶含量分别为0%(对照组)、0.075%、0.15%、0.30%、0.60%、1.20%和2.40%，每种饲料设3个重复。试验开始前，将鱼饥饿24h后随机取样称重，每箱每尾鱼初始平均体重为(5.45±0.52)g，每箱放25尾。养殖试验持续56d，每天9:00和15:00各投适量饲料1次，1 h后回收残饵，70°C烘干，用以矫正摄食量。

循环水养鱼系统为21只塑料水族箱 (规格60cm×60cm×65cm，有效水体180L)，试验水温为(28±2)℃ ，日光灯照明时间为07:00～19:00，其他水质条件参见文献[9]。

试验结束后取肝胰脏测定蛋白质与脂肪的酶活指标。取肝胰脏前先将养殖试验结束的鱼饥饿24h，再每箱随机取7尾，冰盘解剖取部分肝胰脏，等量混合后置于液氮罐保存。测定采用上海将来生物试剂公司试剂盒，方法参见试剂盒说明书。

1.3 数据分析

描述性统计值用平均值±标准差表示。用单因素方差分析(ANOVA)后进行组间差异的多重比较(Duncan’s procedure)。显著性水平设置为α = 0.05，统计软件为SPSS 16.0。

2 结果与分析

2.1 黄茶对草鱼肝脏转氨酶等酶活性的影响

试验期间无死鱼现象，各组间生长无显著差异。由表1可知，黄茶添加组的γ-谷氨酰转肽酶、谷丙转氨酶、乳酸脱氢酶的活性变化基本呈递减趋势，黄茶添加量越高则酶活性越低，除乳酸脱氢酶的0.075%与0.15%组外，其余都显著低于对照组(P<0.05)；谷草转氨酶活性在0.15%～0.60%试验组与对照组无显著差异，其余各试验组均显著低于对照组，碱性磷酸酶除0.60%组显著高于对照组外(P<0.05)，其余各试验组基本与对照组无显著差异(P>0.05)。

表1 黄茶对草鱼肝脏转氨酶及脱氢酶等酶活性的影响

注：同行数据不同上标字母表示有组间显著差异(P<0.05)，表2同。

2.2 黄茶对草鱼肝脏脂肪代谢酶等酶活性的影响

由表2可知，随着饲料中黄茶添加量增加，脂肪酸合成酶、脂蛋白脂酶、肝脂酶活性以及总脂酶活性均比对照组显著下降 (P<0.05)，其中脂肪酸合成酶、脂蛋白脂酶与总脂酶活性在各添加组之间基本无显著差异。

表2 黄茶对草鱼脂肪代谢酶等酶活性的影响

3 讨论

γ-谷氨酰转肽酶可将谷胱甘肽上的γ-谷氨酰基转移到另一个肽或另一个氨基酸，主要作用是参与谷胱甘肽的代谢[10]。本研究中黄茶导致肝脏中γ-谷氨酰转肽酶活性显著降低，这可能意味着肝脏中谷胱甘肽的含量会有所增加，而谷胱甘肽是体内重要的抗氧化剂和自由基清除剂[11]，因此，肝脏中的γ-谷氨酰转移酶活性显著降低可能是对肝脏的一种保护。Burrells等也指出，当饲料植物蛋白含量提高时，虹鳟的肝脏受到损伤，γ-谷氨酰转肽酶的活性上升[12]。

谷丙转氨酶与谷草转氨酶是广泛存在于动物组织细胞线粒体内的重要氨基转移酶，在机体蛋白质代谢中起着重要的作用，其活性高低可以在一定程度上反映机体氨基的转移活力[13,14]。由于谷丙转氨酶能将其他氨基酸转化成丙酮酸[15]，本研究中黄茶能显著降低谷丙转氨酶活性，即可抑制丙酮酸的合成，同时一定剂量的黄茶对谷草转氨酶活性也有降低作用。

脂蛋白脂酶是甘油三酯降解的限速酶，参加各种脂蛋白的代谢[16]，肝脂酶主要参与高密度脂蛋白的代谢[17,18]。本研究中，黄茶导致脂蛋白脂酶、肝脂酶的总脂酶(脂蛋白脂酶与肝脂酶的合称)活性显著下降，与红茶作用趋势与作用程度相似[5]。