九节菖蒲水提液对小鼠胃肠运动的作用

黄春佳 梁华益 韦家河 农生斌 韩光顺 焦 雯 黄彦峰 (右江民族医学院，广西 百色 533000)

九节菖蒲(Rhizoma Anemones Altaicae)为毛莨科植物阿尔泰银莲花(AnemonealtaicaFisch.ex C.A.Mey)根茎，又名小菖蒲、节菖蒲、外菖蒲、鸡爪莲、穿骨七、九节离、京玄参、菊形双瓶梅等，有效成分为β-谷甾醇、琥珀酸、5-羟基乙酰丙酸、白头翁、阿魏酸、绿原酸、苯丙氨酸等〔1～3〕，有芳香开窍、化痰、醒脾安神、驱风解毒、健胃作用，主治胸胀腹闷、癫痫、神经官能症〔4～6〕、恶心呕吐、消化不良、脘腹痞满〔7〕等。在《药材资料汇编》也有记载，九节菖蒲“避秽，开窍，宣气，逐痰，治神经衰弱，消化不良”〔8〕，可见九节菖蒲能影响胃肠运动，但未见其对小鼠胃排空、肠推进影响的相关实验报道。本文观察九节菖蒲水提液对小鼠在体胃肠运动的影响。

1 材料与方法

1.1 实验材料 九节菖蒲(广西百色市售);硫酸阿托品注射液(天津金耀药业有限公司售，批号:1502051);甲硫酸新斯的明注射液(上海信谊金朱药业有限公司售，批号:1630302);西沙必利(浙江京新药业股份有限公司售，批号:B1501041);活性炭(西陇化工股份有限公司售，批号:150114);羧甲基纤维素钠(成都市科龙化工试剂厂售，批号:20120727)。昆明小鼠150只，体重20～30 g，雌雄各半，由右江民族医院实验动物中心提供，合格证号:SCXK(桂)2012-0003。ARII40/C电子天平(奥豪斯，上海公司生产)。

1.2 九节菖蒲水提液制备〔9〕取500 g九节菖蒲，常温浸泡于10倍量蒸馏水中18 h，大火煮沸后慢火煎煮1 h，过滤留液，取滤渣加入10倍量蒸馏水大火煮沸后慢火煎煮1 h，过滤，合并两次滤液，用16层纱布过滤，蒸发浓缩至100 ml，即浓度为5 g/ml，冰箱冷藏，用时恢复至室温。

1.3 炭末悬液制备方法〔9〕取10 g活性炭末、2 g羧甲基纤维素钠溶于200 ml双蒸水中，搅拌均匀制成炭末悬液，冰箱冷藏，用时恢复至室温。

1.4 九节菖蒲水提液对无负荷小鼠胃肠运动的影响〔9～11〕取小鼠50只(雌雄各半)，按体重随机分为正常对照组、西沙比利组(0.003 g/kg)、九节菖蒲水提液低、中、高剂量(1.25、2.50、5.00 g/kg)组，每组 10只，连续灌胃给药7 d，每天一次，每组均按每公斤体重剂量灌胃给药，正常对照组灌胃等体积蒸馏水。末次给药前，小鼠禁食不禁水 12 h，灌胃 30 min后，按0.25 ml/10 g给予炭末灌胃给药，20 min后采用颈椎脱臼法处死小鼠，迅速结扎胃贲门及幽门，取出胃，滤纸吸干称胃全重，沿胃大弯剪开胃体，蒸馏水洗净内容物，滤纸吸干称胃净重。胃残留率(%)=(胃全重－胃净重)/炭末悬液质量×100%，以胃残留率为指标，比较小鼠胃排空速度，残留率越低，说明胃排空能力越强，反之越弱。同时取出小肠，测量幽门至回盲部距离为小肠全长，幽门至炭末前端距离为炭末推进长度。炭末推进率(%)=炭末推进长度/小肠全长×100%。以炭末推进率为指标，比较小肠推进速度，推进率越高，说明推进能力越强，反之越弱。

1.5 九节菖蒲水提液对新斯的明负荷小鼠胃肠亢进模型的影响〔9～11〕取小鼠50只(雌雄各半)，按体重随机分为正常对照组、单纯新斯的明组、新斯的明+九节菖蒲水提液低、中、高剂量(1.25、2.50、5.00 g/kg)组，每组10只。各组给药时间、剂量、方法同1.4，单纯新斯的明组灌胃等体积蒸馏水。末次灌胃前，小鼠禁食不禁水12 h，灌胃时各组同时腿部肌肉注射新斯的明0.05 mg/kg，正常对照组注射等体积蒸馏水，30 min后，操作及计算方法同1.4。

1.6 九节菖蒲水提液对阿托品负荷小鼠胃肠抑制模型的影响〔9～11〕小鼠50只(雌雄各半)，按体重随机分正常对照组、单纯阿托品组、阿托品+九节菖蒲水提液低、中、高剂量(1.25、2.50、5.00 g/kg)组，每组 10只。各组给药时间、剂量、方法同1.4，单纯阿托品组灌胃等体积蒸馏水。末次灌胃前，小鼠禁食不禁水12 h，灌胃时各组同时腿部肌肉注射阿托品0.5 mg/kg，正常对照组注射等体积蒸馏水，30 min后，操作及计算方法同1.4。

1.7 统计学处理 使用统计软件SPSS17.0进行单因数方差分析。

2 结果

2.1 九节菖蒲水提液对无负荷小鼠胃肠运动的影响

与正常对照组比较，西沙比利组及九节菖蒲中、高剂量组小肠推进率均升高(P=0.005，P=0.010，P＜0.001)，提示西沙比利组造模成功，中、高剂量组有促进正常小鼠小肠推进作用;九节菖蒲各剂量组胃残留率均显著升高(P=0.003，P=0.002，P＜0.001)，说明九节菖蒲水提液有抑制无负荷小鼠胃排空作用且随剂量增加作用愈显著。与西沙比利组比较，九节菖蒲高剂量组小肠推进率显著升高，九节菖蒲各剂量组胃残留率均显著升高(P＜0.01，P＜0.01，P＜0.01)，说明其作用效果优于西沙比利。见表1。

2.2 九节菖蒲水提液对新斯的明负荷小鼠胃肠亢进的影响 与正常对照组比较，单纯新斯的明组小肠推进率显著提高(P=0.014)，胃残留率显著降低(P=0.035)，提示胃肠亢进模型造模成功，九节菖蒲各剂量组小肠推进率均显著提高(均P＜0.001)，提示九节菖蒲有促进新斯的明加快小肠推进作用，九节菖蒲中、高剂量组胃残留率均升高(均P＜0.01)，提示九节菖蒲中、高剂量有抑制新斯的明、减慢胃排空作用。

与单纯新斯的明组比较，九节菖蒲高剂量组小肠推进率升高(P=0.010)，提示其效果优于单纯新斯的明，有协同新斯的明促进小肠蠕动作用，九节菖蒲各剂量组胃残留率均不同程度升高(P=0.022，P＜0.001，P＜0.001)，提示九节菖蒲有拮抗新斯的明、抑制胃运动作用。见表1。

2.3 九节菖蒲水提液对阿托品负荷小鼠胃肠抑制的影响 与正常对照组比较，单纯阿托品组小肠推进率显著降低(P=0.027)，胃残留率显著升高(P=0.002)，提示胃肠抑制模型造模成功，九节菖蒲各剂量组小肠推进率均显著升高(P=0.030，P=0.007，P＜0.001)，提示九节菖蒲有抑制阿托品，加快小肠推进作用，九节菖蒲中、高剂量组胃残留率均显著升高(均P＜0.001)，提示中、高剂量九节菖蒲有抑制胃排空作用。与单纯阿托品组比较，九节菖蒲各剂量组小肠推进率均明显升高(均P＜0.001)，提示九节菖蒲有拮抗阿托品，促进小肠推进作用，九节菖蒲低剂量组胃残留率显著降低(P=0.018)，高剂量组显著升高(P＜0.001)，提示低剂量九节菖蒲对抑制胃排空的作用不如阿托品，而高剂量优于阿托品。见表1。

表1 各组无负荷小鼠、新斯的明负荷小鼠、阿托品负荷小鼠胃肠运动(，n=10，%)

表1 各组无负荷小鼠、新斯的明负荷小鼠、阿托品负荷小鼠胃肠运动(，n=10，%)

与正常对照组比较:1)P＜0.01，2)P＜0.05;与西沙比利组比较:3)P＜0.01;与单纯新斯的明组比较:4)P＜0.01，5)P＜0.05;与单纯阿托品组比较:6)P＜0.01，7)P＜0.05

组别 无负荷小鼠 新斯的明负荷小鼠 阿托品负荷小鼠小肠推进率 胃残留率 小肠推进率 胃残留率 小肠推进率 胃残留率九节菖蒲 低剂量组 69.89±10.39 10.45±4.021)3) 79.02±7.031) 6.40±2.815) 71.30±6.642)6) 7.10±3.267)中剂量组 73.47±6.382) 10.66±2.361)3) 81.03±6.471) 12.90±4.781)4)74.17±22.401)6) 13.23±2.881)高剂量组 94.11±8.851)3) 16.02±3.431)4) 86.16±9.021)6) 22.82±3.431)4) 83.53±12.991)6) 23.18±6.411)6)正常对照组 60.12±6.67 6.14±1.54 60.12±6.67 6.14±1.54 60.12±6.67 6.14±1.54西沙比利组 71.48±9.121) 3.09±0.802) － － － －单纯新斯的明组 － － 72.79±10.372) 3.12±0.992) － －单纯阿托品组 － － － － 48.72±18.62) 10.49±2.021)

3 讨论

胃肠运动在食物消化吸收中起着重要作用，胃具有收纳食物，对之进行酸化、研磨形成食糜，节奏性地排送入肠的功能。食糜入肠后，通过神经-体液调节，在完整机体内，胃肠运动的调节由交感神经系统、副交感神经系统、肠神经系统及多种体液因素共同调控〔12〕。交感神经神经末梢释放去甲肾上腺素，激活肾上腺素能受体，抑制胃肠运动。副交感神经末梢释放乙酰胆碱，激活胃肠道平滑肌细胞膜上M受体，促进胃肠运动。壁内神经丛局部反射，独立支配胃肠运动，当食物刺激胃壁引起壁内神经丛局部反射，使胃运动增强，促进排空〔13〕。体液调节主要为胃肠激素(促胃液素、胃动素等)调节。食物对胃的刺激扩张和食物中某些化学成分可引起胃肠激素释放，影响胃肠运动〔13〕。本实验结果提示，九节菖蒲水提液对正常小鼠小肠运动有促进作用，而对正常小鼠胃运动有抑制作用，与黄雪梅〔7〕研究结果不同，分析主要有以下原因:①九节菖蒲产地不同，提取的成分可能有所不同。②九节菖蒲的剂量不同，大剂量和小剂量可能产生不同的作用。③本实验研究的是九节菖蒲对正常和病理状态下小鼠胃肠运动的影响。

胃肠道平滑肌上主要存在肾上腺素α和β受体、胆碱能M受体、组胺受体及多种胃肠激素受体〔9〕。新斯的明为易逆性抗乙酰胆碱酯酶药，兴奋M受体，促进胃肠道平滑肌收缩，促进胃肠活动〔14〕。本实验结果显示预先给予九节菖蒲水提液高、中、低三种剂量灌胃，均可以拮抗新斯的明对胃运动的作用，高剂量可协同新斯的明对小肠运动的作用。阿托品为胆碱受体阻断药，竞争性拮抗M胆碱受体，抑制胃肠道平滑肌痉挛，降低蠕动的幅度和频率〔14〕。本实验提示，预先给予高剂量九节菖蒲水提液灌胃可以协同阿托品对胃运动的作用，低剂量可拮抗阿托品对胃运动的作用，预先给予九节菖蒲水提液高、中、低三种剂量灌胃，均可以拮抗阿托品对小肠运动的作用。综上，九节菖蒲水提液对胃肠道的作用与其平滑肌细胞膜上的M胆碱能受体有关，九节菖蒲作用机制还有待进一步研究。