IGF⁃1、IGF⁃2、IGFBP⁃3表达与子宫内膜癌患者临床病理特征参数的相关性分析

代聪伟 李娜 杨艳艳 王蓓 闫萍

河北省人民医院妇科（石家庄 050051）

IGFs家族包括IGF⁃1和IGF⁃2两类生长因子及其相应受体，IGF⁃1基因结构上与胰岛素原具有高度的同源性［1-2］，当IGF⁃1及其受体的分泌和表达发生异常时就有可能导致子宫内膜的异常增生，诱发子宫内膜癌的发生［3-4］。有研究表明IGF⁃2具有肿瘤抑制效应，而肿瘤组织中IGF⁃2的非功能性突变也潜在的抑制了主体的免疫功能［5］。胰岛素样生长因子结合蛋白（insulin⁃1ike growth factor binding Protein，IGFBP）也属于 IGFs家族，其中IGFBP⁃3在血液中的浓度很多，与胃癌、肝癌等恶性肿瘤有密切的关系［6-7］，但是与子宫内膜癌的关系还无相关报道。本试验采用免疫组织化学技术检测IGF⁃1、IGF⁃2、IGFBP⁃3在子宫内膜癌组织与癌旁组织中的表达，探讨其与子宫内膜癌患者临床病理特征参数的相关性。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源 采用回顾性、总结研究方法，2015年9月至2017年12月选择在我院进行手术诊治的子宫内膜癌患者120例的癌组织标本与癌旁组织标本作为研究对象，纳入标准：术前未接受放疗、化疗及激素治疗；有完整的临床病理资料；病理检查诊断为子宫内膜癌；癌旁组织与离癌组织距离≥3 cm；手术方式为子宫内膜癌分期手术（广泛子宫切除术、双附件切除及盆腔淋巴结清扫术）；医院伦理委员会批准了此次研究。排除标准：妇科内分泌疾病及生殖道炎症；妊娠与哺乳期妇女标本。

在120例患者的组织标本中，年龄最小45岁，最大78岁，平均（65.33±4.21）岁，年龄≥ 60岁60例；分化程度：高分化80例，中分化20例，低分化20例；临床分期：Ⅰ期60例，Ⅱ期40例，Ⅲ期20例；病理类型：子宫内膜腺癌70例，浆液性乳头状腺癌30例，透明细胞癌20例；淋巴结转移30例；肌层浸润50例；形态：局灶型50例，弥漫型70例。

1.2 免疫组化方法 所有患者的癌组织标本与癌旁组织标本取材后，甲醛固定、石蜡包埋，制成石蜡切片（4 μm厚）。兔抗人IGF⁃1、IGF⁃2、IGFBP⁃3多克隆抗体来自北京中杉金桥生物技术有限公司，DAB酶底物显色剂来自广州深达生物制品技术有限公司，超敏链霉菌抗生物素蛋白⁃过氧化酶染色法（S⁃P免疫组化法）广谱免疫组化试剂盒来自广州深达生物制品技术有限公司。将切片组织37℃烤24 h，3%H2O2封闭内源性过氧化物酶10 min，抗原修复后加入一抗，湿盒内4℃过夜，二抗37℃孵育30 min。DAB显色，脱水封片后在光学显微镜观察。取已知阳性组织切片作为阳性对照，以PBS代替一抗作为阴性对照。

1.3 观察指标 IGF⁃1蛋白表达阳性为胞浆内出现棕黄色细颗粒，IGF⁃2蛋白表达阳性为胞浆或胞核内出现棕黄色颗粒，IGFBP⁃3蛋白表达阳性染色为黄色或者棕黄色颗粒位于细胞质中。染色强度阴性为0分、染色强为3分、染色清晰为2分、染色弱但强于阴性对照为1分。阳性细胞数＜10%为0分，＞60%为3分，31%～60%为2分，10%～30%为1分。上述二种评分相加0～1分为（-），2分为（+），3～4分为（++），5～6分为（+++）。镜下顺序放大200倍，每张切片随机选取10个视野，（++）例数+（+++）例数/组内例数× 100.0%=阳性率，都由病理科医院进行判定。

1.4 统计学方法 采用SPSS 22.00统计软件包整理录入资料，计数数据采用率、百分比等表示，计数数据以均数±标准差表示，对比方法为χ2检验与t检验等，应用Spearman等级相关分析进行相关性分析，检验显著性水平α=0.05。

2 结果

2.1 IGF⁃1、IGF⁃2、IGFBP⁃3表达阳性率情况 癌组织中IGF⁃1、IGF⁃2、IGFBP⁃3表达阳性率分别为90.8%、74.2%和30.0%，癌旁组织分别为28.3%、36.7%和93.3%，对比都有显著差异（P＜0.05）。见表1与图1、2、3。负相关（P＜ 0.05），IGF⁃2也与IGFBP⁃3呈负相关（P＜0.05）。见表3。

表1 不同组织的IGF⁃1、IGF⁃2、IGFBP⁃3表达阳性率情况Tab.1 The positive expression rates of IGF⁃1，IGF⁃2 and IGFBP⁃3 in different tissues 例（%）

图1 IGF⁃1表达的免疫组化情况Fig.1 IGF⁃1 immunohistochemical expression

图2 IGF⁃2表达的免疫组化情况Fig.2 IGF⁃2 immunohistochemical expression

图3 IGFBP⁃3表达的免疫组化情况Fig.3 IGFBP⁃3 immunohistochemical expression

2.2 IGF⁃1、IGF⁃2、IGFBP⁃3 表达与临床病理特征参数的相关性 在子宫内膜癌组织中，IGF⁃1、IGF⁃2蛋白的表达阳性率随着分化程度的降低、临床分期的增加、肌层浸润深度的加深、淋巴结的转移而增高（P＜0.05），IGFBP⁃3刚好相反（P＜0.05）；IGF⁃1、IGF⁃2、IGFBP⁃3表达阳性率与患者年龄、大体类型、组织类型无关（P＞0.05）。见表2。

2.3 IGF⁃1、IGF⁃2、IGFBP⁃3的相关性分析 在子宫内膜癌组织中，Spearman等级相关分析显示IGF⁃1与IGF⁃2呈正相关（P＜ 0.05），与IGFBP⁃3呈

表2 IGF⁃1、IGF⁃2、IGFBP⁃3表达与临床病理特征参数的相关性Tab.2 Correlation between expression of IGF⁃1，IGF⁃2 and IGFBP⁃3 and clinicopathological parameters 例（%）

3 讨论

IGFs家族能刺激细胞有丝分裂，促进细胞生长分化及抑制细胞凋亡；也可促进加强机体组织摄糖、糖异生、糖酵解等糖的的代谢，促使蛋白质、脂肪的合成增加，还能使得糖元合成增加，分解减少［8-9］。IGF⁃1是生长调节素的一种，子量为7.5 kD，分子中含有3个二硫键，由70个氨基酸的单链多肽组成，多存在于血液中。IGF⁃2基因属印迹基因，其是一种强有力的促有丝分裂剂，可以直接作用于细胞而导致分裂和增殖，抑制肿瘤细胞的凋亡［10］。IGFBP⁃3占IGFBPs的绝大多数，可通过自分泌、旁分泌的方式对进入组织，IGFBP⁃3可与IGF⁃1形成复合物，延长IGF⁃1的半衰期，从而影响IGF⁃1的生物学效应［11］。本研究显示子宫内膜癌组织中IGF⁃1、IGF⁃2、IGFBP⁃3表达阳性率分别为90.8%、74.2%和30.0%，癌旁组织分别为28.3%、36.7%和93.3%，对比都有显著差异。有学者检测了子宫内膜癌、子宫内膜不典型增生及正常对照人群血清中IGF⁃1浓度，显示患者中血清IGF⁃1浓度显著高于正常对照人群［12］。IGF⁃1、IGF⁃2过度表达，能够激活增生子宫内膜的蛋白激酶B途径，提示IGF⁃1、IGF⁃2的高表达会增加子宫内膜病变的可能性［13］。本研究显示在子宫内膜癌组织中，IGF⁃1、IGF⁃2蛋白的表达阳性率随着分化程度的降低、临床分期的增加、肌层浸润深度的加深、淋巴结的转移而显著增高，IGFBP⁃3刚好相反。相关研究发现子IGF⁃1、IGF⁃2也在多种肿瘤组织中均呈高表达，且与肿瘤的分化程度、预后有关［14］。

表3 子宫内膜癌组织IGF⁃1、IGF⁃2、IGFBP⁃3表达的相关性分析Tab.3 Correlation analysis of expression of IGF⁃1，IGF⁃2 and IGFBP⁃3 in endometrial carcinoma

IGFBPs可与绝大多数的IGF结合，IGFBPs可作为IGFs的载体，形成一个IGFs循环池与IGFs缓慢释放组织，从而对IGFs的浓度起着重要的调节作用［13］。本研究显示在子宫内膜癌组织中，Spearman等级相关分析分析显示IGF⁃1与IGF⁃2呈显著正相关性，与IGFBP⁃3呈显著负相关，IGF⁃2也与IGFBP⁃3呈显著负相关。有研究通过转染不能结合IGFs的IGFBP⁃3突变体到乳腺癌细胞后，其依然能抑制细胞中DNA的合成，并促进细胞的凋亡［8］。不过对于IGF⁃1、IGF⁃2及IGFBP⁃3与子宫内膜癌关系的研究还很有限，具体的机制还有待进一步分析。

综上所述，IGF⁃1、IGF⁃2、IGFBP⁃3与子宫内膜癌的临床病理特征参数密切相关，IGFBP⁃3可与IGF⁃1、IGF⁃2 形成复合物，进而阻止激活 IGF⁃1、IGF⁃2受体以及由此诱导的细胞增殖，从而抑制子宫内膜癌的形成。