慢性肾脏病患者血清Klotho水平、微炎症状态、氧化应激指标与肾功能的关系

李蕾芳，李芳华

(1许昌学院医学院，河南许昌461000；2许昌县人民医院)

慢性肾脏病(CKD)病情进展较为隐匿，临床整体预后较差[1,2]。在具有慢性肾小球疾病或者肾小管疾病病史的人群中，CKD发病率具有进一步上升的趋势。炎症反应或过氧化应激状态等多种因素均可参与CKD的病情进展过程，导致肾小球损伤，干扰肾小管重吸收功能的修复，表现为肾小球滤过率(eGFR)降低。目前，临床常用的炎性反应指标包括白细胞介素18(IL-18)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、IL-6等[3,4]；丙二醛(MDA)、晚期氧化蛋白产物(AOPP)是常见的过氧化指标，超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)是还原型化合物，它们共同维持氧化还原反应的平衡性[5]。血清Klotho是近年在肾小管上皮组织中被发现的细胞因子，其表达增加能够促进肾小管上皮组织及离子转运体的修复。2014年1月～2017年1月，我们检测了97例CKD患者血清Klotho水平、微炎症状态、氧化应激指标，分析其与CKD患者肾功能的关系。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 收集同期许昌县人民医院确诊的CKD患者。纳入标准：①CKD患者的诊断、分级标准参考中华医学会制定的相关标准；②CKD分期2～5期；③基础疾病均为慢性肾小球肾炎；④未进行透析治疗；⑤研究对象签署知情同意书。排除标准：①伴有凝血系统疾病；②急慢性感染期；③甲状腺功能疾病；④伴有上消化道溃疡、出血疾病；⑤使用透析治疗、糖皮质激素、免疫调节剂的患者；⑥合并糖尿病、原发性高血压；⑦伴有恶性肿瘤、肾外伤；⑧近6个月内有促红素使用史。共收集CKD患者97例(CKD组)，男50例、女37例，年龄(55.2±12.7)岁；K-DOQI指南诊断标准：CKD 2期21例，CKD 3期30例，CKD 4期32例，CKD 5期14例。选择同期体检健康者40例作为对照组，男22例、女18例，年龄(57.0±14.2)岁。本研究获得医院医学伦理委员会批准，两组性别、年龄具有可比性(P均>0.05)。

1.2 血清Klotho、微炎症状态、氧化应激指标及肾功能检测方法 采集患者肘部静脉血3 mL，加入抗凝剂枸橼酸钠2 mL，以1 000 r/min离心5 min，留取血清冰箱备用。采用ELISA法检测Klotho及氧化应激指标MDA、SOD、GSH-Px、AOPP，采用ASO-900系列全自动生化检测仪(南京伯斯金生物科技有限公司)检测微炎症状态指标IL-18、hs-CRP、IL-6及eGFR，试剂盒均购自罗氏检测公司。

2 结果

2.1 两组血清Klotho、IL-18、hs-CRP、IL-6水平比较 CKD组2～3期、4～5期患者血清Klotho水平均低于对照组(P均<0.05)，血清IL-18、hs-CRP、IL-6水平均高于对照组(P均<0.05)；CKD组4～5期患者血清Klotho水平低于2～3期(P<0.05)，血清IL-18、hs-CRP、IL-6水平均高于2～3期(P均<0.05)。见表1。

表1 两组血清Klotho、IL-18、hs-CRP、IL-6水平比较

2.2 两组血清MDA、SOD、GSH-Px、AOPP及eGFR水平比较 CKD组2～3期、4～5期患者血清SOD、GSH-Px水平及eGFR均低于对照组(P均<0.05)，血清MDA、AOPP水平均高于对照组(P均<0.05)；CKD组4～5期患者血清SOD、GSH-Px水平及eGFR均低于2～3期(P均<0.05)，血清MDA、AOPP水平高于2～3期(P均<0.05)。见表2。

表2 两组血清MDA、SOD、GSH-Px、AOPP及eGFR水平比较

2.3 CKD组血清Klotho、微炎症状态、氧化应激指标与肾功能的关系 CKD组血清Klotho、SOD、GSH-Px与患者eGFR呈正相关(r分别为0.621、0.622、0.553，P均<0.05)，MDA、AOPP、IL-18、hs-CRP、IL-6与eGFR呈负相关(r分别为-0.416、-0.639、-0.517、-0.556、-0.485，P均<0.05)。

3 讨论

CKD的长期发生发展，可促进多器官功能障碍，导致临床上不良临床结局事件的发生[6]。目前，临床上CKD的总体治疗有效率较低。相关研究发现，血清IL-18、hs-CRP、IL-6上升程度与基底膜细胞的通透性或滤过功能的下降程度相关，提示微炎症状态在诱导肾脏基底膜细胞或肾小球细胞凋亡或损伤过程中发挥重要作用[7,8]。Klotho能维持肾小管远端结构对液体的重吸收功能，并能提高肾小球基底膜的完整性，改善其滤过功能[9,10]；近年来发现，MDA、SOD、GSH-Px等氧化应激指标在慢性炎症性疾病或自身免疫性疾病发生中发挥了一定作用，但在CKD患者血清中的研究不足。部分相关研究探讨了细胞炎症因子如IL-18、hs-CRP、IL-6等在CKD中的异常变化，但缺乏对血清Klotho水平的分析，并且缺乏对于CKD不同病情中各指标的差异性研究。

本研究发现，与对照组比较，CKD组患者血清Klotho水平下降，而血清IL-18、hs-CRP、IL-6水平上升；同时，与CKD早期(2～3期)患者比较，中晚期(4～5期)患者血清Klotho水平下降，而血清IL-18、hs-CRP、IL-6水平上升。血清Klotho水平降低，可失去其对肾脏间质成分及细胞组织的保护作用，导致间质成分纤维化或脂肪化等病理改变的发生；血清IL-18、hs-CRP、IL-6水平上升，则可激活瀑布炎症反应因子，加剧炎症信号通路激活所致的肾脏组织炎性损伤。林书典、林文军等[11,12]研究发现，终末期CKD患者血清Klotho水平均下降25%以上，且患者肾功能损伤越明显，血清中炎症因子指标下降越严重。SOD、GSH-Px是还原型化合物，可抑制氧化反应过程中过度的氧自由基或其他离子基团的激活，能够保护肾脏上皮组织细胞的完整性，增强患者肾脏组织的保护性作用。本研究结果显示，CKD患者血清SOD、GSH-Px水平下降，且患者病情进展越严重，血清中各指标下降越明显，提示SOD、GSH-Px等与CKD患者的病情密切相关。本研究结果显示，CKD组2～3期、4～5期患者血清MDA、AOPP均高于对照组，且4～5期患者血清MDA、AOPP高于2～3期。MDA与肾小球基底膜组织中蛋白结构成分的改变有关[13]，而AOPP与肾小球基底膜基质成分的增生及硬化性改变有关[14]。本研究发现，CKD组血清Klotho、SOD、GSH-Px与患者eGFR呈正相关，血清MDA、AOPP、IL-18、hs-CRP、IL-6与eGFR呈负相关，说明血清Klotho、微炎症状态、氧化应激指标与肾功能具有密切关系。这提示临床上可以通过检测这些指标的变化，进而评估CKD患者的肾功能。

综上所述，CKD患者随着病情分级增加，其血清Klotho、抗氧化指标及肾功能降低，微炎症状态、过氧化指标升高；CKD患者血清微炎症状态、过氧化指标与肾功能呈负相关，血清Klotho、抗氧化指标与肾功能呈正相关。