复合乳酸菌胶囊对非酒精性脂肪性肝病患者肠道菌群及血脂影响的临床研究*

陈文翰 孙光裕 陈伟忠 谢彬 林少荣 丁云岗

非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是指除了饮酒及其他因素导致肝脏代谢应激性损伤的临床病理综合征，胰岛素抵抗和遗传易感性与其发病机制密切相关[1-2]。按病情程度的不同可分为：单纯性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎、肝硬化和肝癌[3]。科技的发展改变了人们的生活习惯，而不断提高的物质生活水平却使得NAFLD的发病率在全球呈现一个流行化的趋势，而且发病率也逐渐地相对年轻化，已经成为当今社会超过病毒性肝炎的最常见慢性病之一。NAFLD还与高脂血症、2型糖尿病、心脑血管疾病等一系列代谢性疾病的发生发展息息相关[4]。NAFLD的治疗方面，目前尚缺乏十分有效的手段[5]。近年来，随着人们对肠道菌群研究的不断深入，发现肠道菌群与宿主代谢及NAFLD之间有着非常密切的相关性。著名的“二次打击”学说[6-7]，较好地诠释了NAFLD的发病机制，指出肠道菌群通过“肠-肝轴”可以影响NAFLD的发生发展。本研究通过复合乳酸菌胶囊对NAFLD的疗效进行观察分析，目的为证明复合乳酸菌胶囊为治疗NAFLD的安全有效方法之一。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2017年3月-2018年3月本院住院的确诊NAFLD患者40例为NAFLD组。纳入标准：以《非酒精性脂肪性肝病诊疗指南》作为确诊诊断的参考标准[8]；既往无饮酒史。排除标准：其他特殊病因的肝病病史、糖尿病史，排除妊娠及精神病史。按照随机数字表法将NAFLD患者分为A、B组，各20例。另选取同期在本院门诊健康体检者40例为健康对照组。本研究经本院伦理委员会审核批准，研究对象均系自愿参加，并已签署知情同意书。

1.2 方法 A组给予含有乳酸杆菌、嗜乳酸杆菌和乳酸链球菌三种活乳酸菌的复合乳酸菌胶囊（江苏美通制药有限公司，国药准字H19980184），口服660 mg/次，3次/d，连续8周。B组为空白对照组。研究对象在研究期间均确保没有使用任何调控血脂的药物、含有益生菌成分的食物、抗生素等有可能改变肠道菌群情况的物品。

1.3 观察指标 （1）NAFLD患者均在治疗前后留取粪便标本，健康对照组均在检查时留取标本，通过对粪便标本进行涂片，分类计数，比较肠道菌群中有益菌（主要为含有乳酸菌、双歧杆菌等G+杆菌）、中性菌及有害菌（主要为G-杆菌、G+球菌和G-球菌）的变化情况，了解肠道菌群的变化情况；（2）血清学指标：NAFLD患者分别在治疗前后于空腹状态下采集静脉血，通过全自动生化分析仪检测血清总胆固醇（TC）和甘油三酯（TG）的水平变化。

1.4 统计学处理 使用SPSS 22.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（±s）表示，组间比较采用t检验，组内比较采用配对t检验；计数资料以率（%）表示，比较采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组基线资料比较 健康对照组与NAFLD组性别、年龄比较差异均统计学意义（t=1.897、-0.442，P=0.062、0.660），具有可比性；A、B组性别、年龄比较差异均统计学意义（t=-0.984、-0.936，P=0.331、0.355），具有可比性。见表1。

表1 各组一般资料比较

2.2 各组肠道菌群检测结果比较 治疗前，NAFLD组G+杆菌占肠道菌群的百分比例少于健康对照组，G-杆菌、G+球菌及G-球菌占肠道菌群的百分比例均多于健康对照组，比较差异均有统计学意义（P＜0.05）；治疗前，A、B组肠道菌群检测结果比较差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗后，A组G+杆菌占肠道菌群的百分比例多于治疗前和B组，G+球菌占肠道菌群的百分比例少于治疗前，G-球菌占肠道菌群的百分比例少于B组，比较差异均有统计学意义（P＜0.05）；B组治疗前后肠道菌群检测结果比较差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2、3。

2.3 NAFLD患者治疗前后血清学指标比较 治疗前，A、B组TG、TC水平比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；治疗后，A组TG、TC水平均低于治疗前、B组（P＜0.05），但B组治疗前后TG、TC水平比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。见表4。

表2 健康对照组与NAFLD组治疗前肠道菌群的情况比较[lg%，（±s）]

表2 健康对照组与NAFLD组治疗前肠道菌群的情况比较[lg%，（±s）]

组别 G+杆菌 G-杆菌 G+球菌 G-球菌健康对照组（n=40） 1.60±0.11 1.45±0.26 0.97±0.23 0.97±0.19 NAFLD 组（n=40） 1.09±0.32 1.59±0.28 1.24±0.33 1.15±0.22 t值 9.629 -2.212 -4.308 -3.969 P值 0.000 0.030 0.000 0.000

表3 NAFLD患者治疗前后肠道菌群的情况比较[lg%，（±s）]

表3 NAFLD患者治疗前后肠道菌群的情况比较[lg%，（±s）]

组别 G+杆菌G-杆菌治疗前 治疗后 t值 P值 治疗前 治疗后 t值 P值A 组（n=20） 1.06±0.34 1.47±0.09 -6.810 0.000 1.57±0.32 1.60±0.10 -0.677 0.507 B 组（n=20） 1.13±0.29 1.26±0.23 -1.560 0.127 1.61±0.24 1.56±0.30 1.298 0.210 t值 -0.677 3.855 -0.496 0.636 P值 0.503 0.001 0.623 0.531

表3 （续）

表4 NAFLD患者治疗前后TC、TG水平比较[mmol/L，（±s）]

表4 NAFLD患者治疗前后TC、TG水平比较[mmol/L，（±s）]

治疗前 治疗后 t值 P值 治疗前 治疗后 t值 P值A 组（n=20） 6.28±0.99 5.49±0.75 2.828 0.008 1.89±0.65 1.38±0.46 2.852 0.007 B 组（n=20） 5.83±0.83 5.95±0.91 -0.450 0.655 2.39±1.19 2.45±0.97 -0.178 0.860 t值 1.557 -1.742 -1.656 -4.451 P值 0.128 0.090 0.108 0.000组别 TC TG

3 讨论

到目前为止，NAFLD的发病机制仍没有完全明确，“二次打击”学说是目前公认的比较合理的发病机制，普遍认为NAFLD与胰岛素抵抗和遗传易感性有关，是一种代谢应激性肝损伤[9-10]，胰岛素抵抗主要通过高脂血症和高胰岛素血症这两个途径，使得大量的脂质沉积在肝内，继而导致肝细胞发生脂肪变性，这是来自胰岛素抵抗和高胰岛素血症的第一次打击。第二次打击来自脂质过氧化对肝脏的损害，多种因素所致的氧化应激和脂质过氧化，反复作用于肝脏细胞，导致非特异性炎性损伤的发生，继而发展成为肝纤维化、肝硬化，甚至是肝细胞癌[11]。近年来，国内外有许多项研究均发现，肠道菌群失调患者罹患NAFLD率高于肠道健康人群，提示菌群失调与NAFLD的发生有关[12]。人体肠道中菌群有10万亿之多，规模非常庞大，这些细菌根据其对人体所产生的不同作用，可分为有益菌、有害菌和中性菌三大类。有益菌，也称之为益生菌，主要包括乳酸杆菌、双歧杆菌等各种G+杆菌[13-14]。有益菌除了可以合成各种必需的维生素，还能促进肠道蠕动，参与食物的消化，另外还能抑制有害菌群的生长，防止肠道内的有毒物质侵入机体。本研究将NAFLD患者与健康人群的粪便涂片进行细菌计数分类，并进行分析对比，结果显示，治疗前NAFLD组G+杆菌占肠道菌群的百分比例少于对照组，G-杆菌、G+球菌及G-球菌占肠道菌群的百分比例均多于对照组，比较差异均有统计学意义（P＜0.05），该结果与国内已发表的研究结果相符合[15-16]，说明肠道菌群失调是NAFLD发生发展的原因之一。

生活方式干预和药物治疗为目前NAFLD治疗的两个主要手段，但是生活干预方式发挥作用相对比较缓慢，而且仅适用于早期轻症患者，大多数患者往往还需要给予药物干预治疗[17]。近年来，肠道益生菌以其价格低廉、疗效明显、副作用少的特点，已经广泛应用于NAFLD的治疗。本研究所采用的复合乳酸菌胶囊是一种含有乳酸杆菌、嗜乳酸杆菌和乳酸链球菌三种活乳酸菌的复合益生菌，能在肠内繁殖，产生乳酸，通过制造肠道内局部缺氧环境，抑制肠道内腐败细菌的繁殖，同时促进双歧杆菌等有益菌的生长，恢复正常肠道菌群的比例。本研究结果显示，治疗后，A组G+杆菌占肠道菌群的百分比例多于治疗前和B组，G+球菌占肠道菌群的百分比例少于治疗前，G-球菌占肠道菌群的百分比例少于B组，比较差异均有统计学意义（P＜0.05）；B组治疗前后肠道菌群检测结果比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结果说明，服药8周后，肠道菌群中有益菌数量相比空白对照组有明显的增加，也验证了复合乳酸菌胶囊对于NAFLD患者肠道菌群失调有一定的治疗作用。

NAFLD患者早期的临床症状及体征往往不太明显，但随着病程的发展则可以出现肝功能、血脂等指标的异常改变。高血脂会对肝脏，甚至心脑血管方面造成严重的危害，因此，NAFLD治疗的其中一个目标就是有效地控制血脂水平。肠道益生菌通过与胆固醇相结合的方式，抑制其吸收入血；还能产生胆盐水解酶，干扰胆汁酸的肝肠循环，促进其从体内排泄，从而增加合成胆汁酸所需胆固醇的数量，其结果是增加了体内胆固醇的消耗量，降低了血清胆固醇水平[18-20]，改善了高血脂情况。本研究结果显示，治疗后，A组TG、TC水平均低于治疗前、B组（P＜0.05），但B组治疗前后TG、TC水平比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。

综上所述，复合乳酸菌胶囊能够调节NAFLD患者肠道菌群失调情况，改善其血脂水平，具有预防和治疗NAFLD的作用。该研究中对于肠道菌群的分类采取的是一个涂片革兰氏染色分类计数法，如果在检验条件支持的前提下，对肠道菌群做针对性的培养分类，则其结果会更具有临床意义。