液相色谱-串联质谱法测定月柿中187种农药残留

秦 富，邓全道，李 湧，黄大新，汪文龙*

(1.广西出入境检验检疫局 检验检疫技术中心，广西 南宁 530021；2.桂林出入境检验检疫局，广西 桂林 541004)

月柿俗称“柿饼”，是由柿鲜果经剥皮、日晒、脱涩等一系列工艺制成，其肉质棕红半透明，表皮凝有一层雪白的柿蜜霜。月柿是广西传统创汇的名优果品，其肉厚无核、脆嫩香甜、口感上佳，含有丰富的营养物质，深得日本、韩国、东南亚及地中海沿岸各国消费者的喜爱。广西月柿源产于广西桂林市平乐县和恭城县，产量达30万吨，年产值超过3.7亿元。其中“恭城月柿栽培系统”于2017年被农业部认定为第四批中国重要农业文化遗产[1]。柿树在生长过程中易受到炭疽病、角斑病、疮痂病、柿蒂虫、介壳虫、粉虱、刺蛾等病虫害的影响[2-4]。其中，柿树炭疽病是由胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides )[5-6]引起的可对柿树及柿果造成毁灭性损伤的侵染性病害，且在柿树生长的各个时期均较易发生。角斑病和柿蒂虫的危害次之，在柿树开花结果过程中容易发生。因此农药防治是月柿栽培系统中的关键环节，最常用的农药化合物包括甲氰菊酯、代森锰锌、多菌灵、扑虱灵、哒螨灵、吡虫啉、苯醚甲环唑、腈菌唑、咪鲜胺、甲基硫菌灵等[2-4]。然而，这些农药的超量不合理使用不仅会导致柿果中农药残留超标而影响出口销售和食用者的健康，还会对土壤和水体造成污染并引起人和动物急性或慢性中毒。因此，必须对月柿栽培中使用的农药种类和剂量实行监管，并对月柿中农药残留实施风险监测。高通量检测技术是实施农药残留风险监测的重要手段，近年来研究者们建立了高通量检测生姜、水果、蔬菜和茶叶中数百种农药残留的方法[7-10]。但由于月柿经特殊工艺加工后含糖量很高，属于半干样品，其前处理方法和基质效应与水果蔬菜样品均有较大区别。同时上述检测方法未能覆盖月柿栽培过程中较常用的农药化合物。因此，有必要研究建立针对广西月柿中常用农药残留的高通量检测技术。本研究采用实验室优化的QuEChERS方法[11]对月柿样品进行快速前处理，在电喷雾正离子模式(ESI+)下进行动态多反应监测扫描分析，建立了液相色谱-串联质谱同时检测广西月柿中187种农药残留的方法，为广西月柿的种植生产及出口贸易中农药残留风险监测提供可靠的技术手段。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

Agilent 1260-6410B液相色谱-串联质谱仪、ZORBAX Eclipse Plus-C18色谱柱(100 mm×2.1 mm，1.8 μm)(美国Agilent公司)；XS204电子天平(瑞士Mettler公司)；GM200刀式混合研磨仪(德国Retsch公司)；SA300多功能振荡器(日本Yamato公司)；KL512J氮气浓缩仪(北京康林科技有限公司)；FA25高速组织分散器(德国Fluko公司)；Milli-Q超纯水系统(美国Millipore公司)。

农药混合标准品(100 mg/L，批号分别为LC23289、LC22982、LC22983、LC22984、LC23294、LC22986、LC23292和LC23293，美国Agilent公司)；甲醇、乙腈、甲酸铵(色谱纯，美国Tedia公司)，甲酸、无水硫酸钠、无水硫酸镁、无水醋酸钠(分析纯，美国Tedia公司)；C18(40～63 μm)、N-丙基乙二胺(PSA，40～63 μm)(德国CNW公司)。

1.2 标准溶液配制

用甲醇将混合标准溶液稀释10倍，配制成质量浓度为10 mg/L的标准储备液，置于-20 ℃保存；用乙腈-水(体积比3∶ 2，下同)溶液稀释，分别配制质量浓度为1、5、10、20、50、100 μg/L的标准工作液。

1.3 样品处理

1.3.1加水处理将月柿样品切碎后，用研磨仪均质研磨成细碎的混合试样，称取5 g试样，置于50 mL离心管中，加10 mL超纯水，充分混合振摇直至试样呈乳糜状。

1.3.2提取向经过加水处理的样品中加入10 mL 含有1%醋酸的乙腈溶液，匀浆提取1 min；加入4 g无水硫酸镁和1 g无水醋酸钠，立即混合振摇30 min；以4 000 r/min离心5 min，移取上层清液2 mL，置于15 mL离心管中，待净化。

1.3.3净化分别加入1 g Na2SO4、0.3 g C18和0.2 g PSA，振荡涡旋30 s，以4 000 r/min离心5 min；重复振荡涡旋和离心1次；然后移取上清液1 mL，于45 ℃水浴氮吹至干，用1 mL乙腈-水(3∶ 2)溶解残渣，过0.22 μm有机滤膜后装瓶待测。

1.4 分析条件

1.4.1液相色谱条件ZORBAX Eclipse Plus-C18色谱柱(2.1 mm×100 mm，1.8 μm)；柱温为55 ℃，进样体积为5 μL；流动相：A为含0.005 mol/L甲酸铵和0.01%甲酸的水溶液,B为含0.005 mol/L甲酸铵和含0.01%甲酸的95%乙腈水溶液；梯度洗脱程序：0～0.5 min，5% B；0.5～18 min，5%～95% B；18～20 min，95% B，流速为0.4 mL/min，后运行时间为4 min。

1.4.2质谱条件采用电喷雾离子源正离子模式(ESI+)，动态多反应监测(DMRM)方式；毛细管电压为4 000 V；干燥气温度为350 ℃，流量为12 L/min；雾化气压力为0.34 MPa。

表1 187种农药的质谱参数、保留时间、基质效应、相关系数、回收率及相对标准偏差Table 1 MS parameters，retention times，matrix effects，correlation coefficients，recoveries and relative standard deviations of 187 pesticides

(续表1)

No.Compound Precursor ionProduct ionCollision energy/VFragmentor/VRT/minME/%r2Recovery/%RSD/%54Ethoprophos(灭线磷)243.1131.0*/173.116/810511.6516.610.996285.5 18 55Ethoxyquin(乙氧基喹啉)218.2174.1*/148.025/3012012.7411.680.995789.3 20 56Etofenprox(醚菊酯)394.2177.1*/359.015/510018.315.260.998883.5 8.4 57Famoxadone(唑菌酮)392.2331.1*/238.112/49013.7714.340.9997116 13 58Fenamidone(咪唑菌酮)312.192.1*/236.120/412011.538.980.9998104 9.1 59Fenamiphos(苯线磷)304.1217.0*/234.020/1512011.4512.700.999898.8 3.0 60Fenarimol(氯苯嘧啶醇)331.0268.0*/81.030/2512011.20-13.110.9975101 16 61Fenazaquin(喹螨醚)307.257.0*/161.120/1512015.96-2.900.998973.7 7.2 62Fenbuconazol(腈苯唑)337.170.0*/125.020/2012012.1017.610.9993116 16 63Fenhexamid(环酰菌胺)302.197.1*/55.130/258011.6718.040.9994108 15 64Fenobucarb(仲丁威)208.195.0*/152.010/58010.64-6.400.998496.1 11 65Fenoxycarb(苯氧威)302.188.0*/116.120/1012012.43-1.500.9992108 8.3 66Fenpyroximate(唑螨酯)422.2366.1*/135.040/1513016.2810.540.999595.6 5.8 67Fenuron(非草隆)165.172.0*/120.015/151205.082.220.999498.2 2.6 68Fipronil(氟虫腈)454.0436.9*/368.020/49413.158.310.9967115 1569Flonicamid(氟啶虫酰胺)230.1203.0*/174.015/15704.141.670.9998108 8.1 70Fludioxonil(咯菌腈)266.1229.0*/158.036/48510.81-9.650.998394.0 6.1 71Flufenacet(氟噻草胺)364.1194.1*/152.110/58012.623.030.999199.0 7.3 72Flufenoxuron(氟虫脲)489.0158.0*/141.015/108015.9114.400.9996106 4.5 73Flumetsulam(唑嘧磺草胺)326.1129.0*/129.030/201205.8816.890.991173.5 3.9 74Flumioxazin(丙炔氟草胺)355.1299.0*/327.025/2510010.901.540.9983104 1675Fluometuron(伏草隆)233.172.0*/160.020/201208.791.030.9999105 7.6 76Fluoxastrobin(氟嘧菌酯)459.1427.1*/188.040/1513012.703.020.9997115 4.0 77Fluquinconazole(喹唑菌酮)376.0307.0*/349.020/2510011.6713.860.9998116 13 78Flusilazole(氟硅唑)316.1247.1*/165.020/1512012.07-1.350.9993102 3.3 79Flutriafol(粉唑醇)302.170.0*/123.015/201209.0015.690.9995107 6.7 80Forchlorfenuron(氯吡脲)248.1129.1*/155.112/12958.810.710.99821013.8 81Fosthiazate(噻唑膦)284.1104.0*/228.020/5809.03-0.420.9995107 5.2 82Fuberidazole(麦穗宁)185.1157.1*/156.030/251205.593.690.9987100 2.6 83Furalaxyl(呋霜灵)302.1242.1*/95.027/1011010.902.980.9998107 4.2 84Furathiocarb(呋线威)383.2195.1*/252.115/1012015.406.890.9993100 5.2 85Hexaconazole(己唑醇)314.170.0*/159.020/1012012.205.420.9997103 12 86Hexythiazox(噻螨酮)353.1228.0*/168.120/1012015.882.980.999491.8 5.1 87Hydramethylnon(氟蚁腙)495.2323.1*/151.050/2822013.976.960.998485.0 6.2 88Imazalil(抑霉唑)297.1159.0*/255.020/201609.172.680.999598.4 5.6 89Imidacloprid(吡虫啉)256.1209.1*/175.010/10805.287.650.99991022.7 90Indoxacarb(茚虫威)528.1203.0*/150.016/3612014.725.100.9993101 12 91Ipconazole(环戊唑醇)334.270.1*/125.022/4511013.189.530.9994106 7.0 92Iprovalicarb(异丙菌威)321.2119.1*/203.120/58011.514.700.9998112 2.0 93Isoprothiolane(稻瘟灵)291.1189.0*/231.020/58012.1411.850.9989102 2.9 94Isoxaben(异草胺)333.2165.0*/150.050/1512012.057.720.9996107 2.8 95Kresoxim-methyl(醚菌酯)314.1267.0*/206.15/58013.246.890.9989109 17 96Lenacil(环草定)235.1153.1*/136.015/10808.11-1.050.999698.3 2.9 97Linuron(利谷隆)249.0160.0*/182.020/1512010.72-0.390.998394.5 12 98Lufenuron(虱螨脲)511.0158.0*/328.116/1213815.45-2.520.999710312 99Malaoxon(马拉氧磷)315.199.0*/127.020/10808.394.400.9994108 3.6 100Malathion(马拉硫磷)331.0126.9*/99.010/58012.176.860.9985100 4.2 101Mandipropamid(双炔酰菌胺)412.1328.0*/356.011/512011.775.340.9994111 5.5 102Mecarbam(灭蚜蜱)330.1227.0*/199.010/58012.867.060.998999.3 6.4 103Mepanipyrim(嘧菌胺)224.177.0*/106.030/2512011.79-5.180.998793.5 10 104Metaflumizone(氰氟虫腙)507.0178.0*/287.025/2513015.36-13.640.9999108 17 105Metalaxyl(甲霜灵)280.2220.1*/192.015/101209.376.760.9995107 4.6 106Metamitron(苯嗪草酮)203.1104.1*/77.015/201204.94-16.450.997990.9 8.6 107Metazachlor(吡草胺)278.1134.1*/210.120/5809.846.040.9998109 2.3 108Metconazole(羟菌唑)320.270.0*/125.035/5514012.440.140.999698.7 8.2 109Methabenzthiazuron(噻唑隆)222.1165.1*/150.020/151208.497.140.9996101 5.4 110Methidathion(杀扑磷)303.0145.0*/85.010/58010.57-5.050.9966111 6.7

(续表1)

No.Compound Precursor ionProduct ionCollision energy/VFragmentor/VRT/minME/%r2Recovery/%RSD/%113Methoprotryne(盖草津)272.2198.1*/170.130/201409.973.720.999199.3 4.9 114Methoxyfenozide(甲氧虫酰肼)313.0149.1*/91.035/1010012.2410.470.9998108 4.2 115Metobromuron(秀谷隆)259.0170.0*/148.115/151209.3810.550.9990103 5.7 116Metolachlor(异丙甲草胺)284.1252.1*/176.115/1012012.346.320.999390.7 17 117Metribuzin(嗪草酮)215.1187.1*/130.120/151207.64-1.360.9997106 3.6 118Metsulfuron-methyl(甲磺隆)382.1167.1*/141.020/151207.346.500.997574.9 4.1 119Mevinphos(速灭磷)225.1127.0*/193.015/1806.163.390.997081.7 17120Mexacarbate(兹克威)223.1151.0*/166.020/1011010.265.630.99951025.3 121Monocrotophos(久效磷)224.1127.0*/193.010/01003.854.690.999598.1 2.6 122Myclobutanil(腈菌唑)289.170.0*/125.015/2012011.325.850.999810111 123Novaluron(敌草胺)493.0158.0*/141.055/158014.735.230.9993110 3.9 124Oxadixyl(恶霜灵)279.1219.1*/102.010/10807.48-2.220.99951102.1 125Oxamyl(杀线威)237.072.0*/90.010/10803.477.330.9996105 2.8 126Penconazol(戊菌唑)284.170.0*/159.015/2012012.17-6.840.999381.2 16 127Pencycuron(禾穗宁)329.1125.0*/218.020/1512014.149.500.99981033.0 128Pendimethalin(二甲戊乐灵)282.1212.1*/194.15/57015.769.670.999183.4 9.8 129Phenmedipham(甜菜宁)301.1136.1*/168.120/58010.682.610.9995106 4.6 130Phenthoate(稻丰散)321.0247.0*/163.110/58013.556.040.998892.9 4.6 131Phosalone(伏杀硫磷)368.0182.0*/322.010/58014.210.620.9982104 4.7 132Phosmet(亚胺硫磷)318.0160.0*/133.035/108011.0210.330.99971049.0 133Phosphamidon(磷胺)300.1174.0*/127.020/101307.373.420.99981083.0 134Phoxim(辛硫磷)299.177.0*/129.020/208014.220.680.998791.9 11135Picolinafen(氟吡草胺)377.1238.0*/359.020/2012015.106.400.9994110 2.9 136Picoxystrobin(啶氧菌酯)368.1145.1*/205.120/58013.423.900.9997110 3.0 137Pirimicarb(抗蚜威)239.272.0*/182.120/151208.631.380.998794.3 6.9 138Pirimiphos-methyl(虫螨磷)306.1164.1*/108.130/2012014.445.320.999095.8 11 139Prochloraz(咪鲜胺)376.0308.0*/266.010/108012.754.790.999997.5 4.8 140Profenofos(丙溴磷)372.9302.9*/344.915/1012014.506.500.999492.9 5.6 141Promecarb(猛杀威)208.1109.1*/151.110/58011.057.510.999298.6 6.2 142Prometon(扑灭通)226.2142.1*/184.120/201209.257.160.999099.0 5.3 143Propaquizafop(喔草酯)444.1100.0*/371.010/510015.108.590.998998.3 5.6 144Propham(苯胺灵)180.1138.1*/120.015/5809.673.530.9900111 6.3 145Propiconazole(丙环唑)342.1159.0*/69.020/2012012.616.820.99981077.0 146Propoxur(残杀威)210.1111.0*/168.110/5808.194.660.999198.2 6.1 147Prosulfocarb(苄草丹)252.191.1*/128.115/1012014.815.400.995887.1 16148Pyracarbolid(比锈灵)218.1125.1*/55.136/121158.458.480.9994106 4.0 149Pyraclostrobin(百克敏)388.1163.0*/194.120/1012013.803.240.9999112 4.3 150Pyridaben(速螨酮)365.1147.0*/309.120/108017.1719.250.999599.9 4.2 151Pyrimethanil(嘧霉胺)200.1107.1*/183.025/2512010.399.940.998096.7 11 152Pyriproxifen(吡丙醚)322.196.0*/227.015/1012015.645.300.998488.3 9.8 153Quinalphos(喹硫磷)299.1163.0*/147.120/2012013.074.890.998293.0 16 154Quinoclamine(灭藻醌)208.0105.0*/154.030/201207.29-9.100.9993118 5.2 155Quinoxyfen(喹氧灵)308.0197.0*/272.032/2413514.844.920.998884.5 9.3 156Rotenone(鱼藤酮)395.2213.0*/192.125/2012012.6319.500.9988107 10157Secbumeton(密草通)226.2142.0*/100.030/251009.247.520.9990101 6.0 158Spinosad A(多杀菌素A)732.5142.1*/98.055/3514012.60-3.200.998672.5 6.8 159Spirodiclofen(螺螨酯)411.171.2*/313.015/511017.3322.470.999799.5 5.0 160Tebuconazole(戊唑醇)308.270.0*/151.020/2012011.987.360.999410310 161Tebufenozide(虫酰肼)297.0133.1*/105.035/159013.104.020.9998108 4.8 162Tebufenpyrad(吡螨胺)334.2145.1*/117.032/2417514.937.660.999393.9 4.7 163Tebuthiuron(丁唑隆)229.1172.1*/116.020/151207.202.560.9996100 3.2 164Teflubenzuron(伏虫脲)381.0158.0*/141.045/1210014.1420.140.9975100 9.0 165Temephos(双硫磷)467.0125.0*/419.024/815515.7911.730.9994106 4.0166Tepraloxydim(吡喃草酮)342.2166.1*/250.125/1012011.6721.190.995110612 167Tetraconazole(氟醚唑)372.0159.0*/70.016/3615011.832.940.99961182.9 168Thiabendazole(噻菌灵)202.0175.0*/131.140/301205.301.460.999696.6 4.8 169Thiacloprid(噻虫啉)253.0126.0*/186.015/101206.62-0.540.9999106 2.1

(续表1)

No.Compound Precursor ionProduct ionCollision energy/VFragmentor/VRT/minME/%r2Recovery/%RSD/%172Thiodicarb(硫双威)355.188.0*/163.015/5808.506.901.00001043.1 173Thiofanox(久效威)241.1184.0*/57.115/51208.94-1.540.995194.3 15 174Tolylfluanid(对甲抑菌灵)347.0137.0*/238.020/58014.007.500.999892.8 11175Triadimefon(三唑酮)294.169.0*/197.020/1512011.536.770.9994107 16 176Triasulfuron(醚苯磺隆)402.1167.1*/141.120/151208.4912.860.995884.8 9.0 177Triazophos(三唑磷)314.1162.1*/286.020/1012012.299.280.9996106 2.5 178Trichlorfon(敌百虫)256.9109.0*/221.020/101204.843.900.9992100 7.2 179Tricyclazole(三环唑)190.0163.0*/136.030/251205.996.420.999389.6 3.7 180Trietazine(草达津)230.1202.0*/132.020/2016011.883.500.998294.0 16 181Trifloxystrobin(肟菌酯)409.1186.1*/206.115/1012014.852.660.9997105 3.9 182Triflumizole(氟菌唑)346.1278.1*/73.110/58013.713.020.999495.9 4.3 183Triflumuron(杀虫隆)359.0156.0*/139.020/2012013.319.840.9999113 6.7 184Triticonazole(灭菌唑)318.270.0*/125.115/3512011.0417.580.998111112 185Uniconazole-1(烯效唑-1)292.170.0*/125.030/3012011.39-0.330.9989107 12 186Vamidothion(蚜灭多)288.1146.1*/118.020/10805.173.120.9996102 4.2 187Zoxamide(苯酰菌胺)336.0187.0*/159.036/1612513.66-2.030.999899.1 2.6

*quantitative ion

1.5 定量方法

采用基质匹配外标法定量，用空白月柿提取液将农药标准品配制成一系列标准工作溶液进行检测，然后用Agilent MassHunter B.04软件对检测结果进行定性分析，并绘制基质标准曲线进行定量分析。

2 结果与讨论

2.1 样品的处理与净化

本研究首先将月柿样品切碎均质后进行加水处理，因月柿属于半干样品，加水振荡使其泡发、膨胀，破坏植物细胞和组织结构利于各种化合物的释放溶解，有助于提高提取效率；再加入1%醋酸乙腈提取液、适量的无水硫酸镁和无水醋酸钠进行混合振荡，诱导水相和乙腈分层，促使农药等有机化合物分散迁移至乙腈层，酸性乙腈还能使植物蛋白、植物纤维等物质组织加速变性沉淀；最后采用QuEChERS方法对提取液进行净化，并选择1 g Na2SO4+0.3 g C18+0.2 g PSA为净化填料，其中无水Na2SO4用于除水，C18可去除基质中的脂肪和酯类等非极性干扰物，PSA可吸附基质中的碳水化合物、脂肪酸、有机酸、酚类和少量色素[12-13]。

2.2 质谱与液相色谱条件的优化

2.2.1质谱条件的优化采用纯乙腈分别配制质量浓度为100 μg/L的187种农药混合标准溶液，依据食品法典委员会和欧盟关于分析方法评价和结果解释执行委员会决议中的有关规定[14]，对187种农药在ESI+模式下进行选择离子监测(SIM)扫描。然后通过优化各化合物的源内碎裂电压和碰撞能等质谱参数，选择1个母离子和2个子离子作为该化合物的定性和定量离子对。选取响应值高、干扰小的离子为子离子，最后在两对离子对中选择响应较强的作为定量离子，从而建立了187种农药化合物的离子监测扫描方法，具体参数见表1。

图1 10 μg/kg加标试样中187种农药的总离子流色谱图Fig.1 Total ion chromatogram(TIC) of 187 pesticides in spiked (10 μg/kg) solutions

2.2.2液相色谱条件的优化根据187种农药的化学结构和性质选择Agilent ZORBAX Eclipse Plus-C18色谱柱(2.1 mm×100 mm，1.8 μm)，以乙腈-水溶液(3∶ 2)作为定容溶液，以含0.005 mol/L甲酸铵和0.01%甲酸的95%乙腈水溶液为有机相，含0.005 mol/L甲酸铵和0.01%甲酸的水溶液为水相。首先，将187种农药化合物分为8组，并分别建立8个多反应监测(MRM)质谱扫描方法。然后，通过优化这8个方法中有机相和水相的比例和时间梯度，使各组化合物的响应值相对较高并且分离较好。最后，记录每个化合物的保留时间作为动态多反应监测(DMRM)扫描方法的保留时间，设置增量保留时间(Delta Ret Time)为1 min，建立187种农药化合物的DMRM质谱分析方法(表1)。在“1.4”条件下对加标10 μg/kg的试样净化处理后进行检测分析，除了极性较强的杀线磷、灭多威和久效磷的峰形略差外，其余184种农药的峰形和响应值均较好。10 μg/kg加标试样中187种农药化合物的总离子流色谱峰见图1。

2.3 基质效应分析

基质效应(Matrix effect，ME)是在质谱检测过程中目标化合物以外的其他样品基质组分直接或间接影响检测结果的现象。样品基质中的共流出组分通过干扰目标化合物的离子化效率引起目标化合物信号的增强或减弱，最终影响定量的准确性。月柿由柿鲜果经日晒、脱涩等加工程序制成后，其中的多糖、果胶类、多酚类以及色素等基质组分的含量大大增加，若前处理净化效果不佳将难以消除基质效应。本研究采用提取后加入标准物质法[15-16]评价基质效应，即将不含目标化合物的月柿样品进行提取和净化后获得基质提取液，再分别用该提取液和定容液将187种农药标准储备液配制成1、5、10、20、50、100 μg/L两组标准溶液。在相同条件下对两组标准溶液进行检测，分别以待测物定量离子的峰面积(y)为纵坐标，其质量浓度(x,μg/L)为横坐标，建立基质标准曲线和溶剂标准曲线。当该两条标准曲线的相关系数均≥0.99时，计算相应化合物的基质效应，ME=(B-A)/A×100%(A和B分别为溶剂标准曲线和基质标准曲线的斜率)。当|ME︱≤10%表示基质效应较小，可用溶剂标准曲线定量；当10%<|ME︱≤50%时表示基质效应较大，需用基质标准曲线定量以消除基质效应的影响；当|ME︱>50%时表示基质效应很强，需要优化前处理方法以降低基质效应。结果显示，187种农药的ME值为-16.45%～34.44%(见表1)，表明经前处理净化后的月柿样品对部分农药的基质效应较显著，因此本研究采用基质匹配外标法进行准确定量。

2.4 方法评价

在空白月柿样品中分别按1、5、10、20、50、100 μg/kg加标水平添加187种农药化合物的混合标准溶液，其中1、10、20、100 μg/L设置6个平行，进行加标实验以分析方法的检出限、线性相关性和回收率；同时用空白月柿基质提取液将187种农药混合标准储备液配制成1、5、10、20、50、100 μg/L系列浓度标准工作液，与加标试样同时扫描检测分析。分别以187种农药化合物定量离子的峰面积(y)为纵坐标，质量浓度(x，μg/L)为横坐标绘制基质标准曲线，并用于加标试样的定量和回收率分析。结果如表1所示，187种农药化合物在1～100 μg/kg范围内线性相关性良好，r2>0.99；以满足信噪比(S/N)≥3的最小加标水平作为方法检出限(LOD)，以满足S/N≥10的最小加标水平作为方法定量下限(LOQ)，187种农药化合物的LOD、LOQ分别为1、10 μg/kg；10 μg/kg加标水平下的回收率为70.2%～118%，相对标准偏差(RSD，n=6)为2.0%～20%。本方法的准确度、灵敏度和精密度均能满足欧盟指令《食品和饲料中农药残留分析质量控制和方法验证程序的指导文件》[17]的相关要求。

图2 月柿中13种农药的检出率Fig.2 Detection rate of 13 kinds of pesticides in dried persimmon

2.5 方法应用

采用该方法对本实验室的149份月柿样品进行检测，结果见图2。其中检出农药13种，包括吡虫啉、丙溴磷、啶虫脒、灭多威、噻虫嗪5种杀虫剂，苯醚甲环唑、多菌灵、氟硅唑、甲基硫菌灵、腈菌唑、戊唑醇、咪鲜胺、烯酰吗啉8种杀菌剂，其中苯醚甲环唑、多菌灵、啶虫脒、戊唑醇、吡虫啉和咪鲜胺的检出率较高。该检测结果与柿树病虫害防治研究的相关结果一致，苯醚甲环唑、多菌灵、咪鲜胺和戊唑醇均是柿树炭疽病防治过程中最常用和最有效的杀菌剂[4,18-19]，而啶虫脒和吡虫啉是两种新型广谱且高效的杀虫剂，对柿蒂虫、柿棉蚧、刺蛾等虫害具有良好的防治效果[4]。本研究结果在一定程度上反映了广西柿树在种植生长过程中为了防治炭疽病、角斑病、柿蒂虫、介壳虫等病虫害而广泛施用杀菌剂和杀虫剂，造成柿果中多种农药残留的风险。

3 结 论

本研究以广西创汇名品月柿为样本，以其种植过程中可能使用的187种农药化合物为分析对象，成功建立了同时检测月柿中187种农药残留的液相色谱-串联质谱法。该方法准确、快速、灵敏，适用于月柿中高通量农药残留检测和风险监测。