生脉散配方颗粒及加味方剂对急性缺氧大鼠相关生化指标的影响

张加雄，万 丽，王 张，杨沮勤，朱伊婷，陈英杰，夏媛媛

目前，预防急性高原病（AMS）的化学药物主要有碳酸酐酶抑制剂、钙离子通道阻滞剂、利尿剂、镇静催眠剂和糖皮质激素等，代表性药物分别有乙酰唑胺、硝苯地平、呋塞米、地西泮和地塞米松等；预防AMS的中药主要为补益类、活血化瘀类中药，代表性药物有红景天、生脉散、复方丹参制剂等。由于AMS涉及多器官、多组织的功能改变，疾病机理错综复杂，中医药因注重“整体观念”、“辨证论治”，相较于西医药物预防具有一定的优势。外环境的低氧低压、空气干燥是AMS的主要病因，AMS经中医辨证可归为“气阴虚”的范畴，因此，笔者选择中医治疗气阴虚的基本方“生脉散”为研究对象，对生脉散配方颗粒及其益气、活血的加味方剂益气生脉散（黄芪+生脉散）、活血生脉散（丹参+生脉散）配方颗粒进行抗急性缺氧方面的药效学比较研究，为合理运用生脉散类方剂预防AMS提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 主要试剂 生脉散配方颗粒（自制），红景天(四川省中药饮片有限责任公司），丹参配方颗粒、黄芪配方颗粒（四川新绿色药业科技发展股份有限公司）；大鼠 ALD、ANG-Ⅱ、ANP、EPO、NT-proBNP、Renin ELISA试剂盒，均由Abcam公司生产，北京永辉生物科技有限公司进口分装。

1.1.2 实验动物 SPF级SD大鼠，雌雄各半，体重180～220 g，购于成都达硕实验动物有限公司，生产许可证号SCXK（川）2015-030，饲养于成都中医药大学药学院实验动物观察室，实验前适应性饲养1 w。

1.1.3 主要设备 FLYDWC50-ⅡA低压氧舱（中航工业贵州风雷航空军械有限责任公司），Multlskan Mk3酶标仪（赛默飞世尔仪器有限公司）。

1.2 实验方法

1.2.1 动物分组与给药 取大鼠60只，雌雄各半，随机分成6组，每组10只，即空白组、模型组、红景天（HJT）组、生脉散（SMS）组、益气生脉散（YQSMS）组、活血生脉散（HXSMS）组。空白组、模型组均灌胃给予生理盐水（10 ml/kg），其余各组分别灌胃给予红景天水煎液（以原生药计，剂量为1 g/kg）、生脉散配方颗粒（以原生药计，剂量为4 g/kg）、益气生脉散配方颗粒（以原生药计，剂量为5 g/kg）、活血生脉散配方颗粒（以原生药计，剂量为5 g/kg），1次/d，连续7 d。

1.2.2 急性缺氧模型[1]连续给药7 d后，除空白组外，其余各组均置于模拟海拔5000 m的低压舱内，放置24 h，此期间正常供应饲料及水。

1.2.3 检测指标 完成造模后，将各组自低压氧舱取出，用10%水合氯醛腹腔注射（剂量为3 ml/kg），待大鼠失去意识后，取腹主动脉血液，离心，取上层血清，采用ELISA法检测血清促红细胞生成素（EPO）、心钠素（ANP）、N-脑钠钛（NT-proBNP）、肾素（Renin）、血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)、醛固酮(ALD)的含量。

1.3 统计学方法 应用SPSS18.0统计软件分析数据，计量资料以±s表示，组间比较采用方差分析和两两比较t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

与空白组比较，其他各组血清EPO、ANP、NT-proBNP、Renin、ANG-Ⅱ、ALD 含量均显著升高（P＜0.05或P＜0.01）。但与模型组比较，HJT组、SMS组、YQSMS 组 和 HXSMS 组 的 EPO、ANP、NT-proBNP、Renin、ANG-Ⅱ、ALD 含量均较低 （P＜0.05或P＜0.01）。比较而言，在SMS组、YQSMS组和HXSMS组中，HXSMS组的EPO和ANP含量最接近空白组，其次是YQSMS组；在NT-proBNP的变化上，以HXSMS组最低（P＜0.01），其他各组差异不大（P＞0.05）。 见表1。

3 讨论

ANP、NT-proBNP是反映心脏功能的重要生化标志物；肾素-血管紧张素-醛固酮系统（RASS）在维持体内水、电解质平衡和内环境稳定方面发挥着重要作用；高原缺氧环境会导致机体血浆EPO含量升高，进而导致红细胞增生，血液粘稠度增高。基于以上因素，本研究选择血清EPO、ANP、NT-proBNP、Renin、ANG-Ⅱ、ALD为急性缺氧的药效学研究指标。

红景天防治AMS疗效确切，目前已广泛应用于临床[2-3]，故本研究选择其为阳性对照药物。本研究结果显示，实验大鼠在暴露模拟海拔5000 m高原环境后， 血清 EPO、ANP、NT-proBNP、Renin、ANG-Ⅱ、ALD含量均明显升高，而生脉散配方颗粒及加味方剂能明显降低其含量，其中活血生脉散在降低急性缺氧大鼠血清EPO含量方面，较生脉散药理作用更强；在降低NT-proBNP含量方面，较生脉散、红景天药理作用均更强，这是否表明丹参与生脉散配伍，产生了药理协同作用，有待进一步研究。

表1各组急性缺氧相关生化指标比较（n=10）

查阅生脉散预防AMS的相关文献，虽偶见临床应用报道[4-6]，但在基础药理方面，研究还不够全面、深入。而本课题较全面地研究了生脉散及其加味方剂对模拟高原环境下急性缺氧大鼠生化指标的影响，为合理应用生脉散类方剂预防AMS提供了更充分的实验依据。