MIJ、HFJ近交系大鼠血液生化指标比较分析*

蔡月花 冯 旭 王俊霞 王 莉 刘树锋 卢鹤真 徐增年 刘军须 耿 琦

(河北医科大学实验动物学部，河北省实验动物重点实验室，石家庄 050017)

MIJ、HFJ近交系大鼠是河北医科大学刘军须、蔡月花等以本实验室饲养的一对Wistar 大鼠为基代，经10余年培育而成的近交系大鼠新品系[1-2]。现MIJ已繁殖至F19代，HFJ已至F24代。HFJ大鼠表现为较高繁殖能力，其胎次间隔、窝产仔数和离乳率等繁殖指标均高于封闭群Wistar大鼠，从而给品系维持、繁殖生产以及应用带来了极大的便利[2]。MIJ大鼠表现为群体内稳定出现雄性不育个体，不育个体睾丸下降延迟、生殖器官发育迟缓、精子生成减少等特征，与人类男性生殖障碍的隐睾、睾丸发育不全、少精等症状类似。因此，MIJ、HFJ近交系大鼠可作为生殖领域研究的良好动物模型[3-4]。

血液生化指标是实验动物的重要表型数据资料，在生命科学研究中应用广泛。为了探究MIJ、HFJ大鼠的表型特征，并以此为基础深入研究其高繁殖力、不育特性的机理，我们详细测定了其血液生化指标，以期为进一步研究及应用提供参考。

1 材料和方法

1.1 实验动物

4、8、12周龄雌、雄HFJ大鼠，每组20只，共120只；4、8、12周龄雌、雄性正常及雄性不育MIJ大鼠，每组20只，共180只。由河北医科大学实验动物学部提供，合格证号为：1609352。实验动物在屏障环境中饲养，相关环境指标按照国家标准(GB 14925—2001)《实验动物 环境及设施》执行；采用标准饲料饲喂，饮水采用超滤处理无菌水。实验动物使用许可证号：SYXK(冀)2013-0026。

1.2 主要仪器和试剂

采用南京特康-190 型全自动生化分析仪进行血液生化指标测定，试剂盒购自中生北控生物科技股份有限公司。

1.3 血液生化指标检测

采血前动物禁食12 h，自由饮水，用3%的戊巴比妥钠麻醉后，通过大鼠眼眶后静脉丛取血，以3 000 r/min离心15 min，分离出血清，用全自动生化仪检测，指标共15项，分别为：谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白(TP)、血清白蛋白(ALB)、血清球蛋白(GLO)、谷酰转肽酶(GGT)、肌酐(CRE)、血清尿素氮(BUN)、血糖(GLU)、尿酸(UA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)，计算得出AST/ALT，A/G。

1.4 统计方法

用SPSS(21)统计软件对各项指标进行数据统计，并进行t检验和方差分析。

2 结果

血液生化指标测定结果见表1～3。

2.1 HFJ雌性大鼠与MIJ雌性大鼠比较

4周龄HFJ雌性与MIJ雌性大鼠比较：ALT、ALP、GLO、BUN、UA、HDLC、LDLC差异有显著性；8周龄HFJ雌性与MIJ雌性大鼠比较：AST、AST/ALT、ALP、UA、TG、LDLC差异有显著性；12周龄HFJ雌性与MIJ雌性大鼠比较：ALT、AST/ALT、ALB、GLO、A/G、GGT、CRE、TC、LDLC差异有显著性。

2.2 HFJ雄性大鼠与MIJ雄性正常大鼠比较

4周龄HFJ雄性与MIJ雄性正常大鼠比较：HDLC、LDLC差异有显著性；8周龄HFJ雄性与MIJ雄性正常大鼠比较：ALT、AST/ALT、ALP、ALB、A/G、GLU、TC、HDLC、LDLC差异有显著性；12周龄HFJ雄性与MIJ雄性正常大鼠比较：AST、AST/ALT、ALP、TP、ALP、CRE、GLU、UA、TG、LDLC差异有显著性。

2.3 HFJ雄性大鼠与MIJ雄性不育大鼠比较

4周龄HFJ雄性与MIJ雄性不育大鼠比较：ALT、AST/ALT、TP、ALB、CRE、GLU、HDLC差异有显著性；8周龄HFJ雄性与MIJ雄性不育大鼠比较：ALT、A/G、GGT、GLU、TG、TC、HDLC差异有显著性；12周龄HFJ雄性与MIJ雄性不育大鼠比较：ALP、ALB、A/G、CRE、GLU、LDLC差异有显著性。

表1 4周龄HFJ 和MIJ 近交系大鼠血液生化指标比较Table 1 Comparability of serum biochemical parameters of HFJ and MIJ rat on four week

注：HFJ与同性别MIJ比较：#P<0.05，##P<0.01；不育雄鼠与HFJ雄鼠比较：★P<0.05，★★P<0.01；MIJ正常雄鼠与MIJ不育雄鼠比较：▲P<0.05，▲▲P<0.01；同品系不同性别比较：●P<0.05，●●P<0.01

Note: HFJ vs MIJ rats of the same sex:#P<0.05，##P<0.01; Infertile males vs HFJ males:★P<0.05，★★P<0.01; MIJ normal males vs MIJ infertile males:▲P<0.05，▲▲P<0.01；Compared with different sex of same strain:●P<0.05，●●P<0.01

表2 8周龄HFJ 和MIJ 近交系大鼠血液生化指标比较Table 2 Comparability of serum biochemical parameters of HFJ and MIJ rat on eight week

注：HFJ与同性别MIJ比较：#P<0.05，##P<0.01；不育雄鼠与HFJ雄鼠比较：★P<0.05，★★P<0.01；MIJ正常雄鼠与MIJ不育雄鼠比较：▲P<0.05，▲▲P<0.01；同品系不同性别比较：●P<0.05，●●P<0.01

Note: HFJ vs MIJ rats of the same sex:#P<0.05，##P<0.01; Infertile males vs HFJ males:★P<0.05，★★P<0.01; MIJ normal males vs MIJ infertile males:▲P<0.05，▲▲P<0.01；Compared with different sex of same strain:●P<0.05，●●P<0.01

表3 12周龄HFJ 和MIJ 近交系大鼠血液生化指标比较Table 3 Comparability of serum biochemical parameters of HFJ and MIJ rat on twelve week

注：HFJ与同性别MIJ比较：#P<0.05，##P<0.01；不育雄鼠与HFJ雄鼠比较：★P<0.05，★★P<0.01；MIJ正常雄鼠与MIJ不育雄鼠比较：▲P<0.05，▲▲P<0.01；同品系不同性别比较：●P<0.05，●●P<0.01

Note: HFJ vs MIJ rats of the same sex:#P<0.05，##P<0.01; Infertile males vs HFJ males:★P<0.05，★★P<0.01; MIJ normal males vs MIJ infertile males:▲P<0.05，▲▲P<0.01；Compared with different sex of same strain:●P<0.05，●●P<0.01

2.4 MIJ雄性正常与MIJ雄性不育比较

4周龄MIJ雄性正常与MIJ雄性不育比较：AST/ALT、ALB、CRE、GLU差异有显著性；8周龄MIJ雄性正常与MIJ雄性不育比较：AST/ALT、GGT、TG、HDLC、LDLC差异有显著性；12周龄MIJ雄性正常与MIJ雄性不育比较：ALP、GLU、TC差异有显著性。

2.5 不同性别的HFJ近交系大鼠比较

4周龄HFJ近交系大鼠雌雄比较：ALP、TP、GLU、HDLC差异有显著性；8周龄HFJ近交系大鼠雌雄比较：ALP、BUN差异有显著性；12周龄HFJ近交系大鼠雌雄比较：ALT、AST、ALP、GGT、UA、TC、LDLC差异有显著性。HFJ雄性大鼠的ALP指标测定值在三个时间点始终高于HFJ雌性大鼠。

2.6 不同性别的MIJ近交系大鼠比较

4周龄MIJ近交系大鼠雌雄比较：UA差异有显著性；8周龄MIJ近交系大鼠雌雄比较：ALT、AST/ALT、ALP、ALB、GLU差异有显著性；12周龄MIJ近交系大鼠雌雄比较：TP、GLO、A/G、GGT、GLU、UA差异有显著性。

3 讨论

血液生化指标是反映动物健康与否的重要而敏感的指标，是动物机体新陈代谢和生化反应的标志，也是动物实验中重要的基础数据。根据血液生化指标的改变以及改变程度与处理剂量的关系，可以反映实验处理导致动物病变的性质[5]。ALT、AST是反映肝脏功能的重要指标，AST/ALT可以反映肝细胞的受损情况。血清中ALP的测定主要用于肝胆系统及骨骼系统疾病的诊断，ALP升高表示胆汁淤积造成的肝脏疾病。TP升高表示肾脏疾病、严重的渗出性皮肤病、肠道疾病、肠道肿瘤，降低表示肠道吸收不良、营养不良、免疫不全性疾病、胰腺外分泌不足。ALB升高表示严重的脱水，降低表示饥饿、寄生虫病、慢性吸收不良、慢性肝脏疾病、肠道发炎、肾脏感染。GLO升高表示慢性炎症、寄生虫病、肿瘤、自体免疫性疾病。GGT存在于肾、胰、肝、脾、肠、脑、肺、骨骼肌和心肌等组织中，在肝内主要存在于细胞浆和肝内胆管上皮中。CRE与BUN是衡量肾功能的指标。GLU对于诊断以及指导治疗糖尿病具有重要意义。UA是嘌呤代谢的终产物，浓度升高多见于痛风，核酸代谢增强的疾病，如白血病、多发性骨髓瘤、红细胞增多症、溶血性贫血、恶性贫血治疗期等，肾功能受损的疾病UA值也增高。TG和TC是衡量血液中血脂水平的指标。HDLC在血清中含量相对稳定，可作为动脉粥样硬化的危险指标，减低见于冠心病、肝病等。LDLC与心血管疾病的发病率和病变程度呈负相关，被称为抗动脉粥样硬化的保护因子，增高是导致冠心病、心肌梗死、动脉粥样硬化的危险因素之一，降低见于糖尿病、慢性肝病、肝硬化等[6-7]。

实验动物血液生化指标的测定已有很多文献报道，其结果受到动物、仪器、试剂、实验操作等多种因素的影响[8-9]。为了得到更为客观的指标测定结果，本实验采集了较多的样本数，每组20只，符合中国实验动物生物学特性数据库的要求。并采集4、8、12周龄动物，以观察日龄对血液学指标的影响。品系品种方面，测定HFJ、MIJ大鼠，可消除仪器、试剂等因素带来的结果差异，起到相互参照的作用。因此，本实验取得的结果更为可信和客观。

本实验测定了HFJ和MIJ 大鼠4周龄、8周龄和12周龄的血液生化指标数据，对于进一步了解HFJ、MIJ大鼠生物学特征提供了重要的参考依据。结果发现，在HFJ和MIJ大鼠之间、MIJ雄性正常和MIJ雄性不育之间以及同品系的不同性别大鼠之间，均有多项指标存在显著差异。同时，在这些血液生化指标中，没有观察到特殊高或低的血液生化指标结果。即使MIJ雄性不育大鼠组的结果也同样如此，因此，在血液生化指标方面，HFJ、MIJ大鼠没有缺陷指标出现。