在微柱凝胶血小板血型配型实验中红细胞血型不规则抗体的影响因素观察及处理措施

吴玉敏，赵志红

(郑州大学附属洛阳市中心医院输血科，河南 郑州 471000)

不规则抗体是临床输血过程中发生率较高，是由于患者输血治疗过程中血清中含外抗－A、抗－B外的其他抗体，治疗前如果未能发现，将会造成溶血性反应，增加输血风险。因此，临床上对于需要输血治疗患者必须进行输血前不规则抗体筛选[1]。常规筛查方法以聚凝胺法为主，该测定方法虽然能筛选出不规则抗体，但是筛查方法相对复杂，影响因素较多，难以提高输血安全[2]。微柱凝胶技术（MGT）也是血小板血型配型实验中红细胞血型不规则抗体筛查中常用方法，能完成血液中不规则抗体的筛选，有助于提高输血安全性[3]。因此，加强微柱凝胶血小板血型配型实验中红细胞血型不规则抗体的影响因素及处理措施对降低治疗风险、提高预后具有重要的意义[4，5]。本课题以2014年6月－2017年7月自愿到医院进行治疗的输血治疗患者473例作为研究对象，探讨微柱凝胶血小板血型配型实验中红细胞血型不规则抗体的影响因素及处理措施，报道如下。

1 资料与方法

1．1 临床资料 选择2014年6月－2017年7月自愿到医院进行治疗的输血治疗患者473例作为研究对象，男 281 例，女 192 例，年龄（5～94）岁，平均（48．51±8．86）岁。患者中，再生障碍性贫血 279 例，急性单核细胞白血病89例，血小板减少性紫癜105例。本课题均得到医院伦理委员会批准，且患者自愿签署输血相关条约

1．2 纳入及排除标准 纳入标准：⑴符合输血治疗适应证者[6]；⑵输血前均完成血小板血型配型、红细胞血型不规则抗体筛选；⑶能严格遵循医嘱完成相关检查、治疗。排除标准：⑴不符合输血治疗或存在输血风险者。⑵合并严重肝、肾功能异常或存在明显的精神异常者；⑶资料不全或治疗后无法根据实验要求完成随访。

1．3 仪器与试剂 本课题所需仪器、试剂包括：微柱凝胶试剂卡（北京中山金桥）、专用离心机和孵育器（福州迈新）、筛选细胞仪和鉴定谱细胞（上海血液生物）、聚凝胺试剂卡（福州迈新）、数字显示式恒温水浴箱（上海一恒）、全自动血库系统（深圳爱康Metis 200）等。

1．4 方法 输血前分别采用微柱凝胶法和聚凝胺法对患者红细胞血型不规则抗体进行测定；通过血小板血型配型实验中红细胞血型不规则抗体影响因素进行多因素Logistic回归分析。⑴红细胞血型不规则抗体筛选。筛选前尽可能将干胶、气泡等排除，选择合格的试剂卡，将选定好的试剂卡放于18℃～25℃下，采用专用离心机对标本进行5min离心，速度为1900rpm。对于需要输血治疗患者输血前空腹下采集静脉血2ml，提取压积红细胞10μl、红细胞稀释液1．2ml，混合均匀后向微柱孔中加入50μl和25μl混合悬液，然后放置在专用孵育器中进行15min孵育，孵育完毕后利用专用离心机完成 10min 离心，速度为 9000rpm[7，8]。⑵判读方法。阴性：红细胞沉在微柱底部，滞留在中、上部为阳性。⑶影响因素分析。通过血小板血型配型实验中红细胞血型不规则抗体影响因素（包括：性别、输血史及妊娠史等）进行多因素Logistic回归分析[9]。

1．5 统计分析 采用SPSS 18．0软件处理， 计数资料行χ2检验，采用n（%）表示，计量资料行t检验，采用（±s）表示，P＜0．05 差异有统计学意义。

2 结果

2．1 微柱凝胶法和聚凝胺法不规则抗体筛选率比较 微柱凝胶法血小板血型配型实验中红细胞血型不规则抗体筛选率为4．86%，高于聚凝胺法3．17%（P＜0．05），见表 2。

表2 微柱凝胶法和聚凝胺法不规则抗体筛选率比较

2．2 微柱凝胶法和聚凝胺法不规则抗体阳性构成比较 微柱凝胶法和聚凝胺法不规则抗体抗c、抗－Mur、抗－M、抗－N、抗－JKb、抗－P1 及自身抗体比较差异无统计学意义 （P＞0．05）； 微柱凝胶法抗－D、抗－E、抗 Ec、抗－Lea、抗－Leb、冷抗体，均高于聚凝胺法（P＜0．05），见表 3。

2．3 微柱凝胶法检测红细胞血型不规则抗体影响单因素分析 单因素结果显示：微柱凝胶法检测红细胞血型不规则抗体与性别、输血史及妊娠史关系密切（P＜0．05），见表 4。

2．4 微柱凝胶法检测红细胞血型不规则抗体影响多因素Logistic回归分析 多因素Logistic回归分析显示：微柱凝胶法检测红细胞血型不规则抗体与性别、输血史及妊娠史关系密切（P＜0．05），见表5。

3 讨论

输血是临床上常用的抢救、治疗危急重症患者的治疗方法，临床上如何提高输血安全性，降低输血不良反应发生率成为研究的热点。文献报道显示：交叉配血是提高输血安全性的重要方法[10]。目前，临床上使用的配血方法相对较多，但是不同方法各有优缺点，筛选准确度受到的影响因素较多。根据国家规定：对于伴有输血史、妊娠史或短时间内需要进行多次输血者必须进行不规则抗体筛查[11]。常用筛查方法以聚凝胺法为主，该方法虽然能实现输血前不规则抗体的筛查，但是诊断敏感度、特异度相对较低，导致患者预后较差[12]。

表3 微柱凝胶法和聚凝胺法不规则抗体阳性构成比较[n（%）]

表4 微柱凝胶法检测红细胞血型不规则抗体影响单因素分析（n=23）

表5 微柱凝胶法检测红细胞血型不规则抗体影响多因素Logistic回归分析

近年来，聚凝胺法在血小板血型配型实验中红细胞血型不规则抗体中得到应用，且效果理想[13]。本研究中，微柱凝胶法血小板血型配型实验中红细胞血型不规则抗体筛选率为4．86%，高于聚凝胺法 3．17%（P＜0．05）。 由此看出：将微柱凝胶法用于输血前不规则抗体筛查中有助于提高筛查率，有助于指导临床治疗。微柱凝胶法完成不规则抗体筛选时主要根据红细胞抗原与测定抗体聚集反应判断，当二者反应后将会造成红细胞阻滞在凝胶中[14]。而对于未见不规则抗体的红细胞则会沉淀在微柱的底部。因此，通过观察红细胞的位置能判断血液中是否存在不规则抗体[15]。本结果中，微柱凝胶法和聚凝胺法不规则抗体抗c、抗－Mur、抗－M、抗－N、抗－JKb、抗－P1及自身抗体比较差异无统计学意义 （P＞0．05）； 微柱凝胶法抗－D、 抗－E、抗Ec、抗－Lea、抗－Leb、冷抗体，均高于聚凝胺法（P＜0．05）。提示：利用微柱凝胶法有助于提高不规则抗体筛查率。文献报道显示：微柱凝胶技术是在抗人蛋白试验基础上演变而来的新型的筛选方法，在交叉配血、不规则抗体的筛查及血型的鉴定中均发挥了重要的作用。数据报道显示：微柱凝胶法在红细胞不规则抗体检测中灵敏度较高、特异性强，并且该筛选方法操作相对简单，临床漏诊率、误诊率仅为 0．01%－0．1%。

文献报道显示[16]：血小板血型配型实验中红细胞血型不规则抗体的数量、质量受到的影响因素较多，与B细胞、T细胞等存在紧密的联系。当机体受到抗原刺激后，将会使得B细胞发生增殖、分化为记忆细胞。因此，临床上，将微柱凝胶法用于血小板血型配型实验中红细胞血型不规则抗体筛选中受到的影响因素相对较多，不同影响因素之间相互作用，影响筛选结果。本结果中，单因素及多因素Logistic回归分析显示：微柱凝胶法检测红细胞血型不规则抗体与性别、输血史及妊娠史关系密切（P＜0．05）。为了提高微柱凝胶法筛查血小板血型配型实验中红细胞血型不规则抗体效果，临床上应采取有效的措施进行干预处理。输血前应加强输血前宣传教育，告知患者输血治疗的目的、治疗过程中的注意事项，让患者对输血治疗有一个全面的认识和了解。同时，不规则抗体筛选阳性者，则应该进一步明确不规则抗体的性质，在相关医师指导下制定相应的方案，提高输血安全性，最大限度降低输血并发症发生率。输血过程中应密切观察患者生命体征，对于出现异常患者应立即停止输血，促进患者早期恢复[17]。

综上所述，将微柱凝胶法用于血小板血型配型实验中红细胞血型不规则抗体中效果理想，能消除假阳性反应。但是，微柱凝胶法红细胞血型不规则抗体测定中影响因素较多，应采取有效的方法进行处理干预，提高输血安全性。