国产和进口ELISA试剂HIV初筛结果与确证结果对比分析

李敏，韩晓燕，朱建民

(渭南市中心血站，陕西 渭南714000)

近年来HIV感染人数呈逐年上升趋势，艾滋病的传播已由高危人群向一般人群扩散[1]，WHO研究结果表明全球约有十分之一的HIV感染者由血液传播感染[2]。HIV感染已是一个全球性的公共问题和社会问题。目前随着我国对艾滋病宣传力度的不断加大，越来越多的人群对艾滋病的传播途径及高危行为等更为了解，部分有高危行为者想利用无偿献血这一方式来确认是否感染上HIV[3]，因此减少HIV输血传播是控制HIV扩散的重要途径之一。本研究通过对渭南市138253例无偿献血者的HIV抗原、抗体国产和进口两种试剂的初筛结果进行分析，阐明国产和进口试剂与确证结果之间的关系，为核酸开展后ELISA方法检测HIV该采取何种策略以便最大程度的保证临床用血安全提供有力的证据，现将检测结果报告如下：

1 材料与方法

1．1 材料来源 2013年1月至2016年12月渭南市无偿献血者138253例，年龄18～55周岁，健康情况均符合《献血者健康检查要求》GB/18467。

1．2 仪器与试剂

1．2．1 检测试剂 国产试剂生产厂家为北京万泰，进口试剂生产厂家为美国伯乐，两者均为第四代人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒。

1．2．2 室内质控 国产和进口试剂采用的质控品浓度分别为：0．5NCU/ml和4NCU/ml所用质控品均来自康彻斯坦。

1．2．3 仪器 TECAN EVO/150全自动加样仪（瑞士帝肯公司），FAME24/20全自动酶免分析仪 （瑞士哈美顿公司）。

1．3 检测方法 采用ELISA方法对无偿献血者血液标本由不同人员用国产和进口2种试剂进行抗－HIV检测，并严格按照试剂盒说明书和标准操作规程文件实行，所用试剂及质控品均为中国食品药品生物鉴定所批批检合格，并在有效期内使用。单试剂有反应性标本用原试剂做双孔复查；复查结果至少一孔有反应性和双试剂有反应性标本均判读为抗－HIV初筛有反应性，并送渭南市疾控中心（CDC）进行确认。

1．4 统计学方法 采用SPSS 19．0统计软件进行数据处理，计数资料采用 χ2检验，P＜0．05为差异有统计学意义。

2 结果

2．1 国产和进口试剂HIV初筛结果及确证情况。国产试剂与进口试剂的确证阳性率比较差异没有统计学意义：χ2=3．54，P＞0．05。

2．2 HIV初筛双试剂有反应性标本的确证情况。

2．3 42例CDC确证阳性标本的2种试剂检测结果分布。

2．4 100例初筛有反应性标本S/CO值分布及确证情况。

3 讨论

由表1可知，国产和进口试剂的抗－HIV初筛有反应性率分别为0．056%和0．044%，差异没有统计学意义（χ2=2．11，P＞0．05），国产和进口试剂抗－HIV初筛有反应性标本的确证阳性率分别为0．028%和0．029%，即两种试剂的假阳性率分别为0．027%和 0．014%，差异没有统计学意义（χ2=3．54，P＞0．05。 ），这和何江才[4]、李菳玲[5]、蒋丽娟[6]等人的结果分析一致。随着国产试剂制备水平的提高，从灵敏度和特异性等方面比较，国产第四代HIV试剂与进口试剂具有较高的一致性[7]，有些甚至超过进口试剂[8]。虽然目前国产和进口HIV检测试剂都是提高了敏感度和特异性的第四代试剂，但依然存在着较高的假阳性，分析原因可能有：（一）：EDTA－K2抗凝剂的浓度对血液标本抗－HIV检测有影响[9]，可引起假阳性结果；（二）ELISA检测的影响因素比较多，人体中的一些RF因子，补体等，都有可能会产生假阳性；（三）初筛试剂采用的是ELISA方法，而确证实验采用的是WB法，其检测原理不同，结果存在差异。

表2中，37例国产和进口双试剂抗－HIV有反应性标本的确证结果均为阳性，双试剂有反应性的确证阳性率为100%，说明2种试剂联合检测可提高初筛与确证结果的符合率，有助于提高对HIV感染判断的准确度。

表3的数据显示，国产和进口试剂均存在不同程度的漏检，所以双试剂检测可以一定程度的减少血清学方法的漏检情况。

表1 国产和进口试剂HIV初筛及确证结果

表2 37例双试剂有反应性标本的确证结果

表3 42例确证阳性标本的HIV两种试剂检测结果分布

表4 100例初筛有反应性标本S/CO值及确证结果

表4不同的S/CO分组中，国产试剂有反应性标本的阳性确证率之间差异有统计学意义 （χ2=64．28，P＜0．01），进口试剂有反应性标本的阳性确证率之间差异有统计学意义（χ2=39．59，P＜0．01），说明 S/CO值越高，预示着HIV抗体确认阳性的可能性较大。这与周普辉[10]，杨育红[11]，李向国[12]等人的结果分析相似。在1≤S/CO＜2组中，国产试剂的阳性确证率为零，说明在该分组中国产试剂有较高的假阳性率，可能原因为国产试剂为了减少漏检，提高该试剂的灵敏度，产生较高的假阳性；S/CO≥10分组中国产和进口试剂有反应性标本经确证均为阳性，说明在S/CO≥10时国产和进口试剂的阳性符合率相同。

本站自2015年底实现核酸检测全覆盖，虽然核酸检测有缩短窗口期的特点，但是抗原抗体具备在外周血中持续存在时间较长的特点，ELISA对变异及亚型的检出概率与NAT对突变及基因型在检测概率上相互补充，ELISA检测对确保用血安全仍有相当重要的意义[13]，所以说在新型检测技术普及的同时，仍需高度重视ELISA检测。基于本研究中国产和进口试剂的特异性和灵敏度没有显著性差异，且双试剂检测可提高确证阳性的符合率这一情况，笔者认为若是采用两遍ELISA检测一遍核酸检测的模式，可考虑用灵敏度和特异性均较好或有互补性的两种不同生产厂家的国产试剂，这样既可以节约成本，又可以防止漏检。

目前ELISA检测不能避免的假阳性情况，笔者认为可以建立相应策略：⑴加强献血前咨询和筛查工作，提高工作人员排查高危献血者的能力[14]；⑵充分利用室内质控和室间质评的监督作用，根据它们的检测情况及时优化实验流程，做好关键控制点的监测工作；⑶加强实验室人员责任心的同时，可选用灵敏度与特异性指标均较好的ELISA试剂来筛查HIV抗体，在尽可能检出所有阳性标本的同时也要尽量减少因假阳性而导致的血源流失[15]。总之，所有的努力均为一个目标－避免HIV感染者“窗口期”漏检，降低输血传播HIV的残余风险，最大程度的保证临床用血安全。