不同年龄发病的重性抑郁障碍患者髓鞘相关糖蛋白表达水平的差异

吴枫，孔令韬，孙嘉泽，汤艳清，2

（中国医科大学附属第一医院 1.精神医学科； 2.老年医学科，沈阳 110001）

不同年龄发病的重性抑郁障碍 （major depressive disorder，MDD） 患者显现出不同的临床症状、疾病严重程度及病程特征［1-2］。遗传学研究发现，早发抑郁症 （≤25岁） 与晚发抑郁症 （＞25岁） 的遗传易感性受不同的因素影响［3］。还有很多神经生物学研究［4］显示，早发抑郁症和晚发抑郁症的神经生理学机制不同。这些都提示，早发抑郁症和晚发抑郁症存在不同的病因和病理生理学机制。解剖学研究发现，抑郁症患者存在髓鞘损伤，提示髓鞘受损在白质纤维断裂和轴突损伤中具有重要影响［5］。髓鞘相关糖蛋白 （myelin-associated glycoprotein，MAG） 主要位于中枢神经系统髓鞘节间部的轴突外周细胞膜上［6-7］，其主要功能在青少年和成年早期是稳定和维持神经元轴突的结构，其适度表达与髓鞘的形成有关［8］。相反，MAG也抑制成年人髓鞘和轴突的生长［9］。目前，对MDD患者中MAG的研究还较少。本研究检测了首次发作未用药的抑郁症患者中血浆MAG浓度，并按照年龄进行分组，分析不同年龄的抑郁症患者MAG的差异。

1 材料与方法

1.1 研究对象

收集在中国医科大学附属第一医院精神医学科门诊就诊的MDD患者93例 （13～25岁57例，26～45岁36例） 。所有青少年抑郁症患者均经2名副高级精神科医生使用学龄期儿童情感疾病和精神分裂症诊断定式问卷诊断，所有成人患者均经2名副高级精神科医生使用美国精神疾病诊断与统计手册第4版 （Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders，Fourth Edition，DSM-Ⅳ） 结构化临床定式问卷诊断。MDD组的纳入标准：首次发作，17项汉密尔顿抑郁量表 （Hamilton Depression Rating Scale-17 item，HAMD-17） ＞17分，未合并DSM-Ⅳ其他轴Ⅰ或轴Ⅱ诊断。MDD组的排除标准：有环性心境障碍和双相障碍家族史的患者；经过精神药物治疗、电休克治疗或心理治疗的患者。

按照性别、年龄、教育程度相匹配原则，纳入健康对照者 （healthy control，HC） 87例 （13～25岁48例，26～39岁39例） 。HC组的纳入标准：无DSM-Ⅳ轴Ⅰ或轴Ⅱ疾病，HAMD-17≤7 分，入组前1个月未服用过任何药物。HC组的排除标准：重大躯体疾病史；一级亲属患有精神疾病或有精神疾病史。

本研究经中国医科大学伦理委员会批准，且所有研究对象均在研究前被详细告知研究的目的、方法及参加研究的可能风险，所有研究对象均自愿参加本研究并签署知情同意书。

1.2 方法

依据标准操作流程采集血浆。所有全血样本进行EDTA抗凝处理，采集30 min内在8 ℃以2 000 r/min离心10 min，取血浆后储存于-80 ℃以进行分析。使用美国Bio Trust Specualty Zeal公司的人MAG ELISA试剂盒进行MAG血浆浓度的检测。开始测定程序前制备所有标准品，所有标准品和样品均一式两份添加到微量滴定板上。分别设空白孔，加50 µL标准品或样品到预涂好抗体的微量滴定板的孔中，轻轻混匀。在37 ℃下孵育45 min配制液体。将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。取出液体，甩干，每孔加洗涤缓冲液，30 s后取出，重复4次。所有孔加入稀释的生物素标记的抗IgG 50 µL，37 ℃孵育30 min，再次洗涤。然后加入链霉亲和素-HRP 50 µL，轻轻混匀，37 ℃孵育15 min，洗涤。每孔加入显色剂A 50 µL再加入显色剂B 50 µL，37 ℃孵育15 min。每孔加入终止液50 µL，停止反应。取空白孔作为零点，加入终止液后在15 min内测量450 nm处的光密度。

平均每个标准对照和样品的重复读数，减去平均零标准光密度。通过绘制y轴上每个标准的平均吸光度与x轴上浓度绘制标准曲线，并通过图上的点绘制最佳拟合曲线。

1.3 统计学分析

采用双样本t检验比较MDD组和HC组的年龄、HAMD-17评分和MAG浓度。进一步分析中考虑到年龄的影响，将受试者按年龄和诊断分为4组：MDD年龄较小 （younger MDD，yMDD） 组 （13～25岁） 和MDD年龄较大 （older MDD，oMDD） 组 （26～45岁） ；HC年龄较小 （younger HC，yHC） 组 （13～25岁） 和HC年龄较大 （older HC，oHC） 组 （26～45岁） 。采用t检验和双因素方差分析比较组间MAG浓度的差异。P ＜ 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般资料分析

MDD组和HC组在年龄方面无统计学差异。MDD组的HAMD-17评分显著高于HC组 （P ＜ 0.05） ，提示MDD组具有更高的抑郁水平。见表1。

2.2 不同年龄发病MDD组和HC组血MAG水平的比较

MDD组血浆MAG浓度显著高于HC组 （P ＜ 0.05） 。4组间比较，不同年龄的MDD组和HC组间MAG的差异有统计学意义 （F = 4.834，P ＜ 0.05） 。组间两两比较结果显示，yMDD组MAG浓度显著高于yHC组 （P ＜0.05） ，oMDD组MAG浓度显著高于oHC组 （P ＜ 0.05），yHC组MAG浓度显著低于oHC组 （P ＜ 0.05） ，而yMDD组MAG浓度显著高于oMDD组 （P ＜ 0.05） 。见表1。

表1 4组间一般资料和血MAG浓度的比较Tab.1 Clinical data of and MAG concentration of subjects in 4 groups

3 讨论

本研究发现MDD组的血浆MAG浓度高于HC组，且HC组中MAG浓度呈随年龄增加趋势，而MDD组则相反。本研究采用划分不同年龄对MDD和HC的MAG血浆浓度进行比较研究，目前国内外未见相关报道。本研究提示，早发抑郁和晚发抑郁的发病机制可能与MAG浓度在不同年龄的差异相关。

中枢神经系统中，MAG在早期髓鞘的近轴层中由少突胶质细胞表达，并且持续稳定胶质-轴突相互作用，以维持神经元轴突的结构和髓鞘的形成，MAG在成年期被认为是限制神经突生长的第一个髓鞘相关蛋白［7］。中枢神经系统中的MAG大部分释放到脑脊液，小部分透过血脑屏障释放入血。当中枢神经系统受损时，中枢神经系统MAG含量的变化透过血脑屏障使血浆MAG含量发生改变，测定血浆MAG含量可以及时反映中枢神经系统MAG的变化。MAG在MDD中的研究很少。尸检研究表明，MAG表达在BA 21中下调［10］或在MDD患者的皮质下区域中没有异常［11］。在活体研究中，SZABOLCS等［12］发现，在认知行为心理治疗前后，MAG是MDD的一种分子情绪特征。本研究发现，MDD中MAG水平高于HC，这与近期研究［13］相符。在青少年和成人早期，MAG与髓鞘化密切相关，更高的MAG可能意味着轴突和髓鞘异常发育，过高的MAG表达可能带来过度的髓鞘化，导致青少年抑郁患者情绪不稳定。成年过程是伴随着轴突剪枝的过程，而成年后期更高的MAG可能表明其过度抑制MDD中髓鞘和轴突，剪枝过度，导致患者出现抑郁症状。本研究首次发现MDD血浆中MAG含量增加，可能与MDD不同年龄段的轴突和髓鞘生长有关。

综上所述，首次发作、未用药的抑郁症患者中，异常的MAG可能是影响MDD患者发病的重要因素，且在不同年龄段呈现不同的病理生理机制。这一机制的进一步阐明，需要应用多种方法，如脑功能影像学、遗传学以及临床心理学联合研究。