乙型肝炎肝硬化患者肝功能分级与过敏毒素C3a水平的相关性

谢亮 王姝 严德辉 雷俊阳

川北医学院附属医院 1肝胆外科，2泌尿外科（四川南充 637000）

肝硬化是一种常见的慢性、进行性、弥漫性肝病，是慢性肝损伤后的一种损伤修复反应，是肝脏内的细胞外基质累积以及活化的肝星状细胞过度增生的结果［1-2］。乙型肝炎肝硬化是我国肝硬化最常见的类型［3-4］。肝硬化术前必须评价肝脏储备功能，目前最广泛应用的是肝功能Child⁃Pugh分级法，但其所包含5项指标并不能全面反映肝脏储备能力及整体情况，并且受“腹水”和“肝性脑病”参数主观评估的影响而显得并不完全准确，亟待新的客观评价指标加以完善［5］。血清补体主要在肝脏合成，肝硬化时，肝细胞破坏而导致血清补体水平下降，尤其是C3水平的下降［6］。C3a也称为过敏毒素，其浓度与C3浓度呈高度正相关，但其在血液中的稳定性优于C3，检测C3a浓度可以直接方便地反映血清补体的水平［7］。现通过研究乙型肝炎肝硬化患者肝功能分级与过敏毒素C3a水平的相关性，并绘制ROC曲线测定界值，来探索过敏毒素C3a在乙型肝炎肝硬化严重程度评价及术前风险评估中的临床意义。

1 对象及方法

1.1 研究对象 纳入2016年2月至2017年8月在川北医学院附属医院拟行门体静脉断流术或分流术的乙型肝炎肝硬化失代偿期患者195例，已排除曾有肝脏及脾脏手术史、有酒精性肝炎或者酗酒史、有其他肝脏疾病病史的患者。另门诊取20例乙肝病毒携带者作为对照组。本课题已经本院医学伦理委员会批准，所有纳入对象知情同意参加此项研究。

1.2 实验方法

1.2.1 检查指标 所有纳入患者及对照组均检查记录了血液过敏毒素C3a值、总胆红素值、白蛋白值、凝血酶原时间及腹水与肝性脑病情况；C3a值使用美国GBD公司C3a ELISA试剂盒行双抗体夹心法ELISA测定。

1.2.2 肝硬化患者肝功能分级标准 肝功能分级采用Child⁃Pugh改良分级法［5］。通过测定患者的总胆红素值、白蛋白值、凝血酶原时间及腹水与肝性脑病情况来计算其肝功能分级，其中A级5～6分，肝功能较好；B级7～9分，肝功能中等；C级10～15分，肝功能损害严重。

1.3 统计学方法 采用SPSS 17.0进行统计学分析。将纳入患者按肝功能分级分为A级、B级、C级3组，LSD法比较各组及对照组中C3a的差异。将血液中C3a浓度值与肝功能分级评分行Pearson相关分析，并绘制ROC曲线判断C3a水平用于诊断乙肝肝硬化患者肝功能受损程度的价值。

2 结果

2.1 研究对象一般情况 195例乙型肝炎肝硬化患者年龄31～64岁，平均45岁；男106例（54.4%），女89例（45.6%）；肝功能分级：A级组69例（35.4%）、B级组75例（38.4%）、C级组51例（26.2%）。对照组20例，年龄26～61岁，平均43岁；男11例（55.0%），女9例（45.0%）。病例组与对照组的性别及年龄差异均无统计学意义（P＞0.05）。

2.2 乙型肝炎肝硬化患者及对照组中C3a的差异 乙型肝炎肝硬化患者及肝功能分级各组、对照组C3a浓度值见表1。行LSD法对比发现：肝功能C级组C3a水平较B级组降低（P＜0.01）；两组均较肝功能A级组及对照组降低（均P＜0.01）；肝功能A级组与对照组C3a水平差异无统计学意义（P＞0.05）。肝功能受损程度越重，乙型肝炎肝硬化患者血液中C3a浓度越低；但肝功能轻度受损的乙型肝炎肝硬化患者血液中C3a浓度较乙肝病毒携带者未见明显降低。

2.3 血液中C3a浓度用于诊断乙型肝炎肝硬化患者肝功能受损程度的价值 Pearson相关分析显示：血液中C3a浓度与患者肝功能Child⁃Pugh改良分级法评分呈负相关（r=-0.649，P＜0.01）；提示肝功能评分越高，血液中C3a浓度越低。根据肝功能A级组与B级组ROC曲线（图1）得知，如果其界值为411.5 ng/mL时，则其灵敏度为0.804，特异度为0.547，Youden指数为0.351。根据肝功能B级组与C级组ROC曲线（图2）得知，如果其界值为342.6 ng/mL，则其灵敏度为0.787，特异度为0.493，Youden指数为0.279。

表1 全部病例及肝功能分级各组、对照组C3a浓度值Tab.1 C3a value in all cases（Group A，B，C）and control group ±s,ng/mL

表1 全部病例及肝功能分级各组、对照组C3a浓度值Tab.1 C3a value in all cases（Group A，B，C）and control group ±s,ng/mL

组别A级组B级组C级组全部病例对照组例数51 75 69 215 20 C3a 515.29±142.85 410.73±111.08 351.08±119.92 416.96±138.22 489.01±68.71

图1 肝功能A级组与B级组ROC曲线Fig.1 The ROC curve of Child⁃Pugh group A and group B

图2 肝功能B级组与C级组ROC曲线Fig.2 The ROC curve of Child⁃Pugh group B and group C

3 讨论

肝脏作为一种免疫器官已得到越来越多的重视，研究免疫学指标在肝脏疾病中的意义也显得更加重要。补体是机体非特异性免疫的重要体液因素，人体内肝细胞和巨噬细胞是补体的主要产生细胞［8］。补体C3是激活补体系统两条途径的共同终末通路，主要在肝脏内合成；肝脏功能与补体C3血液浓度水平关系密切，在乙型肝炎肝硬化患者中，随着肝功能不断恶化，肝脏细胞合成补体能力下降，血液中补体C3水平可能降低［6］。补体系统激活后C3裂解产生过敏毒素C3a，其具有增加血管通透性、免疫抑制、收缩平滑肌等作用［9-10］。过敏毒素C3a在血液中的稳定性较好，易于测量，是衡量血液补体水平的良好指标。

本研究发现，肝功能C级组C3a水平较B级组降低（P＜0.01）；两组均较肝功能A级组及对照组降低（均P＜0.01）。肝功能受损程度越重，患者血液C3a水平越低。乙型肝炎肝硬化的发生是由于乙型肝炎病毒在肝内复制繁殖，引起淋巴细胞浸润，释放大量炎性介质和细胞因子，在清除病毒的同时，又使肝细胞变形坏死，如此反复，肝小叶中出现纤维隔和再生结节，形成假小叶，发生肝硬化。随着肝硬化的加重，假小叶中会发生肝细胞脂肪变形、肝细胞坏死、淤胆、肝细胞不典型增生等，进一步导致患者血液胆红素升高、白蛋白合成能力下降、凝血功能下降，肝功能恶化，肝功能Child⁃Pugh分级评分升高；同时肝细胞的坏死也会影响肝脏合成补体C3的能力，导致血液中C3及C3a浓度的下降。研究［11-13］表明，补体的激活参与了肝脏的再生与修复过程，而肝硬化后血液补体水平的不断下降，也降低了肝脏的再生与修复能力，阻碍了肝脏的受损后自我修复，使肝功能进一步恶化，形成恶性循环。

国外最新研究提示：Child Pugh C期肝硬化患者血液中C3水平显著低于Child Pugh B期肝硬化患者［14］，这也进一步佐证了本研究的结论：乙型肝炎肝硬化患者肝功能评分越高，血液中C3a浓度越低。说明肝功能的严重损伤影响了补体在肝细胞中的合成，导致血液中补体成分下降。本研究发现：若分别以血液中C3a浓度411.5、342.6 ng/mL为界值来界定乙型肝炎肝硬化患者肝功能Child⁃Pugh A/B级、B/C级，灵敏度较高，可以初步判断其肝脏再生及修复能力；然其特异度较差，但不妨碍其成为乙型肝炎肝硬化患者肝功能术前评级的一个辅助检查指标。研究表明血液中C3a浓度与炎症、病毒感染、缺血再灌注、纤维化等多种因素有关［11，15-17］，这可能是特异性较差的原因之一；下一步，笔者将继续完善试验、扩大样本量，剔除干扰因素，绘制更平滑的ROC曲线，寻找一个更准确的界值，用于指导乙型肝炎肝硬化患者的临床肝功能评估。

综上：乙型肝炎肝硬化患者肝功能Child⁃Pugh分级与其血液中过敏毒素C3a水平呈逆相关性，Child⁃Pugh分级评分越高，肝功能越差，C3a浓度越低。临床工作中，血液中C3a水平可作为乙型肝炎肝硬化患者肝功能损伤严重程度评价及术前风险评估的一个参考指标。

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