瑞舒伐他汀对高脂血症病人ApoE基因型的影响

瑞舒伐他汀是他汀类药物，对降低血脂特别是改善低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)作用具有较好的疗效，因此将其应用于治疗高脂血症具有较好的效果，但不同个体之间存在明显差异，对其进行详细分析可得到不同个体的治疗效果。通过遗传药理学研究，脂代谢过程相关基因多态性引起基因表达发生变化，不同病人进行他汀类药物降脂疗效存在差异[1-2]。人类载脂蛋白E(apolipoprotein E，ApoE)基因有3种等位共显性基因，产生6种表型[3]。不同ApoE基因型与脂蛋白胆固醇受体结合能力差异较大，严重影响血脂水平。本研究探讨瑞舒伐他汀对高脂血症病人ApoE 6种基因型的疗效影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取我院2014年8月—2016年8月高脂血症病人108例为研究对象。纳入标准：通过各项检查确诊为高脂血症病人；表现为高脂血症的临床症状；病人知情并签订知情同意书。排除标准：合并严重肝、肾功能损害病人；血糖未控制好的糖尿病病人；合并内分泌失调及甲状腺疾病病人。男64例，女44例；年龄45岁～78岁(59.9岁±10.2岁)；病程1年～10年(4.5年±0.8年)。

1.2 方法

1.2.1 治疗方法 所有病人均进行瑞舒伐他汀治疗，瑞舒伐他汀(阿斯利康制药有限公司分装，国药准字J20120006)15 mg，每日1次，4周为1个疗程，连续服用3个疗程。

1.2.2 血脂水平测定 病人于治疗前后分别抽取空腹静脉血5 mL，测定血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、LDL-C和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)，采用化学测定法进行测定，使用全自动生化分析仪进行分析。

1.2.3 ApoE基因型的检测 采用等位基因特异性多重PCR技术对ApoE基因进行分型检测。序列如下[4-5]，P1：5’-GCTGAGGTGACCCTTGTCTC-3’，P2：5’-CTCCCCACCAGACCATGA-3’分别检测基因型中158位的Cys和Arg；P3：5’-GTGGAGAT GGACGAGGTTT-3’，P4：5’-CAGCTGCCAGACATGAGAA-3’，分别检测基因型中112位的Cys和Arg；P5：5’-CATGCGTCTTCACCTGGAA-3’，作为公共引物。首先制备电泳胶，之后按照操作要求将制备好的电泳胶放入电泳槽，同时将PCR产物倒入，加入缓冲液(6×Loading Buffer)，样本混匀后放入电泳胶孔。PCR反应条件[6]：95 ℃预变性5 min ，95 ℃变性反应45 s，52 ℃条件下退火45 s，72 ℃延伸反应1.5 min，重复35个循环，72 ℃延伸反应15 min，之后进行PCR扩增，扩增后采用1.5%琼脂糖电泳检测扩增产物。控制电泳电压100 V，将电泳胶放入凝胶成像系统观察结果并照相。

2 结 果

2.1 治疗前ApoE不同基因型血脂水平比较 108例基因型为E3/3病人40例， E3/2病人29例，E4/3病人39例，未检测到E4/4，E4/2和E2/2。检测到的病人治疗前ApoE 3种基因型病人TC、LDL-C比较，差异有统计学意义(P<0.05)；TG和HDL-C比较，差异无统计学意义(P>0.05)。详见表1。

基因类型nTCTGHDL-CLDL-CE3/3406.38±0.65 3.01±0.221.02±0.024.96±0.69 E3/2295.78±0.361)3.02±0.251.01±0.024.33±0.561)E4/3396.89±0.891)2.86±0.241.02±0.025.36±0.581) 与E3/3基因型比较,1)P<0.05。

2.2 治疗后ApoE不同基因型血脂水平比较 瑞舒伐他汀治疗后ApoE 3种基因型病人TC、LDL-C比较，差异有统计学意义(P<0.05)；TG和HDL-C比较，差异无统计学意义(P>0.05)。详见表2。

基因类型nTCTGHDL-CLDL-CE3/3404.38±0.65 2.02±0.392.23±0.153.48±0.59 E3/2293.72±0.361)1.39±0.382.24±0.112.65±0.561)E4/3392.89±0.891)1.35±0.392.26±0.114.01±0.581) 与E3/3基因型比较,1)P<0.05。

2.3 治疗后ApoE不同基因型不良反应比较 瑞舒伐他汀治疗后ApoE 3种基因型病人不良反应率比较，差异有统计学意义(P<0.05)。详见表3。

表3 治疗后ApoE不同基因型不良反应比较 例(%)

3 讨 论

高脂血症是一种发生于中老年人的常见代谢性疾病，属于血脂异常类疾病[7]。该病的发生多与羟甲基戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶的活性有关，HMG-CoA还原酶是一种内源性胆固醇合成限速酶，可调节胆固醇代谢，而且HMG-CoA还原酶变化导致血脂异常，因此临床多采用他汀类药物治疗高脂血症病人，他汀类药物通过抑制HMG-CoA还原酶活性，达到降低血脂TC和LDL-C水平[8]，起到治疗作用。大量研究显示，参与他汀类代谢的酶蛋白和参与脂代谢的蛋白发生基因变异，影响蛋白表达，最终导致不同病人机体对相同浓度的他汀类药物产生不同反应，进而影响病人的治疗效果[9-10]。为研究携带不同载脂蛋白基因型是否影响病人的治疗效果，分析瑞舒伐他汀治疗前后ApoE 3种基因型病人的血脂水平，确定ApoE不同基因型对高脂血症病人临床疗效的影响。

本研究收集108例高脂血症病人进行ApoE 6种基因型检测，结果显示基因型E3/3病人40例，E3/2病人29例，E4/3病人39例，未检测到E4/4，E4/2和E2/2。结果显示，治疗前ApoE 3种基因型病人TC、LDL-C比较，差异有统计学意义(P<0.05)；TG和HDL-C比较，差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后ApoE 3种基因型病人TC、LDL-C比较，差异有统计学意义(P<0.05)；TG和HDL-C比较，差异无统计学意义(P>0.05)，说明TC和LDL-C水平是引起高脂血症的重要指标[11-12]。治疗后E3/3、E3/2、E4/3基因型病人不良反应率比较，差异有统计学意义(P<0.05)，说明不同体质病人对药物反应不同，基因型之间差异可能影响病人对药物反应。不良反应方面受到E3/3、E3/2、E4/3基因型影响的研究相关报道较少，但E3/3、E3/2、E4/3基因型影响药物治疗前后血脂水平，与其他研究结果基本一致[13-15]。

携带ApoE不同基因型病人出现不同的血脂水平差异，瑞舒伐他汀治疗后E3/3、E3/2、E4/3基因型TC和LDL-C水平发生明显变化，说明ApoE的E3/3、E3/2、E4/3基因型影响瑞舒伐他汀等药物的降脂效果，可见ApoE 3种基因型可能影响高脂血症病人他汀类药物降脂效果。

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