CD44分子在扁平苔藓中的表达

林 伟 王 珍 魏 群

扁平苔藓(lichen planus, LP)是一种慢性炎症性疾病，其病因及发病机制未明，近年来许多研究认为细胞介导的免疫反应在LP的发病中起重要作用。CD44分子对T淋巴细胞的活化、增殖有增强作用，并且发现在银屑病、扁平苔藓皮损中有表达。本实验旨在探讨LP皮损组织中黏附分子CD44的表达及其与浸润淋巴细胞之间的关系。

1 材料与方法

1.1 实验组 在本院经临床及病理检查确诊的扁平苔藓患者30例，并排除其他疾病，3个月内未系统规律使用免疫抑制剂、糖皮质激素及未长期应用外用药物治疗，其中男18例，女12例，年龄18～65岁，平均发病年龄为(35±5.2)岁。对照组分为对照1组和对照2组：①对照1组为来自本院外科手术患者的健康皮肤组织10例。②对照2组为病理上以真皮层淋巴细胞浸润为主的皮肤病(如：蕈样肉芽肿，Sézary综合征，红斑狼疮等)的病变皮肤组织10例。对照组患者要求未患其他疾病，且年龄、性别、取材部位与LP患者相匹配。

1.2 实验用试剂 鼠抗人CD44单克隆抗体，免疫组化SP超敏试剂盒，AEC显色剂，复合消化酶。以上试剂均购自福州迈新生物技术开发公司。

1.3 实验方法 链霉菌抗生物素蛋白--过氧化物酶连结(SP)法：将石蜡切片脱蜡至水化；加3% H2O2灭活内源性过氧化物酶；用复合消化酶法进行抗原修复；滴加正常羊血清封闭液；依次加入一抗(鼠抗人CD44单克隆抗体)、生物素标记的第二抗体、链霉菌抗生物素-过氧化物酶溶液；采用AEC法染色，苏木素复染，脱水透明、封片。以PBS缓冲液代替一抗作空白对照。用已知的阳性切片作为阳性对照。

1.5 统计学方法 采用SPSS 10.0统计软件进行统计学处理，行χ2检验，P<0.05具有统计学意义。

2 结果

2.1 CD44分子在正常皮肤组织及扁平苔藓皮损的表皮中均可见表达。在二者表皮中的棘细胞和基底细胞表面有表达，并且在棘细胞表面的表达最强，而在颗粒层细胞及角质层细胞均无表达，见图1。两组比较差异无显著性(P>0.05)。见表1。

表1 表皮细胞中CD44分子的表达情况 例

2.2 正常人皮肤真皮组织中CD44分子的表达极少，在扁平苔藓皮损真皮层上部，淋巴细胞呈带状浸润，淋巴细胞中CD44分子的表达呈阳性或强阳性，见图2。在淋巴细胞浸润性皮肤病患者真皮层中，CD44分子在淋巴细胞中的表达呈阳性或弱阳性，见图3。LP与淋巴细胞浸润性皮肤病相比，真皮层浸润淋巴细胞中CD44分子的表达明显增强(P<0.01)。见表2。

表2 真皮层淋巴细胞中CD44分子的表达情况 例

图1 LP皮损表皮棘细胞和基底细胞及真皮层淋巴细胞表面，CD44分子呈强阳性表达(AEC，×100)图2 LP皮损真皮层淋巴细胞中，CD44分子呈强阳性表达(AEC，×400)图3 淋巴细胞浸润性皮肤病真皮层淋巴细胞中，CD44分子呈弱阳性表达(AEC，×400)

3 讨论

尽管LP确切的病因和发病机制还不清楚，许多研究表明T细胞介导的免疫反应对LP的发病起着关键作用[1]。而CD44分子对T细胞的活化、增殖有增强作用。CD44分子是分布极为广泛的细胞表面跨膜糖蛋白,属细胞黏附分子的一种，CD44在器官形成、造血、淋巴细胞归巢和迁移、淋巴细胞活化、激活诱导的细胞死亡等方面具有广泛功能[2]。早期的研究主要集中在CD44和肿瘤转移的关系上，近年来CD44在淋巴细胞激活中的作用引起人们的关注。

淋巴归巢[3]是淋巴细胞循环和参与炎症及其免疫反应的重要过程，关键环节是淋巴细胞表面黏附分子与血管内皮细胞相互黏附，进入血液循环，到达靶器官后再黏附游出血管发挥免疫作用的过程。CD44特异性抗体Hermes-1可以干扰人白细胞与高内皮静脉的内皮结合，这表明CD44虽然不是淋巴细胞的归巢受体但它与归巢有关。白细胞在穿出血管的过程中，第一步都是沿着血管内皮滚动，滚动过程中，血管壁细胞间的黏附变松，白细胞的CD44介导黏附到血管内皮细胞上[4]。本研究中，CD44分子在皮肤扁平苔藓中淋巴细胞表面的强阳性表达，进一步印证了CD44分子在淋巴细胞向真皮上部归巢中起着至关重要的作用,尤其是在淋巴细胞与血管内皮之间的黏附中CD44的作用更显著。

CD44分子对T细胞激活过程有增强作用，表现为受抗原刺激后T细胞上CD44分子表达暂时性增高。在激活过程中，CD44扮演“共刺激分子”的角色[5，6]，细胞膜上CD44分子与其配体透明质酸结合，作为共刺激分子同TCR/CD3复合体接受的刺激一起引起T细胞的活化与增殖，同时CD44分子作为一种协同刺激因子可降低TCR活化的阈值。此外Siegelman等发现，浸润淋巴细胞的表面有大量的白细胞相关抗原-1(LFA-1)表达，CD44和LFA-1协同作用，可使T细胞与CD3+T相互关联，从而使T细胞激活。以上表明CD44分子在淋巴细胞激活过程中生物功能的重要性。

在扁平苔藓皮损中，T细胞被活化后，分泌白细胞介素-2(IL-2)、r-干扰素(IFN-r)、单核细胞刺激因子(GM-CSF)等细胞因子，其中IFN-r诱导角质形成细胞表达细胞间黏附分子-1(ICAM-1)异常抗原。同时Sennion等的研究也发现，在扁平苔藓患者皮损基底层的角质形成细胞有大量的ICAM-1表达，而表皮的其他部分则表达微弱。因此有人推测浸润淋巴细胞上的CD44分子可能通过与表皮角质形成细胞上的ICAM-1结合，而增强细胞间的黏附，促进淋巴细胞向表皮内浸润[7]。

由此分析，CD44分子在扁平苔藓发病中可能参与了T细胞的浸润及激活过程，最终导致真皮上部淋巴细胞带状浸润及基底细胞液化变性。

对于其他一些病理上以淋巴细胞浸润为主的皮肤病中，CD44分子在淋巴细胞中的表达呈阳性或弱阳性，但与其在LP皮疹中的表达相比较，差异具有显著性。原因可能为T细胞介导的细胞免疫反应在扁平苔藓的发病中起了重要作用，同时CD44作为黏附分子参与了T细胞的活化和增殖，进一步说明了CD44分子在扁平苔藓中表达的重要意义。

参考文献

[1] 赵辨.中国临床皮肤病学[M].南京:江苏科学技术出版社,2009.1037.

[2] Termeer C,Averbeck M,Hara H,et al.Targeting dendritic cells with CD44 monoclonal antibodies selectively inhibits the prolifer- ation of naïve CD4+ T-helper cells by induction of FAS-inde- pendent T-cell apoptosis[J].Immunology,2003,109:32-40.

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