慢性自发性荨麻疹患者血清25-(OH)-D和IL-25水平检测

韩 钰 王 娟 张亚丽 贾雪松

慢性自发性荨麻疹(CSU)是慢性荨麻疹(CU)的主要类型之一，其发病机制仍不清楚，近年来有研究表明维生素 D可能通过免疫调控作用参与慢性荨麻疹的发病[1]。同时较多细胞因子在慢性荨麻疹的发病过程中发挥重要作用，而IL-25作为炎性细胞因子在哮喘等过敏性疾病中发挥重要作用，可诱导并影响Th2免疫应答并促进IL-4、IL-5、 IL-13等[2]表达增加。为此，我们通过测定分析CSU患者血清中25-(OH)-D、IL-25水平，以探讨两者与慢性自发性荨麻疹的关系。

1 资料和方法

1.1 材料 2016年12月至2017年8月新疆石河子大学第一附属医院皮肤科临床诊断明确的CSU病例40例。 其中男16例，女24例，年龄 26～65(42.5±10.3)岁，病程6周至12年。 病例入选标准：病程≥6周；病情处于活动期，风团每天发作或几乎每天发作；既往半年内无维生素D类药物以及钙片、激素和抑制机体免疫等药物服用史；如有使用抗组胺药物，则停用≥3 d 。排除标准：排除物理性荨麻疹；排除特殊类型荨麻疹；伴有心、肺等危重内脏疾病者；妊娠期、哺乳期妇女;伴有自身免疫疾病、肿瘤、其他严重系统疾病及除荨麻疹之外的过敏相关性疾病；伴有严重的精神系统疾病。纳入体检科健康体检者30人作为对照组，且了解并自愿加入该研究项目，男12人，女18人，年龄20～59(36.6±10.1)岁，均无个人过敏性疾病病史及家族史。本研究经石河子大学第一附属医院医学伦理委员会批准，患者均签署知情同意书。25-(OH)-D、IL-25水平分级及患者病情评分:目前没有最佳维生素D值的标准，许多专家认为通常使用的基于人群的参考值太低，推荐用基于健康的参考值代替基于人群的参考值，本实验以25-(OH)-D≤20 ng/mL为缺乏，21～29 ng/mL为不足[3]，≥30 ng/mL为正常。根据欧洲慢性荨麻疹指南疾病评分(UAS)对病情严重程度进行评估。严重程度分级：轻度<4分、中度4～6分、重度≥7分。

1.2 标本收集和检测 使用电化学发光法测定受试者25-羟基维生素-D水平，所用试剂盒由 Roche Diagnostics GmbH公司提供，按步骤使用电化学发光免疫分析仪(Cobas e601)测得血清中25-(OH)-D浓度，由我院检验科完成。剩余另外受试者血清放于-80℃冰箱保存待检。避免反复冻融，使用 ELISA法测定受试者血清 IL-25水平，试剂盒购自上海西唐生物科技有限公司。

1.3 标本收集和检测 于晨起空腹采取静脉血5 mL，静置30 min，分离血清，将分离后血清分装至2个EP管中，分别用于25-(OH)-D和IL-25的浓度测定。

2 结果

2.1 血清25-(OH)-D表达水平 CSU组血清25-(OH)- D水平(19.48±7. 41)ng/mL低于对照组(23.23±6.43)ng/mL,(t=2.21，P=0.03)，见表1。

表1 CSU组和健康对照组25-(OH)-D及IL-25水平

2.2 CSU组与对照血清25-(OH)-D水平分布 CSU组其中显示有23例为25-(OH)-D缺乏，13例为不足，仅4例为正常，而健康对照组显示有9例为25-(OH)-D缺乏，18例为不足，3例正常。CSU组25-(OH)-D水平与健康对照组25-(OH)-D水平分布相比较，差异有统计学意义(H=30.04，P<0.001)。

2.3 血清IL-25表达水平 CSU组血清IL-25水平(124.59±19.32)pg/mL高于对照组(107.33±14.57)pg/mL,(t=4.09，P<0.001)，且两组IL-25水平比较，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

2.4 CSU组血清25-(OH)-D水平与IL-25水平相关性 血清25-(OH)-D水平与IL-25水平无相关性(P>0.05)。

3 讨论

25-(OH)-D在体内含量相对较高且比较稳定，较好的体现了维生素D的含量及其转化能力，因此临床常使用25-(OH)-D作为测定维生素D水平的可靠指标。本次研究结果显示CSU患者外周血清25-(OH)-D水平较对照组明显降低，并且有高达57.5%的缺乏比例，高于对照组的30%，这与Chandrashekar1、Rasool等[4]和Woo[5]的研究结果相符合，提示慢性自发性荨麻疹普遍存在维生素D水平降低现象。 Woo[5]分别对72例CU患者、26例急性荨麻疹患者、26例AD患者、72例健康进行了比较，发现与其他组相比慢性荨麻疹组血清25-(OH)-D水平显著降低。此外，这些研究者认为维生素D缺乏可能会增加急性荨麻疹患者进入慢性荨麻疹的可能性。该实验中10例维生素D含量极低(<10 ng/mL)的急性荨麻疹患者中有5例发展成为了慢性荨麻疹。

目前有大量研究表明，维生素D对机体有免疫调节作用，但仍无统一的理论完整的解释其对荨麻疹的作用机制。荨麻疹是一种IgE介导的I型变态反应，同时Yip[6]的小鼠实验发现肥大细胞能通过羟化酶将25-(OH)-D转化为1，25(OH)2 D，后者在体外实验中能抑制IgE介导相关的炎症，且能降低肥大细胞释放组胺等血管活性物质水平。并有研究显示服用维生素D可以刺激B细胞使体外IgE水平显著降低[7]。本次研究显示CSU组血清25-(OH)-D水平明显低于正常人群，提示维生素D对机体免疫系统可能存在负性调节作用，其水平降低后可促进CSU的发生发展。另有研究发现，CU的发生发展与Th1/Th2失衡相关，免疫学上以IL-4作为Th2细胞的特征性细胞因子。维生素D及其衍生物可抑制 Th2型细胞因子 IL-4的表达[8]，且有研究证实[9]CSU患者血清中维生素D水平与IL-4水平呈负相关，推测维生素D可能通过Th1/Th2失衡影响CSU的发生。

本次研究发现CSU患者血清IL-25水平较正常人群明显升高，与李玲玲[10]等研究结果相一致。IL-25主要由Th2细胞、肥大细胞、嗜碱粒细胞等产生，在Th2反应的早期启动中至关重要[11,12]，Wong等[13]和日本学者研究证明IL-25可诱导Th2细胞因子如IL-4等趋化因子表达，从而使嗜酸粒细胞增多，增强Th2细胞免疫应答以及IgE的产生，进一步扩大变态反应。这一结果提示IL-25也可能通过影响IL-4水平致Th1/Th2平衡失调，从而影响CSU的发生。

本研究通过对慢性自发性荨麻疹患者外周血25-(OH)-D和IL-25表达水平的检测，发现二者可能诱导和参与了慢性荨麻疹的发生，尽管本次研究结果显示血清25-(OH)-D水平与IL-25水平无相关性，推测可能与本次研究开展于新疆地区冬季，日光照射量明显减少，减少维生素D合成相关。但综合既往研究，推测两者可能通过Th1/Th2细胞免疫应答来参与慢性自发性荨麻疹的发病，其具体机制及二者是否存在相关性仍需进一步研究。

参考文献

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