中药苦参在小鼠体内的抗肿瘤作用*

蒋征奎，李 晓，张新峰

1.郑州大学附属肿瘤医院(河南省肿瘤医院)药学部(郑州 450000), 2.河南省植物天然产物开发工程研究中心(河南省科学院)(郑州 450000)

中药苦参是豆科槐属植物苦参的根，味苦、性寒，有清热燥湿、杀虫、利尿的功效，苦参有治疗湿热、黄疽、痢疾、肠炎、皮肤瘙痒等症的作用，同时还能够将抗菌及抗癌等作用有效发挥出来[1]。近年来，医学界进行了很多研究[2]，发现苦参及其生物碱有多种药理作用，如对过敏、病原微生物、心律失常等进行抵抗，用于湿热下痢、黄疸、赤白带下、阴部瘙痒等，常与黄柏、龙胆草等合用；用于周身风痒，疥疮顽癣，常合赤芍、地黄、白藓皮等同用；用于麻风，常与大风子等同用。苦参用于多种外科疾患，如湿疹、疖疮、癣疥、麻风等。可煎水外洗，亦可水煎内服。苦参能治疗下焦湿热的小便不利，常配车前子、木通同用。而相关医学学者也日益广泛地关注了其抗肿瘤活性[3]。本研究探讨了中药苦参在小鼠体内的抗肿瘤作用，现报告如下。

材料与方法

1 材 料

动物选用河南医科大学动物实验中心提供的雌雄封闭群昆明种小鼠20只，体重18-20 g；药物选用河南医科大学一附院药材科提供的苦参，苦参原液(g/ml)的制备方法为将1000 g苦参取出来，然后将1000 ml蒸馏水加入，进行24 h的浸泡，隔水进行1 h的煮沸，将药液倒出后在将水加入进行1 h的煮沸，将药液倒出，合并浓缩为1000 ml；试剂选用GIBCO Laboratories提供的RPMI 1640培养液及Fluka AG Swiss提供的MTT；细胞株选用本所药理研究组提供的ECA细胞株，小鼠S180肉瘤。

2 方 法

2.1 体内抑瘤实验：为腹水型小鼠S180肉瘤接种2×105/只细胞，24 h后将其随机分为2.5 g/kg苦参组、5.0 g/kg苦参组、10.0 g/kg苦参组、对照组四组，每组5只。苦参组采用0.1 ml苦参溶液灌胃，每天1次，饮水中不再将药液加入，给药剂量分别为2.5、5.0、10.0 g/kg；对照组小鼠任意应用自来水。用药后10 d脱颈活杀，将瘤取出来称重。反复进行3次实验，将抑瘤率计算出来，计算方法为对照组与苦参组平均瘤重之差与对照组平均瘤重的百分率[4]。

2.2 体外抑瘤实验：用培养液稀释具有良好生长的艾氏腹水癌(Ehrlich ascites cancer,ECA)细胞为1×105/ml浓度，在40孔培养板上将200 μl加入到每孔中，苦参组将不同浓度(5 μg、10 μg、20 μg、40 μg)的苦参药液加入到每孔中，平行作3孔，对照组不将苦参加入其中，在37℃、5%CO2湿环境中放置，进行72h的孵育，在酶标测定仪上570 nm处运用MTT比色法对各孔OD值进行测量，然后将细胞生长抑制率计算出来，计算方法为1与含苦参孔平均光密度(Optical density,OD)值与正常对照孔平均OD值之比差的百分率[5]。

3 统计学方法

采用SPSS 21.0统计学软件，四组小鼠的抑瘤率、不同苦参含量小鼠的瘤细胞生长抑制率等计数资料用率表示，用χ2检验，检验水准α=0.05。

结 果

1 四组小鼠的抑瘤率比较

2.5 g/kg苦参组、5.0 g/kg苦参组、10.0 g/kg苦参组小鼠的瘤重均显著低于对照组(P<0.05)，而10.0 g/kg苦参组小鼠的瘤重显著低于2.5 g/kg、5.0 g/kg苦参组小鼠(P<0.05)，抑瘤率显著高于2.5 g/kg、5.0 g/kg苦参组小鼠(P<0.05)，5.0 g/kg苦参组小鼠的瘤重显著低于2.5 g/kg苦参组(P<0.05)，抑瘤率显著高于2.5 g/kg苦参组(P<0.05)， 见表1。

表1 四组小鼠的抑瘤率比较

注：与5.0 g/kg苦参组比较，△P<0.05；与10.0 g/kg苦参组比较，#P<0.05；与对照组比较，*P<0.05

2 不同苦参含量小鼠的瘤细胞生长抑制率比较 200 μg/ml苦参含量小鼠的瘤细胞生长抑制率显著高于100 μg/ml苦参含量小鼠(P<0.05)，见表2。

表2 不同苦参含量小鼠的瘤细胞生长抑制率比较(%)

注：与100 μg/ml苦参含量小鼠比较，*P<0.05

讨 论

苦参又名枯骨、草槐、地槐等，是常用临床中药之一，是豆科植物苦参Sophora Flavescens Ait的干燥根，具有清热燥湿、杀虫、止痒安神之功效，为历代中医治疗多种皮肤病所推崇。现代临床药理研究表明苦参有抗病原体、抗肿瘤、调节免疫、抑制变态反应、镇静、利尿等作用。中药苦参在临床各科治疗中应用广泛,尤其是国医大师李济仁在中医痹病和乳糜尿等疾病的治疗中取得了显著的疗效[6-8]。近年来,中药苦参提取物及其复方制剂在肿瘤治疗上也有广泛的应用并取得了较好的效果。研究发现苦参及其复方注射液能有效地抑制肿瘤细胞的增殖与转移,而且还能促进肿瘤细胞的凋亡并诱导细胞分化。现阶段，临床还没有完全明确苦参的抗肿瘤作用机理[9-11]。相关医学学者HE染色苦参+瘤细胞体外培养的标本，镜下观察到瘤细胞死亡特征，即具有越来越大的体积，缺乏完整的细胞膜，胞核破碎等，发生这一现象的原因可能是苦参杀伤了瘤细胞[12-14]。同时，相关医学学者用苦参对肿瘤细胞凋亡实验进行诱导，结果表明，瘤细胞有凋亡征象，即具有越来越小的体积，缺乏规则的形态，有突起出现在膜表现，出芽、皱缩等[15-17]。此外，苦参及其生物碱一方面能够将抗肿瘤作用发挥出来，另一方面还不会破坏正常细胞，甚至能够促进白细胞数及机体免疫功能的提升[18-20]。本研究结果表明，2.5 g/kg苦参组、5.0 g/kg苦参组、10.0 g/kg苦参组小鼠的瘤重均显著低于对照组(P<0.05)，而10.0 g/kg苦参组小鼠的瘤重显著低于2.5 g/kg、5.0 g/kg苦参组小鼠(P<0.05)，抑瘤率显著高于2.5 g/kg、5.0 g/kg苦参组小鼠，5.0 g/kg苦参组小鼠的瘤重显著低于2.5 g/kg苦参组，抑瘤率显著高于2.5 g/kg苦参组；200 μg/ml苦参含量小鼠的瘤细胞生长抑制率显著高于100 μg/ml苦参含量小鼠，和相关医学研究结果一致。

总之，中药苦参在小鼠体内的抗肿瘤作用显著，值得临床充分重视并进一步深入研究。

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