生猪屠宰检疫中旋毛虫病的检疫与处理

2018-03-22 22:29
兽医导刊 2018年15期
关键词:旋毛虫包囊压片

一、病原学

1.病原形态。成虫形态微小,细线状,乳白色,头端较尾端稍细。旋毛虫为雌雄异体,雄虫大小为(1.4~1.6)mm×0.04 mm,生殖器官为单管形,虫体尾端有两个叶状交配附器。雌虫大小约为(3~4)mm×0.06 mm,尾部直而钝圆,生殖器官亦为单管形,包括卵巢、输卵管、子宫、阴道等。卵巢位于虫体后部,子宫后段充满虫卵,近阴门处已有发育成熟的幼虫,阴门位于虫体前1/5处,成熟幼虫自阴门排出,故旋毛虫的生殖方式为卵胎生。(1)无包囊的旋毛虫:感染后的16.5 d以内,显微镜下,旋毛虫呈直线状或者弯曲状游离于肌纤维之间,如同蚯蚓状运动。幼虫长度0.5 mm;(2)有包囊的旋毛虫:感染后17~20 d开始卷曲,虫体侵入肌纤维,在寄生部位呈纺锤状膨胀,形成成熟包囊。包囊具有内外两层厚壁,一个包囊一般只有一条盘曲的虫体,少数两条。包囊形态随宿主种类不同而异,人、猪、鼠的都呈纺锤形或椭圆形。

2.生活史。旋毛虫成虫寄生于宿主小肠,主要在十二指肠和空肠上段,含幼虫的囊包则寄生于同一宿主的横纹肌细胞内,对新宿主具有感染性,二者均不需要在外界发育,但必须转换宿主才能继续下一代生活史。因此,被旋毛虫寄生的宿主既是终宿主,也是中间宿主。人、猪、野猪、犬、猫、鼠、熊及多种野生动物均可作为本虫的宿主。

二、流行病学

旋毛虫病呈世界性分布,我国自1964年在西藏发现人体旋毛虫病以来,云南、广东、广西、四川、内蒙、辽宁、吉林、黑龙江、河北、湖北、四川等地均已有本病的散发或暴发流行。目前,云南、湖北和河南等省为我国旋毛虫病的高发区。

1.传染源。绝大多数哺乳动物及食肉鸟类对旋毛虫均易感,现已发现有150多种家畜和野生动物自然感染旋毛虫,这些动物互相残杀吞食或食入含有旋毛虫活幼虫的动物尸体而互相传播。但因人多食猪肉,故以猪与人体感染的关系最密切,其次为野猪、熊等。猪的感染主要是由于吞食含有旋毛虫包囊的肉屑或鼠类。

2.感染方式。人体感染旋毛虫病主要是因为生食或半生食含有旋毛虫的猪肉和其他动物的肉类所致,其感染方式取决于当地居民的饮食习惯。例如云南省等少数民族地区,常将生肉剁碎或切成肉丝,伴以佐料后生食。此外吃腌肉、香肠、腊肠或酸肉(生肉发酵)等,在熏烤、腌制、曝晒等方法加工制作肉类食品时,常不足以杀死肉中的幼虫,如果加热烹调时间不足,食后亦可感染。

3.易感人群。不论男女老幼和种族,对旋毛虫均易感。

三、检疫

猪对旋毛虫有很大的耐受性,感染后通常不表现临床症状,活体猪诊断较为困难,因此实际操作中一般选择在同步检疫阶段进行检测,这里着重介绍三种最常用的检疫方法。

1.目检镜检结合法。这一方法脱胎于“四部规程”中的压片镜检法。实验观察表明,旋毛虫自感染猪体后21 d至7个月形成钙化,在膈肌上形成肉眼可见的白点,通过目检可以快速锁定可疑目标,提高检出率,其后的镜检起鉴定、确认作用。旋毛虫取样肌肉的检出率一般认为膈肌最高,舌肌、咬肌、腹壁肌、颈肌、肋间肌次之。检疫过程中显微检查人员和肌肉样品制作人员每隔1~2 h应当交换工作,减少疲劳程度。每个显微观察人员应当如实记录被检猪的号码、日期和结果,并对记录做好保存和上报工作。

目检镜检结合法流程:(1)采样:每头猪的膈肌脚各取一块肉样,每块肉样的重量不少于30~50 g,且与酮体编记同一号码,依次排列在采样盘中,固定膈肌位置,确保采样号码不会搞错;(2)肌肉样品的肉眼检查:膈肌样品在进行显微镜检查前,由检疫人员撕去肌膜,用肉眼观察有无可疑白色小点,如果发现细小白点,则有目的地剪取肌样进行检查,无白点则视为无旋毛虫,不再进行镜检;(3)压片:肉眼检查后,在可疑肉样上顺着肌肉纤维方向用弯曲的外科剪刀取12个(两块膈肌脚总共24个)小的肉粒(小于米粒大小),在一块5 mm厚载玻片上排成两排,再覆盖另一个载玻片加压制成压片。压片厚度应能透过玻璃看到报纸小字。每个压片只允许检查一头猪的膈肌样品;(4)观察:将标本压片置于50~70倍显微镜下或者投影显微镜下,依次对24个肉粒进行观察,检查旋毛虫,同时检查住肉孢子虫。沿着肌肉纤维方向移动玻片,仔细检查每块肌肉样品的全部纤维。如果压片厚度一致,肌纤维排列成单层,互相之间没有空隙,就是好的压片。

2.集样消化法。本法是利用胃蛋白酶消化肌肉组织而旋毛虫虫体不被消灭的特点,将肌肉组织消化后,镜检沉淀物中有无旋毛虫。消化法适用于进行冷分割的国家,在西方国家应用普遍,它与一般镜检相比有着费用低、安全的优点,但操作方法相对繁琐,需要试剂多,检测时间长,尤其在发现阳性样品后任然要对阳性组(20多头)逐一进行排查。

集样消化法流程:(1)每批取20~25个猪的酮体,每个酮体采取5~8 g膈肌脚,在集样达到100~160 g后,进行匀浆;(2)加入1%胃蛋白酶和1%盐酸在43℃下消化,4~6 h后沉淀45 min,倾去2/3的上清液;(3)在43℃环境下,用7英寸漏斗和60孔滤筛过滤45 min,而后将样品收集至二重皿中以供检查;(4)显微镜下用低倍镜检查有无旋毛虫虫体。

3.胶体金免疫层析法。即快速纸条法,这种检测法广泛用于旋毛虫的普查、产地检疫、宰前检疫、进出口检疫等。试纸法简便实用,无需任何仪器,也不需要专业技术人员和实验室,可随时进行现场检测,内容直观,容易判断,但测试结果受试纸条质量影响较大,不易得出理想结果。(1)采样:①全血:吸管取全血2~3滴或用棉签浸满血样,插入稀释缓冲液使之溶出,盖上瓶盖轻微摇晃,待稀释均匀后,滴入检测卡中2~3滴检测;②组织样:取待检肌肉(一般取膈肌、背最长肌、臀肌)组织约1~2 g(不带脂肪),研磨或充分剪碎,放入加有稀释缓冲液的瓶内,摇晃均匀,静置后将上清液滴入检测卡中2~3滴检测;③血清:吸管取血清样品2~3滴加入标配的稀释液中,盖上瓶盖轻微摇晃,待稀释均匀后,滴入检测卡中2~3滴检测;(2)检测:取出检测卡,在试纸的加样孔中加入100 μl或3滴待检样品(组织样、全血、血清样品可任选一种)中,十分钟内观察结果。试纸条出现两条反应线时判为阳性,一条则为阴性,无反应线判试纸条失效。

四、处理

旋毛虫病目前被定义为二类动物疫病,鉴于其对人类健康造成的危害,根据《病害动物和病害动物产品生物安全处理规程》GB16548—2006的规定,屠宰检疫中若确定为猪旋毛虫病或旋毛虫病肉,无论感染强度如何,一律进行无害化处理;若旋毛虫检测合格且通过同步检疫其他环节,则在检疫合格的猪酮体上加盖检疫验讫章,并出具检疫合格证明。

五、分析与讨论

旋毛虫病是生猪屠宰检疫重点检测的传染性寄生虫病之一,虽然它对猪造成的影响不大,但对人体的伤害较为严重,因此为保证食品安全必须加强对旋毛虫病的预防监测,具体操作上笔者有如下建议:加强检疫人员的管理与培训,规范检疫流程,对染病猪严格执行无害化处理;加强饲养管理,养猪场定期灭鼠,切断鼠类与猪群的联系,圈舍定期消毒;严厉打击私屠乱宰,加强对市场上猪肉的抽检力度,禁止违法销售;养殖场定期驱虫,可在猪饲料中加入适量驱虫药物进行预防,对于已经确定的染病猪,在饲料中加入丙硫苯咪唑300 mg/kg,连用10 d即可基本将该虫杀死。

参考文献(略)

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