砂中法测定蒙古黄芪种子的发芽率

景晓琦，王海花，蔡翠芳

（山西药科职业学院，山西太原030031）

黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus（Fisch.）Bge.var.mongholicus（Bge.）Hsiao 或膜荚黄芪A.membranaceus（Fisch.）Bge.的干燥根，具有补气升阳、固表止汗、利水消肿、生津养血、行滞通痹、托毒排脓、敛疮生肌［1］等功效。黄芪年需求量在3.5万～4.0万吨之间，其中，栽培黄芪占90%以上，且以蒙古黄芪为主［2］。黄芪种皮中含有蜡质、油脂和果胶质［3］，在成熟过程中如果遇到高温干旱条件，种子就容易脱水，使种皮硬化，造成硬实现象。由于种子失去了吸水膨胀的能力，更增强了硬实现象的发生。另外，由于种脐小、结构紧密，影响种子萌发［4］。何军等［5］采用纸上法进行发芽实验，可在第5天计算发芽势，第10天计算发芽率；常晖等［4］选用纸上法12 d后发芽率可达到64%以上。作者采用该法进行蒙古黄芪种子发芽实验，均不能出现以上结果。

1 实验材料

供试品购于山西省应县乾宝黄芪种植专业合作社、浑源县泽青芪业开发有限公司。种子为2016年秋季采收的种子，经山西药科职业学院蔡翠芳教授鉴定为蒙古黄芪（Astragalus membranaceus（Fisch.）Bge.var.mongholicus（Bge.）Hsiao）种 子 。实验前剔除干瘪、虫蛀种子及杂质，备用。

表1 砂上法测定蒙古黄芪种子发芽率

表2 砂中法测定蒙古黄芪种子发芽率

2 方法与结果

2.1 种子处理

2.1.1 机器处理 取一定量蒙古黄芪种子用碾米机处理，使种皮摩擦或部分种子外皮破损，以提高其发芽率。

2.1.2 沸水烫种 将蒙古黄芪种子用20倍量沸水烫种（边加水边搅拌）1 min，水温未降至室温时，加冷水至室温，浸泡时间以5 h为宜。

2.2 纸上法（TP）测定种子发芽率

依照 GB/T3543.4－1995［6］，选取供试种子 100粒置于铺有双层滤纸的培养皿中，在25℃恒温培养箱内培养，保持滤纸湿润，重复4次。每天观察记录发芽情况。

采用纸上法进行蒙古黄芪种子发芽实验，在进行到发芽实验的第5天，部分种子因真菌和细菌感染，虽进行换纸处理，对所实验种子进行水洗，仍然难以进行实验。与常晖等［4-5］实验结果有极显著差异，与张延红等［7］提出的不同来源的黄芪种子带菌量大，在纸床上霉菌极易扩散，影响其他种子发芽的观点基本一致。

2.3 砂上法（TS）测定种子发芽率

依照 GB/T3543.4－1995［6］，选取供试种子 100粒置于铺好的湿砂上，25℃恒温培养箱内培养，保持砂子湿润，重复4次。每天观察记录发芽情况，12 d蒙古黄芪种子发芽率见表1。

由表1可见，采用砂上法进行蒙古黄芪种子发芽实验，子叶从种皮中伸出、初生叶展开至少需要9 d时间，发芽率最高仅26%。何军等［5］发芽实验自第5天计算发芽势、第10天计算发芽率，仅有一个可能，当黄芪的胚根从种皮中伸出，即计算开始发芽，这种计算方法仅仅能说明蒙古黄芪的根能正常发育，不能说明是否能形成正常的地上部分，不能说明子叶能否为根、初生叶、芽的分化等提供必要的养分，与 GB/T3543.4－1995［6］正常幼苗划分标准不符。

张延红等［7］认为黄芪种子发芽以砂上为宜，但与其所做的蒙古黄芪种子实验结果97%，以及与常晖等［4］报道的纸上法发芽率达到64%以上，均有极显著差异，这可能与种子来源、种子产地、种子采收当年气候条件等不一致有关，究其原因还需要进一步探讨。

实验发现，采用砂上法进行种子发芽实验时，由于蒙古黄芪侧根不发达，根系不能伸入砂内，不仅给发芽计数带来困难，种皮难以脱离，子叶不能正常展开，且根系不能伸入砂内，砂面上刚发芽或正在发芽的小植株无法固着，容易加重真菌和细菌的感染，影响发芽实验结果的准确性。

2.4 砂中法（S）测定种子发芽率

依照 GB/T3543.4－1995［6］，选取供试种子 100粒置于铺好的湿砂上，上盖1.0 cm干砂。25℃恒温培养箱内培养，保持砂子湿润，重复4次。每天观察记录发芽情况，12 d蒙古黄芪种子发芽率见表2。

由表2可见，采用砂中法进行蒙古黄芪种子发芽实验，来源相同的种子可在12 d内完成种子发芽率测定，发芽率在42%以上，较砂上法发芽率高，初始发芽天数短。实验发现，采用砂中法时，一般蒙古黄芪的幼苗在露出砂面2 d后，种皮即可脱离，子叶能正常展开，且发芽整齐；另外，经机器处理的种子发芽后，10%～15%的幼苗在露出砂面后，出现2枚子叶自幼茎处断裂，可能与种子处理时胚轴受伤有关；将没有发芽的种子于水中浸泡72 h，因其具有硬实现象仍不能吸水膨胀。

3 讨论

黄芪是一种多年生深根性草本植物，喜向阳干燥条件，花果期因气候干旱，导致黄芪种子出现硬实现象，致使在正常温、湿条件下部分种子不能萌发。购买黄芪种子时，由于蒙古黄芪种子发芽所需时间长，在进行发芽实验时常常出现霉菌或细菌感染，且因子叶不能从种皮中顺利伸出，采用纸上法和砂上法难以正确评价蒙古黄芪种子质量；选用砂中法进行蒙古黄芪种子发芽实验，不仅子叶能从种皮中顺利伸出、初生叶能正常展开，能正确计算发芽率，而且能发现机械处理后对胚轴的损坏情况，能准确计算蒙古黄芪的播种量。

幼苗鉴定标准影响种子质量标准的制定，作者认为，在国家或行业没有出台中药材种子质量标准检验规范之前，参考GB/T3543.4-1995，能统一中药材种子的检验方法和检验标准，有利于统一制定和实施中药材种子的质量标准。

蒙古黄芪种子进行机器处理后，确能破坏种皮，加快种子吸水速度，缩短种子发芽时间。但由于蒙古黄芪种子为肾形，处理时极易受到伤害，建议改进处理设备，制定种子处理工艺和标准。

蒙古黄芪种子的硬实现象与产地、采收时期及生长过程中的气候条件关系密切，因此，不同年份、不同产地、不同成熟度的蒙古黄芪种子发芽率存在一定的差异。