COX-2及NF-κB p65在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义

赵子龙 张冠军

COX-2及NF-κB p65在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义

赵子龙 张冠军

目的探讨COX-2及NF-κB p65在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义。方法选择正常子宫内膜组织者60例(对照组)，子宫内膜癌60例(观察组)，两组都进行COX-2及NF-κB p65的表达检测，同时进行了相关性分析。结果对照组COX-2阳性表达率为3.3%，观察组为55.0%。对照组NF-κB p65阳性表达率为23.3%，观察组为63.3%，对比差异都有统计学意义(P<0.05)。在观察组中，随着子宫内膜癌的病理分期增加、分化程度的减少、淋巴结转移的发生，COX-2、NF-κB p65的阳性表达率都呈现增高的趋势，对比差异都有统计学意义(P<0.05)。Spearman 等级相关分析结果显示COX-2与NF- κB p65的表达呈正相关(γ=0.307，P<0.05)。结论COX-2、NF-κB p65在子宫内膜癌中呈现高表达状况，且分化程度低、分期晚、发生转移者高于分化程度高、分期早、未发生转移者，两者在子宫内膜癌发生发展中起共同促进作用。

子宫内膜癌；COX-2；NF-κB p65；相关性

子宫内膜癌是1种发生于子宫内膜的上皮恶性肿瘤，占女性生殖器恶性肿瘤的20%～30%[1]。目前子宫内膜癌的发病机制尚不十分清楚[2-5]。研究显示多个癌基因的异常激活和编码蛋白的过度表达以及抑癌基因的缺失、突变失活导致细胞增殖失控而恶性转化，可能是子宫内膜癌发生的分子生物学基础[6]。环氧化酶-2(COX-2)又称前列腺素过氧化物合成酶，其mRNA表达和蛋白水平在人体内保持相对稳定，可促进前列腺素合成，维持人体正常功能，但是其在多数组织的炎症过程和肿瘤中诱导性地表达升高[7-8]。NF-κB p65为1种核转录因子，几乎存在于所有真核细胞中，可作用于多种靶基因，与多种肿瘤疾病的过度上调与癌症的发生、发展、分期及预后均有一定的相关性[9-10]。本文具体探讨了COX-2及NF-κB p65在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象

选择2006年8月到2016年7月我院妇产科收治的子宫内膜癌样本120例，其中正常子宫内膜组织60例(对照组)，子宫内膜癌组织60例(观察组)，纳入标准：所有患者的临床病例资料完整；年龄在20～60岁；未接受过手术、化疗或者激素治疗；获得标本得到入选者的知情同意。对照组年龄28～57岁，平均年龄(48.33±3.11)岁。观察组年龄29～58岁，平均(49.11±2.87)岁；病理分期：Ⅰ期34例，Ⅱ期20例，Ⅲ期6例；肌层浸润≤1/2者69例，肌层浸润>1/2者51例。淋巴结转移：无转移45例，有转移15例。两组的年龄对比差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2 资料调查

调查了受试者的性别、病案号、年龄、联系电话、病理分期、肌层浸润、淋巴结转移情况等情况。同时详细记录了两组的组织标本中免疫组织化学染色COX-2、NF-κB p65的表达情况。

1.3 标本检测

所有的石蜡样本组织均经10%福尔马林液固定，常规脱水、浸蜡、包埋，连续以4 μm的厚度切片。采用3%的H2O2室温孵育10 min以去除内源性的过氧化物酶，微波炉中高温抗原修复10 min。二甲苯脱蜡后，进行免疫组织化学染色，滴加不同的单克隆抗体(稀释度1∶1000)，阴性对照以PBS代替一抗，4 ℃过夜后用PBS冲洗3 次，每次5 min，后续步骤按照组织化学染色说明书完成，封片镜检。

本文选择的兔抗人COX-2单克隆抗体购自购自DAKO公司，鼠抗人NF-κB p65免疫组化多克隆抗体购自福建迈新技术开发公司。其他常用化学试剂均购自国药集团，纯度均为分析纯。

1.4 结果判定

COX-2、NF-κB p65均以细胞核内存在棕黄色颗粒为阳性，根据阳性细胞表达数进行判定，≤5%阴性(-)，6%～25%弱阳性(+)，26%～50%中度阳性(++)，>50%强阳性(+++)。

1.5 统计方法

应用SPSS 20.00 for windows软件，计数资料用χ2法或Fisher精确概率法进行统计学检验，计量数据对比采用t检验分析，相关性分析采用Spearman等级相关分析，以P<0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 COX-2、NF-κB p65在子宫内膜癌组织中的表达

对照组COX-2阳性表达率为3.3%，观察组为55.0%。对照组中NF-κB p65阳性表达率为23.3%，观察组为63.3%，比较差异都有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 COX-2、NF-κB p65在不同子宫内膜癌组织中的表达情况(例，%)

2.2 COX-2、NF-κB p65表达与子宫内膜癌的临床病理特征关系

在观察组中，随着子宫内膜癌的病理分期增加、分化程度的降低、淋巴结转移的发生，COX-2、NF-κB p65的阳性表达率都呈现增高的趋势，比较差异都有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 COX-2、NF-κB p65表达与子宫内膜癌临床病理特征的关系(例，%)

2.3 子宫内膜癌组织中COX-2和NF-κB p65表达的相关性

在观察组中，Spearman 等级相关分析结果显示:COX-2与GLUT-1的表达呈正相关(γ=0.307，P<0.05)。

3 讨论

癌症的发生、发展与多个癌基因、抑癌基因突变相关，是多个因素、多个步骤协同长期作用的结果，其作用机制十分复杂[11-12]。

在子宫内膜组织中，对于从原癌基因激活、抑癌基因突变、细胞异常增殖中，目前多数研究仅局限于单一指标，然而从生物学角度看，各指标之间可能存在着极其复杂的关系[13-14]。COX-2可促进肿瘤细胞增殖，抑制细胞凋亡。COX-2不仅表达于肿瘤组织中，而且在其新生血管和转移灶的血管上也有表达。COX-2可增强肿瘤的侵袭转移能力。还通过上调影响细胞侵袭力的其它一些因素，抑制机体的抗肿瘤免疫反应[15]。COX-2还可以刺激肿瘤细胞释放前列腺素，促使内皮细胞迁移、生长，诱导血管生成。NF-κB 是1种多向性、多功能的核转录因子，p65的生物活性比较高，为NF-κB的典型代表[16]。生理状况下的静息细胞中，NF-κB p65蛋白主要通过与其内源性抑制蛋白κB家族以非共价方式在胞质中结合。NF-κB p65可上调细胞周期素D1表达，促进细胞周期G1/G0期向S期转化引发细胞无限增殖。有学者通过研究发现，提高NF-κB p65的活性能使子宫内膜细胞凋亡增加，特别是NNF-κB p65的过度活化，使得NF-κB p65对细胞正常的生长调控功能，特别是细胞程序性增殖，从而在子宫内膜恶性转化中起重要作用[17]。本研究显示COX-2在对照组的阳性表达率为3.3%，在观察组的阳性表达率为55.0%。NF-κB p65在对照组的阳性表达率为23.3%，在观察组的阳性表达率为63.3%，对比差异都有统计学意义(P<0.05)；在观察组中，随着子宫内膜癌的病理分期增加、分化程度的减少、淋巴结转移的发生，COX-2、NF-κB p65的阳性表达率都呈现增加的趋势，对比差异都有统计学意义(P<0.05)，提示子宫内膜癌患者都呈现COX-2和NF-κB p65高表达状况。

本研究显示在观察组中，Spearman 等级相关分析结果显示COX-2与NF- κB p65的表达呈正相关(γ=0.307，P<0.05)。COX-2可参与MAPK信号传导通路的调节，当其形成受体二聚体后，细胞内酪氨酸激酶区域被激活，使其受体发生自身磷酸化，激活三级级联反应，使核内的转录因子发生磷酸化，促进细胞的有丝分裂与NF-κB p65的高表达[18-19]。而随着遗传学损伤的不断积累，更多的抑癌基因失活而大量的癌基因被激活后，在外界环境的双重作用下，导致子宫内膜癌的发生后，两者的关系也会越来越密切，共同加快了肿瘤的发展，增加了肿瘤的侵袭和转移的能力[20-21]。

总之，COX-2、NF-κB p65在子宫内膜癌中呈现高表达状况，且分化程度低、分期晚、发生转移者高于分化程度高、分期早、未发生转移者，两者在子宫内膜癌发生发展中起共同促进作用。

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ExpressionandClinicalSignificanceofCOX-2andNF-κBp65inEndometrialCancer

ZHAOZilong,ZHANGGuanjun.

AnkangCentralHospital,Ankang,725000

ObjectiveTo investigate the expression and clinical significance of COX-2 and NF- κB p65 in endometrial cancer.Methods120 endometrial tissue samples were selected,including 60 cases of normal endometrial tissue (the control group) and 60 cases of endometrial cancer (the observation group),the expression of COX-2 and NF- κB p65 were detected and analyzed.ResultsThe positive expression rate of COX-2 in the control group was 3.3%,and in the observation group was 55%.The positive expression rate of NF- κB p65 in the control group was 23.3%,in the observation group was 63.3%,and the difference between the 2 groups were statistically significant (p65) (P<0.05).In the observation group, the pathological staging of endometrial cancer were increased,differentiation were decreased,lymph node were metastasis,the positive expression of COX-2 and NF- κB p65 were increased,the difference were statistically significant (P<0.05).Spearman rank correlation analysis showed that COX-2 was positively correlated with the expression of NF- κB p65(γ=0.307,P<0.05).ConclusionCOX-2 and NF- κB p65 in endometrial cancer showed high expression,and patients with low degree of differentiation,late stage,metastasis rate are higher than those with high degree of differentiation,early stage,without metastasis,both promote the development of endometrial cancer.

Endometrial cancer;COX-2;NF- κB p65;Correlation

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:1777～1779)

725000 陕西省安康市中心医院(赵子龙)；710061 西安交通大学第一附属医院(张冠军)

张冠军

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.11.011

R737.33

A

1001-5930(2017)11-1777-03

2017-05-24

2017-08-02)

(编辑：吴小红)