HER-2、GH/GHR在胃癌患者血清与肿瘤组织中的表达及其在胃癌发生发展过程中的作用

李 峥 成 军 陈 辉

HER-2、GH/GHR在胃癌患者血清与肿瘤组织中的表达及其在胃癌发生发展过程中的作用

李 峥 成 军 陈 辉

目的探讨人表皮生长因子受体(HER-2)、生长激素(GH)/生长激素受体(GHR)在胃癌患者血清与肿瘤组织中的表达及其在胃癌发生发展过程中的作用。方法收集62例胃癌患者的血标本、术后癌组织及癌旁组织，同时收集同期50例健康者的血标本，采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中HER-2、GH的表达，采用免疫组化(IHC)法检测癌组织及癌旁组织中HER-2、GHR的表达。结果HER-2、GH在胃癌患者血清中的阳性表达率均明显高于健康者(P<0.05)；HER-2在胃癌患者癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织，而GHR阳性表达率明显低于癌旁组织(P<0.05)。HER-2与GH在胃癌患者血清中的表达呈显著正相关(P<0.05)，在胃癌患者癌组织中的表达亦呈显著正相关(P<0.05)。GH在胃癌患者血清中的表达阳性与淋巴结转移有一定的关系(P<0.05)；HER-2在胃癌患者癌组织中的阳性表达与淋巴结转移、TNM 分期有一定的关系(P<0.05)，而GHR与分化程度有一定的关系(P<0.05)。结论HER-2与GH/GHR在胃癌患者血清与肿瘤组织中的表达存在紧密联系，可能在胃癌的发生、发展及转移过程中起着协同作用。

HER-2；GH/GHR；胃癌；临床病理特征

胃癌(gastric cancer，GC)是临床十分常见的消化系统恶性肿瘤，在我国的患病率与病死率均很高，好发于50岁以上人群及男性。手术辅以化放疗是治疗胃癌的主要手段，而对进展期胃癌患者而言，多数已丧失了最佳的治疗时机，主要只能通过传统化放疗及姑息手术进行治疗，但总体效果不佳，转移与复发的可能性很高，5年生存率低至20%～30%[1]。因此，目前对胃癌的研究已成为消化内科，肿瘤科，普外科临床医生的关注热点。胃癌易侵袭周围组织器官，早期便可能出现淋巴转移，确切病因尚不完全清楚。胃癌早期缺乏特异性的临床表现，故容易被患者与医生忽视，导致很多患者在确诊时已进入中晚期，存在周围组织器官浸润、远处转移等危象。传统胃镜检查不能作为普查手段，且无法满足临床分期评估的要求。超声、螺旋CT及MRI等技术虽可将胃癌的临床分期提高到90%以上[2]，但在诊断早期胃癌方面仍存在一定的局限。血清肿瘤标志物CEA对早期胃癌也无法完全体现出其临床价值，报道称其敏感性只有22%[3]。近年的研究发现，胃癌的发生于发展与人表皮生长因子受体(human epidermal growth factor receptor2,HER-2)、生长激素(growth hormone,GH)及生长激素受体(growth hormone receptor,GHR)等多种因子均存在一定的关系，但目前有关此方面的研究尚不多。为此，本研究分别比较了胃癌患者与健康者的血清中、癌组织及癌旁组织中HER-2、GH/GHR的表达情况，以为胃癌的早期诊断与治疗及监测复发与预后提供参考，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 一般资料

本研究为我院消化内科，普外科与肿瘤科一起联合开展，选择2014年3月至2016年7月收治并确诊62例胃癌患者，排除伴其它恶性肿瘤及临床资料不全者。其中男性36例，女性26例；年龄35～71岁，平均(63.9±6.1)岁；均为腺癌，分化程度：低分化33例，中分化22例，高分化7例；肿瘤部位：贲门胃底37例，胃体13例，胃窦12例；肿瘤大小：<5 cm 29例，≥5 cm 33例；淋巴结转移：无20例，有42例；TNM 分期：Ⅰ期7例，Ⅱ期10例，Ⅲ期31例，Ⅳ期 14例。同时选择同期50例健康者，男性29例，女性21例；年龄29～65岁，平均(53.3±4.3)岁。

1.2 标本采集

胃癌患者术前采集晨空腹肘静脉血4 mL，离心处理取血清，储备于医用冰箱中待检；术中分别切取癌组织及癌旁组织(癌组织附近5 cm外，无肿瘤细胞浸润)。健康者于体检当日抽取晨空腹肘静脉血4 mL，获取血清待检。

1.2.1 试剂与方法 HER-2/neu ECD ELISA试剂盒(安徽安科生物股份有限公司)、人生长激素ELISA试剂盒(杭州联科生物技术股份有限公司)、HER-2单克隆兔抗试剂盒(上海恒远生物科技有限公司)、鼠抗人GHR单克隆抗体试剂盒(上海恒远生物科技有限公司)。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中HER-2、GH的表达，采用免疫组化(IHC)法检测癌组织及癌旁组织中HER-2、GHR的表达，按试剂盒进行操作。

1.2.2 结果判断[4]血清中阳性表达参考范围：HER-2≥15 μg/L；GH≥7.5 μg/L。组织中阳性表达判断：根据切片着色的强度与范围计算阳性细胞的百分比。HER-2分布于细胞膜，将5% 以上的细胞膜被染成棕黄色，染色连续并环绕整个细胞膜判断为阳性；GHR主要分布于细胞质，在细胞膜与细胞核中也可见，将切片染色细胞计数超过25%判断为阳性。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 HER-2、GH/GHR在血清与组织中的表达

HER-2、GH在胃癌患者血清中的阳性表达率分别为25.81%、29.03%，均明显高于健康者(P<0.05)；HER-2、GHR在胃癌癌组织中的阳性表达率分别为32.26%、53.23%，HER-2阳性表达率明显高于癌旁组织，而GHR阳性表达率明显低于癌旁组织(P<0.05)，见表1，2。

表1 HER-2、GH在血清中阳性表达情况(例，%)

表2 HER-2、GHR在组织中阳性表达情况(例，%)

2.2 HER-2与GH在胃癌患者血清中表达的相关性

HER-2与GH在胃癌患者血清中的表达呈显著正相关(P<0.05)，见表3。

2.3 HER-2与GHR在胃癌癌组织中表达的相关性

HER-2与GHR在胃癌、癌组织中的表达呈正显著相关(P<0.05)，见表4。

表3 HER-2与GH在胃癌患者血清中表达的相关性/例

表4 HER-2与GHR在胃癌癌组织中表达的相关性/例

2.4 血清中HER-2、GH表达与胃癌临床病理特征的关系

HER-2、GH在胃癌血清中的阳性表达均与性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、TNM 分期、分化程度无明显关系，而GH表达与淋巴结转移有一定的关系(P<0.05)，见表5。

表5 HER-2、GH表达与胃癌临床病理特征的关系(例，%)

2.5 癌组织中HER-2、GHR的表达及与其临床病理特征的关系

HER-2在胃癌癌组织中的阳性表达与淋巴结转移、TNM 分期有一定的关系(P<0.05)，GHR与分化程度有一定的关系(P<0.05)，此外两者均与性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小无明显关系，见表6。

表6 HER-2、GHR在胃癌癌组织中的表达及与其临床病理特征的关系(例，%)

3 讨论

胃癌的发生发展过程具有多因素、多步骤、多阶段的特点，虽然近些年人们在诊断与治疗胃癌方面取得了一定的成效，但确诊时已进入中晚期的胃癌患者仍不在少数，且多数并未从姑息手术、放化疗等手段中获得满意的临床受益。胃癌患者的转归及生存期的延长无疑有赖于疾病的早发现、早诊断、早治疗。我国由于在胃癌早期方面的研究工作相对于一些发达国家来说比较滞后，故早期胃癌的检出率很低，而亚洲其他国家如韩国、日本等可达到30%～60%[5]。胃癌的诊断手段较多，但均存在不同程度的限制，目前来说，寻找特异性肿瘤标记物，研究基因检测以及基因靶点治疗已成为包括胃癌在内的各种肿瘤诊治的研究热点，对推动当代肿瘤诊疗事业具有重要意义。近些年，消化内科在研究胃癌以及协助胃癌的发现方面取得了一定的进步，对胃癌高度重视，并开展了发现早癌的一些内镜检查及相关基础研究，以进一步研究胃癌的发生发展，提高胃癌检出率。

HER-2基因在人第17号染色体长臂21位，编码具有酪氨酸激酶活性的细胞膜磷酸糖蛋白P185。P185中的胞外区被基质金属蛋白酶切割后进入血液，从而可在血清中检测到HER-2。研究发现，HER-2可参与胚胎形成、调节细胞增殖分化及组织修复等，正常来说仅在胎儿期表达，在成年人中几乎不表达，而却可在一些恶性肿瘤组织中异常表达。HER-2在正常人血清中的含量不超过15 μg/L，而Van等[6]研究中16%的胃癌患者超过此界值，Lordick 等[7]亦指出血清HER-2浓度与胃癌恶性程度有明显的关系。本研究显示，HER-2胃癌患者血清中的阳性表达率(25.81%)明显高于健康者(0)，这说明血清HER-2可能对胃癌有一定的指示作用，有望在胃癌的临床诊疗中发挥应用价值。血清学标本取材简便，重复性好，客观可靠，故葛尔树等[8]提出可联合血清HER-2与血清学肿瘤指标进行早期胃癌的筛查诊断。分析其与临床病理特征的关系，HER-2在胃癌患者血清中的表达阳性均与性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、淋巴结转移、TNM 分期、分化程度无明显关系，这提示血清HER-2浓度可能独立于胃癌的生物学行为，不受以上因素的影响，故有望成为胃癌特异的血清学检测指标。研究表明，HER-2在癌组织中的阳性表达率在6%～38%[9]，本研究为32.26%，与研究相符，且明显高于癌旁组织(0)，提示胃癌肿瘤组织中有HER-2表达，对胃癌的诊断及靶向治疗有所帮助。 分析其与胃癌生物学行为的关系发现，HER-2在胃癌患者癌组织中的表达阳性与淋巴结转移、TNM 分期有一定的关系，这提示，通过检测肿瘤组织中HER-2的表达情况，对评估胃癌的侵犯、转移有一定帮助。Surmaez等[10]研究指出组织中HER-2的阳性表达也与肿瘤位于贲门胃底、胃体或胃窦有明显的关系，但本研究显示无统计学意义。

GH为1种含191个氨基酸多肽的蛋白质激素，由脑垂体前叶嗜酸性细胞分泌，可通过GHR介导机体中蛋白质及其它组织的合成。鉴于其生长因子的特性，可能对肿瘤细胞的有丝分裂与生长有一定的促进作用，可能对肿瘤的发生、转移有所影响。一项关于胃癌、直肠癌的研究显示，这类患者血清中的GH浓度明显比健康人高，但陈美芳等[11]研究表明，胃癌患者血清中的GH浓度与健康人无明显差异。由于内分泌系统各种激素间的影响较大，故目前对胃癌与GH/GHR之间关系的定论存在较大分歧。本研究结果显示，GH在胃癌患者血清中的阳性表达率(29.03%)明显高于健康者(0)，这说明血清GH浓度与胃癌有一定的关系，有望在胃癌的诊断及内分泌治疗方面发挥应有价值。分析其与胃癌生物学行为的关系发现，血清GH的阳性表达与淋巴结转移有一定的关系，这说明血清GH浓度越高，淋巴结转移的风险越大，提示对胃癌的预后监测有积极的意义。既往研究已发现GHR在结直肠癌、肝癌等癌组织中有异常表达，并且肿瘤恶性程度会影响其表达水平。但Hang等[12]又发现胃癌患者的癌组织与癌旁组织中的GHR不存在明显差异。本研究显示，GHR阳性表达率(53.23%)明显低于癌旁组织(82.26%)，这说明胃癌可能削弱肿瘤组织中GHR的表达水平，故对胃癌的诊断及靶向治疗有所帮助。分析其与胃癌生物学行为的关系发现，组织中GHR的阳性表达与分化程度有一定的关系，随分化程度的降低，GHR在组织中的表达越低，与Monig等[13-14]研究部分相符。

本研究显示，HER-2与GH在胃癌患者血清中的表达呈正显著相关，且HER-2与GHR在胃癌患者癌组织中的表达亦呈正显著相关，提示二者可能在胃癌的发生、发展及转移过程中起着协同作用，但至于何种机制目前尚不清楚，可能其中存在某种正反馈机制[15]，促使肿瘤发生并不断生长、转移。

综上所述，HER-2与GH/GHR在胃癌患者血清与肿瘤组织中的表达存在紧密联系，可能在胃癌的发生、发展及转移过程中起着协同作用。鉴于此，临床可联合检测HER-2与GH/GHR来帮助胃癌的诊断，同时进一步研究其中的作用形式与相互联系，为胃癌的靶向治疗奠定基础。

[1] 王婕敏,林三仁.胃癌研究及诊治新进展〔J〕.胃肠病学和肝病学杂志,2012,21(1):3-5.

[2] 郑朝旭,郑荣寿,陈万青.中国2009年胃癌发病与死亡分析〔J〕.中国肿瘤,2013,22(5):327-332.

[3] 刘 萍,卜海激.胃癌组织中HER-2及Ki-67的表达及相关性〔J〕.临床肿瘤学杂志,2015,20(8):699-703.

[4] 王 海,朴正爱.Pgp、ki67、Her-2在胃癌中的表达及相关性分析〔J〕.中国社区医师(医学专业),2011,13(18):197.

[5] 汪金峰,程津津,石 星,等.胃癌患者血清中骨桥蛋白水平及其在胃癌组织中的表达〔J〕.中国中西医结合消化杂志,2011,19(5):305-308.

[6] Van Hul M,Lijnen HR.Matrix metalloproteinase inhibition impairs murine adipose tissue development independently of leptin〔J〕.Endocr J,2011,58 (2):1-7.

[7] Lordick F,Leong-Chong J,Kang Y,et al.Her2 status of advanced gastric cancer is similar in Europe and Asia〔J〕.Ann Oncol,2011,18(Suppl 7):253.

[8] 葛尔树,刘 弋.胃癌血清和组织中Her-2/neu、MMP-2和Leptin的表达情况及临床意义〔J〕.安徽医科大学学报,2014,49(1):76-80.

[9] 谭莉莉,魏亚宁,甄江涛,等.老年胃癌组织HER2和AKT2的表达及其与临床病理特征的关系〔J〕.中国老年学,2014,34(17):4814-4816.

[10] Surmaez E,Fiorio E,Mercanti A.Leptin/HER-2 crosstalk inbreast cancer:in vitro study and preliminary in vivo analysis〔J〕.BMC Cancer,2008,8(28):305.

[11] 陈美芳,季 峰,厉有名.食管癌基质金属蛋白酶及其组织抑制剂表达的研究〔J〕.中华消化杂志,2002,22(3):181-182.

[12] Hang XL,Yang YS,Xu DP,et al.Comparative study on overexpression of HER 2/neu and HER 3 in gastric cancer〔J〕.World J Surg,2011,33(10):2112-2118.

[13] 洪成雨,郑 建,李 婷,等.p-ATM、p-p53及 p-p21因子与进展期胃癌化疗疗效及预后的关系〔J〕.实用癌症杂志,2014,23(1):13-16.

[14] Monig SP,Baldus SE,Hennecken JK,et al.Expression of MMP-2 is associated with progression and lymph node metastasis of gastric carcinoma〔J〕.Histopathology,2011,39(6):597-602.

[15] 杨锭洪,孟凡军,林长裕.口服双环醇对奥沙利铂联合卡培他滨方案治疗胃癌患者引起肝损伤的防治研究〔J〕.实用癌症杂志,2014,12(6):660-662.

ExpressionandEffectofHER-2andGH/GHRinSerumandTumorTissueofPatientwithGastricCancer

LIZheng,CHENGJun,CHENHui.

HubeiCollegeofArtsandSciencesAffiliatedXiangyangCentralHospital,Xiangyang,441021

ObjectiveTo investigate the expression of HER-2 and GH/GHR in serum and tumor tissue of patient with gastric cancer and their effect on the development of gastric cancer.MethodsThe blood specimens,postoperative carcinoma tissues and adjacent tissues of 62 cases patients with gastric cancer were collected,and blood specimens of 50 cases healthy people in the corresponding period were collected.HER-2 and GH in serum were detected by ELISA,and HER-2 and GHR in carcinoma tissues and adjacent tissues were detected by IHC.ResultsThe positive expression rate of HER-2 and GH in serum of patients with gastric cancer was significantly higher than healthy people(P<0.05).The positive expression rate of HER-2 in carcinoma tissues was significantly higher than adjacent tissues(P<0.05),while GHR in carcinoma tissues was significantly lower than adjacent tissues(P<0.05).The expression of HER-2and GH in serum of patients with gastric cancer had positive significant correlation(P<0.05),and in carcinoma tissues also had positive significant correlation(P<0.05).The relationship,positive expression of GH in serum of gastric cancer had a certain relationship with lymph node metastasis (P<0.05).The positive expression of HER-2 in carcinoma tissues had a certain relationship with lymphatic metastasis and TNM staging (P<0.05),and GHR had a certain relationship with differentiation degree(P<0.05).ConclusionThe expression of HER-2 and GH/GHR in serum and tumor tissue of patient with gastric cancer are closely correlated,it maybe play a synergistic effect on the occurrence,development,and metastasis of gastric cancer.

HER-2;GH/GHR;Gastric cancer;Clinical pathological characteristics

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:1748～1751)

441021 湖北文理学院附属襄阳市中心医院

陈 辉

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.11.003

R735.2

A

1001-5930(2017)11-1748-04

2016-10-07

2017-06-12)

(编辑：吴小红)