EGFR、Ki67在三阴性与非三阴性乳腺癌中的表达及其与TNBC病理特征的相关性

李华民

EGFR、Ki67在三阴性与非三阴性乳腺癌中的表达及其与TNBC病理特征的相关性

李华民

目的探讨EGFR、Ki67在三阴性与非三阴性乳腺癌中的表达差异及两者的表达与TNBC临床病理特征的关系。方法分析non-TNBC与TNBC 患者的临床病理资料，采用非生物素二步法检测76例乳腺癌标本里EGFR、Ki67的表达，对比两者在non-TNBC与TNBC中的区别。检测EGFR与Ki67在TNBC中的阳性表达率，研究其与病理参数的相关性。结果和non-TNBC相比，TNBC多见于绝经前妇女，组织学分级较差，较易发生淋巴结转移、复发转移、远处转移，且出现较早。EGFR与Ki67在TNBC组织中的阳性表达率均高于在non-TNBC组织中的阳性表达率。EGFR、Ki67的表达与TNBC肿块直径、淋巴结转移情况、TNM分期、组织学分级之间均具有相关性。结论EGFR与Ki67在TNBC中表达均升高。两者的表达与肿块直径、淋巴结转移情况、TNM分期、组织学分级之间均具有相关性。

EGFR；Ki67；三阴性乳腺癌；非三阴性乳腺癌

乳腺癌是一种异质性较高的恶性肿瘤，在全身恶性肿瘤里，其发病率占7%～10%[1]，表现为分子生物学、病理、临床、预后等方面的差异性。乳腺癌可以依据分子分型，分为5种亚型[2]，三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)属于其中一种，指表皮生长因子2(human epider growth factor receptor,HER)，孕激素受体(progesterone receptor,PR)，雌激素受体(estrogen receptor,ER)3种受体分子，均表达为阴性。TNBC具有侵袭性强、无靶向药物治疗指征、对激素不敏感、预后差、发病年龄相对较小、复发率高等特点[3-4]，因此引起了众多研究者的广泛关注与重视。Ki67、EGFR (epidermal growth factor receptor,表皮生长因子受体)在肿瘤细胞增殖过程里，起着重要的作用。TNBC的发生发展与细胞的异常增殖相关[5]。本研究对76例乳腺癌患者进行了回顾性分析，旨在分析探讨EGFR、Ki67在TNBC与non-TNBC中的表达差异，及两者的表达与TNBC临床病理特征的关系。

1 材料与方法

1.1 一般资料

选取2015年1月至2017年1月我院收治的经病理诊断确诊为乳腺癌的女性患者76例，其中TNBC 13例，non-TNBC 63例。患者年龄36～73岁。所有患者的病理资料均完整，包括肿瘤大小、年龄、淋巴结转移情况、临床分期、复发转移情况等。所有患者入院前，均未进行任何的治疗，入院后，首先采取手术治疗，且术前均未经放疗、化疗。

1.2 方法

1.2.1 主要仪器与试剂 SP免疫组化试剂盒及DAB显色试剂盒均购自北京中杉金桥生物科技有限公司，兔抗人Ki67单克隆抗体及兔抗人EGFR单克隆抗体均购自福州迈新生物科技开发有限公司。

1.2.2 检测方法 切除乳腺癌组织标本，以4%甲醛固定肿瘤标本，以石蜡包埋，经切片机，取得4 μm厚切片，将切片放在烤片机上，烘烤2 h，置于60 ℃恒温箱中一夜，以防脱片。采用非生物素二步法。染色结果采用DAB显色。每次实验用阳性组织切片(已知)作为阳性对照，用PBS液代替一抗作为阴性对照。

1.3 结果判定

EGER判断标准：细胞膜出现连续性的棕黄色为EGER阳性细胞，按比例计数后，按百分比分类。阳性细胞数占比(细胞总数为200个)≤5%为阴性(-)，>5%～25%为弱阳性(+)，>25%～50%为阳性(++)，>50%就为强阳性(+++)。

Ki67判断标准：细胞核内有棕黄色颗粒为Ki67阳性细胞，按比例计数后，按百分比分类。阳性细胞数占比(细胞总数为200个)≤5%为阴性(-)，>5%～25%为弱阳性(+)，>25%～50为阳性(++)，>50%就为强阳性(+++)。

1.4 统计学方法

选择SPSS 17.0软件，计数资料用%表示，不同组别之间的比较采用χ2检验。

2 结果

2.1 non-TNBC与TNBC患者的临床病理特征比较

在76例患者里，经病理检查证实为非三阴性乳腺癌患者63例(82.89%)，三阴性乳腺癌患者13例(17.11%)。经统计学处理，non-TNBC与TNBC在年龄、肿块直径、TNM分期、病理学类型方面相比，差异不明显，无统计学意义。TNBC相比non-TNBC，多见于绝经前妇女，组织学分级较差，较易发生淋巴结转移，较易发生复发转移且较早出现，较易发生远处转移，差异均具有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 non-TNBC与TNBC 患者的临床病理资料分析

2.2 EGFR与Ki67在non-TNBC与TNBC中的表达

EGFR与Ki67在TNBC组织中的阳性表达率均高于在non-TNBC组织中的阳性表达率，差异具有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 EGFR与Ki67在non-TNBC与TNBC中的表达(例，%)

2.3 EGFR与Ki67的表达与TNBC 病理参数的关系

在13例TNBC患者中，EGFR、Ki67的表达与绝经状态、发病年龄、病理学类型之间无相关性(P>0.05)，与肿块直径、淋巴结转移情况、TNM分期、组织学分级之间均具有相关性(P<0.05)，见表3。

表3 EGFR与Ki67的表达与TNBC 病理参数的关系(例，%)

注：各分层EGFR总阳性例数应为9例、Ki67总阳性例数应为12例。

3 讨论

EGFR为酪氨酸激酶受体家族，其与乳腺癌的增殖、生长有密切的关系[6-7]。据报道，在乳腺肿瘤患者里，有27%～30%的患者有EGFR过表达，在TNBC里，更是有45%～70%的高表达概率[8]。在本次研究里，EGFR在TNBC里有69.23%的表达率，高于其在non-TNBC里的表达率，差异明显，具有统计学意义(P<0.05)。同时，在TNBC里，EGFR的阳性表达率与肿块直径、淋巴结转移情况、TNM分期、组织学分级相关(P<0.05)，差异具有统计学意义，提示EGFR的高表达极有可能在TNBC的增殖发展中起着重要的作用。EGFR是通过调控细胞增殖、分裂以及血管形成等过程，来增加乳腺癌的侵袭性[9]，因而，若是能找到抑制EGFR蛋白作用的作用靶点，就可能抑制部分non-TNBC向TNBC转化，以阻断恶性增殖的能力。所以，可以考虑将EGFR作为靶向药物治疗TNBC的重要突破口。

Ki67位于细胞核内，与细胞增殖密切相关[10-12]。Ki67为目前较为确定的核增殖标志物，其半衰期很短，脱离了细胞周期后就会快速降解[13]，因而在评估肿瘤细胞增殖活性时，其成为了重要标志物。在本次研究里，TNBC里Ki67的阳性表达率，明显高于non-TNBC里Ki67的阳性表达率，正如Bauer等研究所表明的，在多种恶性肿瘤实体里，Ki67的表达率会远高于正常的组织，与多种恶性肿瘤的发展，转移以及预后相关[14]。

Ki67在TNBC里的阳性表达率为92.31%，为高度表达。同时，在TNBC里Ki67的阳性表达率与肿块直径、淋巴结转移情况、TNM分期、组织学分级相关(P<0.05)，差异具有统计学意义，提示Ki67阳性者易发生淋巴结转移，癌细胞增殖程度增高，乳腺癌易生长，侵袭能力增强。 Ki67的表达可作为判断TNBC恶性程度的重要指标，对临床治疗方案的制定有重要影响。

综上所述，三阴性乳腺癌在乳腺癌里为一种高危的类型，其多见于绝经前妇女，患者较易发生淋巴结转移、复发转移、远处转移、组织学分级较差。EGFR的表达在TNBC的增殖发展中起着重要的作用，可将EGFR作为靶向药物治疗TNBC的重要突破口。Ki67的表达可作为判断三阴性乳腺癌恶性程度的重要指标，指导临床治疗方案的制定。

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TheExpressionofEGFRandKi67inTripleNegativeandNon-TripleNegativeBreastCancerandtheRelationshipwithClinicalPathologyofTNBC

LIHuamin.

WeinanCentralHosptial,Weinan,714000

ObjectiveTo analyze the differential expression of EGFR and Ki67 in triple negative and non-triple negative breast cancer (TNBC),and the relationship with TNBC clinical pathology.MethodsThe clinicopathologic data of 76 patients with non-TNBC and TNBC were analyzed,and Two-Step Non-biotin was used to detect the expression of EGFR and Ki67 in 76 patients with non-TNBC and TNBC.Compared the difference of the expression of EGFR and Ki67 in non-TNBC and TNBC,the positive expression rates of EGFR and Ki67 were detected in TNBC.The relationship between the positive expression rate and pathological parameters in TNBC was analyzed.ResultsCompared with non-TNBC,TNBC was more common in premenopausal women,who had poor histologic grade and were prone to lymph node metastasis,recurrence metastases and distant metastases at early time.EGFR and Ki67 have higher positive expression rates in TNBC than non-TNBC.The positive expression of EGFR and Ki67 was relevant to the diameter of the tumor,lymph node metastasis,TNM staging,and histological gradation.ConclusionPositive expression rate of EGFR and Ki67 in TNBC are higher than non-TNBC,And the positive expression of EGFR and Ki67 is relevant to the diameter of the tumor,lymph node metastasis,TNM staging,and histological gradation.

EGFR；Ki67;Triple negative breast cancer(TNBC);Non-TNBC

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:1759～1762)

714000 陕西省渭南市中心医院

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.11.006

R737.9

A

1001-5930(2017)11-1759-04

2017-05-09

2017-07-10)

(编辑：甘艳)