柳叶沙棘籽油对竭力运动后小鼠抗衰老能力的影响

葛晓燕，房 磊

(1.河南商丘学院，河南商丘 457600；2.吉林农业科技学院，吉林吉林 132101)

柳叶沙棘籽油对竭力运动后小鼠抗衰老能力的影响

葛晓燕1，房 磊2

(1.河南商丘学院，河南商丘 457600；2.吉林农业科技学院，吉林吉林 132101)

为了研究柳叶沙棘籽油对小鼠竭力运动后抗衰老能力的影响，采用水代法提取柳叶沙棘籽油，并通过喂食柳叶沙棘籽油验证小鼠的抗衰老能力。将50只健康小鼠，随机分为5组，即正常组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。除正常组外，其余小组均使用90 mL/L的D-gal溶液加速小鼠衰老。低剂量组、中剂量组和高剂量组的小鼠被灌胃对应剂量的柳叶沙棘籽油，模型组注射同正常组等剂量的9 g/L的生理盐水。结果表明，低、中、高剂量组的肝脏指数与正常组相比无显著变化(P>0.05)，模型组与正常组相比小鼠的肝脏指数显著下降(P<0.05)；低、中、高剂量组的MDA含量相比正常组，无显著变化(P>0.05)；模型组的MDA含量与正常组相比，显著下降(P<0.05)；低、中、高剂量组的SOD活性与正常组相比，无显著变化(P>0.05)，模型组与正常组的SOD活性显著下降(P<0.05)。此外，在试验过程中无任何不良反应出现。因此，柳叶沙棘籽油在小鼠竭力运动下对组织的衰老有一定的延缓作用，并具有一定的安全性。

柳叶沙棘籽油；竭力运动；小鼠；抗衰老

柳叶沙棘是沙棘的一个品种，属于胡颓子科，高约5 m，其枝部顶端具短刺；幼枝细长且伸长，密被褐色鳞片和散生淡白色星状柔毛，老枝灰棕色。柳叶沙棘果实富含丰富的维生素，大量试验表明，柳叶沙棘中含有丰富的维生素C和维生素E，而且维生素C和E的含量明显高于普通沙棘油。维生素C和维生素E是抗氧化元素的主要成分。同时在柳叶沙棘油中含有丰富的黄酮类化合物，黄酮类化合物是一种重要的活性成分，具有良好的抗氧化效果。相关研究表明，黄酮类化合物有抗心律失常、抗心肌缺血、抗脑缺血、抗自由基和肝保护等作用，可以有效提高细胞代谢能力。

近年来，许多学者已经对竭力运动后小鼠抗衰老问题进行了研究。彭丽娜等人通过对小鼠竭力运动后进行玛咖灌胃，探讨小鼠竭力运动后的耐受力及衰老功能。通过检测肾脏线粒体呼吸链酶Ⅰ-Ⅲ、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性均升高、而丙二醛含量降低可知竭力运动后的小鼠补充玛咖可增强耐受力，延缓衰老[1]。何首乌作为我国传统中药，具有促进造血功能、增强免疫力、降血脂保肝等功能，李亦涵等人通过其提取物二苯乙烯的研究发现，二苯乙烯具有延缓皮肤衰老、改善骨质疏松症、改善阿兹海默症等功能[2]。而这些方法并没有对竭力运动后小鼠短期流失大量营养及机体保护成分，导致小鼠短期衰老加速的问题进行研究。因此，本文采用柳叶沙棘籽油对竭力运动后小鼠抗衰老能力进行研究。

本研究主要以柳叶沙棘果为原料，提取出柳叶沙棘籽油，通过对竭力运动下的小鼠进行为期7周柳叶沙棘籽油摄入，观察小鼠肝脏指数、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)活性、以及丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量的变化，探讨柳叶沙棘籽油对小鼠竭力运动后的抗衰老能力的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验用品 试验对象为100只健康小鼠，雌雄个数相同，体重20 g～22 g，由长春生物制品研究所有限公司提供；柳叶沙棘果，由内蒙古沙漠之花生态产业科技有限公司提供，粉碎待用；9 g/L生理盐水购于沈阳化学试剂厂；90 mL/L的D-gal溶液购于沈阳化学试剂厂。

1.1.2 主要仪器 超高压设备购于包头军工设备有限公司；WF-60万能粉碎机购于江阴市申威化轻机械有限公司；Alpha1506紫外线可见光光度计购于上海谱元仪器有限公司；电子天平购于上海谱元仪器有限公司；量筒购于沈阳化学试剂厂；量杯购于沈阳化学试剂厂；恒温水浴锅购于沈阳化学试剂厂；离心机购于沈阳化学试剂厂；NAI-ZLG6分类:恒温水箱|恒温锅购于那艾精密仪器；SXT-02索氏提取器购于那艾精密仪器。

1.2 方法

1.2.1 提取参数设定 柳叶沙棘果在50℃环境下烘干60 h取得；WF-60万能粉碎机将沙棘果粉碎至0.70 mm～1.60 mm。

1.2.2 柳叶沙棘籽油水代法提取 首先，将干燥的沙棘果粉碎，将碎渣经孔径35 mm筛，准确筛选重量200 g，将沙棘粉碎，70℃保温，然后进行恒温水浴震荡提取柳叶沙棘籽油，在50℃下提取时间为2 h。在提取过程中，进行4次加入沸水，首次加水量为总水量的70%，第2次加水量为总水量的30%，第3次加水量为总水量的10%，末次加水量为总水量的5%。在转速为3 000 r/min的情况下，离心分离15 min，离心后吸取上层清油[3-6]。

1.2.3 小鼠管理与分组 各组小鼠在非绝对相同的条件下，分笼子饲养于实验室，室温(24±2)℃，环境良好，标准喂养，无不良因素影响[7]。小鼠随机分为低剂量组、中剂量组、高剂量组、正常组、模型组，每组随机分配10只小鼠，普通喂养。所有试验小组均从适应性训练开始，每星期3次，上午爬杆2次，10 min，下午游泳2次，水温24℃±1℃，每次18 min。进行为期4周的适应性训练，无异常的小鼠选取50只进行试验。

小鼠运动采取竭力游泳运行，通过该试验来观察在竭力情况下柳叶沙棘籽油对小鼠的肝脏指数、SOD活性、MDA含量的影响。小鼠每天进行1次竭力游泳，将小鼠放置在泳槽中，腿部负重体重的5%细的钢丝，水温保持24℃±1℃，再将小鼠放置于水中后计时，如果小鼠在水中不运动，驱赶迫使其运动。在小鼠沉入水中13 s不能浮出，停止计时，立即打捞出小鼠，干燥小鼠，进行接下来的注射、灌胃试验。低、中、高剂量组、及模型组每天1次皮下注射9%D-gal溶液10 mL。模型组小鼠每日皮下注射0.9%的生理盐水10 mL，正常组小鼠每日一次10 mL蒸馏水灌胃，低、中、高三个剂量组分贝给予柳叶沙棘籽油8、10、12 mL，分别用对应剂量的柳叶沙棘籽油每日1次灌胃。连续7周，每周称体重，并记录小鼠体重变化情况。末次灌胃后，停止喂养12 h。并进行如上的竭力游泳运动。运动后小老鼠摘掉眼球，放血处死，取出肝脏，清除表面血渍，天平称重，计算小鼠肝脏指数，肝脏指数=肝脏湿重(mg)/小鼠体重(g)，测定SOD活性及MDA含量[9-10]。

1.2.4 安全性分析 在试验测试过程中，对50只小鼠进行全程监测并记录所有试验数据。

1.2.5 统计学分析 本文采用SPSS22.0软件进行数据处理。通过SPSS22.0进行t检验，多组数据间采用“单因素方差分析”的方法进行均数比较，用LSD进行两两比较，以P<0.05为有统计学意义。

2 结果

2.1 沙棘果对小鼠竭力运动下肝脏指数的影响

皮下注射9%的D-gal溶液会加速小鼠的衰老速度[11-12]，柳叶沙棘籽油的3个不同剂量组均可使小鼠的肝脏指数与正常组相比无显著差异(P>0.05)，而模型组与正常组的肝脏指数相比显著下降(P<0.05)(表1)。通过多组数据分析可知，在小鼠逐步衰老的情况下，柳叶沙棘籽油可以在一定程度上延缓衰老，维持肝脏功能。

2.2 柳叶沙棘籽油对小鼠脑组织中MDA含量的影响

根据测量计算结果可知，关于MDA含量，模型组及低剂量组与正常组小鼠脑组织的MDA含量相比升高明显(P<0.05)；中、高剂量组的MDA含量与正常组相比，无显著差异(P>0.05)；低、中、高剂量组与模型组比较，MDA的含量明显下降(P<0.05)(表2)。多组数据显示，对于逐步衰老的小鼠，柳叶沙棘籽油可以在一定程度上降低MDA含量率，剂量越高效果越显著，并且在试验过程中，小鼠没有出现异常。

2.3 柳叶沙棘籽油对小鼠竭力运动后脑组织中SOD活性影响

如表3的统计结果可知，关于SOD活性，模型组与正常组相比SOD活性显著降低(P<0.05)；低、中、高剂量组与正常组相比，SOD活性无显著变化(P>0.05)。在小鼠逐步衰老的过程中，SOD的活性会降低，但通过数据的对比分析可知，在衰老过程中，服用柳叶沙棘籽油的小鼠的SOD活性降低不显著。因此，柳叶沙棘籽油可在一定程度上延缓SOD活性的降低，从而实现延缓衰老的目的，且在试验过程中，小鼠没有出现异常。

2.4 安全性分析

在试验测试过程中，50只小鼠均未出现任何不良反应。

表1 各组小鼠竭力游泳运动后肝脏指数测量结果

注:各组与正常组相比，*表示有显著差异(P<0.05)。

Note:Compared with normal group,*means significant difference(P<0.05).

表2 各组小鼠竭力游泳运动后脑组织MDA含量的比较

注:各组与正常组相比，*表示有极显著差异(P<0.05)。

Note:Compared with normal group,*means significant difference(P<0.05).

表3 各组小鼠竭力游泳运动后脑组织SOD活性的比较

注:各组与正常组相比，*表示有显著差异(P<0.05)。

Note:Compared with normal group,*means significant difference(P<0.05).

3 讨论

柳叶沙棘籽油是从天然植物柳叶沙棘的果实中提取出来的珍贵天然油脂。沙棘果实中除了含有不饱和脂肪酸之外，还含有黄酮、维生素、植物甾醇、微量元素和α-生育酚等100多种生物活性物质。沙棘果实含油率约为1.5%，其中果肉油约占总量的43%、果皮渣油约占33%，且易于小鼠吸收。沙棘果中含有丰富的柳叶沙棘籽油，可用水代法进行柳叶沙棘籽油的提取。肝脏是小鼠最大的免疫器官，有多种免疫功能。小鼠在竭力游泳情况下，会促使柳叶沙棘籽油的尽快吸收。本文旨在研究在小鼠竭力运动下柳叶沙棘籽油对小鼠抗衰老影响。通过分析肝脏指数、SOD活性及MDA含量得出结论。

本试验发现，在小鼠竭力运动的前提下，不同剂量的柳叶沙棘籽油对小鼠的肝脏的指数影响不同，但均会增加小鼠细胞的吞噬能力，降低肝脏器官的指数，因此可以看出柳叶沙棘籽油具有延缓肝脏衰老萎缩的功能。

在正常情况下，小鼠体内自由基及中间产物保持一定的平衡。同时，本试验还发现，在小鼠竭力运动下，随着小鼠的衰老，平衡被打破，机体抗氧化能力降低。本试验研究显示，在模型组中MDA的含量与正常组相比显著提高、SOD的活性较正常组相比显著下降。而柳叶沙棘籽油影响了MDA的含量和SOD的活性，使其延缓了衰老的速度。因此，柳叶沙棘籽油具有良好抗衰老的作用，值得进一步深入研究及推广。

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EffectofHippophaesalicifoliaSeedOilonAnti-agingAbilityinMiceafterEndeavouringExercise

GE Xiao-yan1，FANG Lei2

(1.ShangqiuCollege，Shangqiu,Henan，47600,China; 2.AgricultureScienceandTechnologyCollege,Jilin,Jilin,132101,China)

In order to explore the effect ofHippophaesalicifoliaseed oil on the anti-aging ability in mice after endeavouring exercise,we extracted theHippophaesalicifoliaseed oil using the water replacing method.And the anti-aging ability in mice was verified by feeding theHippophaesalicifoliaseed oil.The 50 mice were divided into five groups,such as normal group,model group,low dose group,middle dose group and high dose group.The D-gal was used to accelerate the aging of mice except the normal group.In the low dose group,the middle dose group and the high dose group,the mice were given the corresponding doseHippophaesalicifoliaseed oil by the gavage method.The model group mice were injected with normal saline.The experimental results showed that compared with normal group,the liver indexes of low dose group,middle dose group and high dose group showed no significant changes (P>0.05).Compared with normal group,the liver indexes of model group had significant drops (P<0.05).The liver indexes in low dose group,middle dose group and high dose group had no significant changes (P>0.05).And the MDA concentrations of these groups were higher than that in normal group.For the model group,the MDA content achieved remarkable decline (P>0.05).The SOD activities in low,middle and high dose groups had no significant changes (P>0.05),compared with normal group.The SOD activity in model group droped significantly(P<0.05).Furthermore,there were no side effects during the experiment.Therefore,theHippophaesalicifoliaseed oil has a certain effect on anti-aging ability and security in mice under endeavouring exercise.

Hippophaesalicifoliaseed oil; endeavouring exercise; mouse; anti-aging

2017-04-21

葛晓燕(1983-)，女，河南濮阳人，讲师，主要从事体育教育工作。

S852.2

A

1007-5038(2017)12-0064-04