高危型HPV HC2检测在宫颈癌前病变筛查中的临床意义

丛娟，郗彦凤，王晶，郭秀丽，张宁

(山西省肿瘤医院，山西 太原 030013)

辅助检查医学

高危型HPV HC2检测在宫颈癌前病变筛查中的临床意义

丛娟，郗彦凤，王晶*，郭秀丽，张宁

(山西省肿瘤医院，山西 太原 030013)

目的：探讨高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)二代杂交捕获法(HC2)检测在宫颈癌前病变筛查中的临床意义。方法：应用液基薄层细胞学检测(LPT)和HR-HPV-HC2二联检测妇科门诊患者443 例，其中对LPT、HR-HPV-HC2和阴道镜下多点活检三联检查的83 例临床资料结果进行分析。结果：LPT和HR-HPV-HC2二联合筛查的443 例患者中，HR-HPV在不典型鳞状细胞(ASC)、低度鳞状上皮病变(LSIL)、高度鳞状上皮病变(HSIL)和鳞状细胞癌(SCC)的宫颈管分泌物阳性率分别为38%、93%、100%和100%，均高于正常(NILM)组的22%。LPT、HR-HPV-HC2检测和阴道镜下多点活检三联检查的83 例患者中，组织病理活检结果为宫颈上皮内瘤样病变I级(CIN1)、宫颈上皮内瘤样病变Ⅱ级(CIN2)、宫颈上皮内瘤样病变Ⅲ级(CIN3)和SCC，HR-HPV感染率分别为79%、92%、100%和100%，，均高于NILM组57%。随着病变级别升高，HR-HPV感染阳性率明显升高，尤其在CIN3和SCC的14 例患者中HR-HPV感染阳性率高达100%。结论：HR-HPV感染与宫颈癌前病变及宫颈癌密切相关。采取HR-HPV-HC2检测联合LPT检测二联检查对宫颈癌前病变早期发现、早期治疗，预防宫颈癌的发生、发展，减少患者的死亡率具有重要的临床意义。

人乳头瘤病毒；杂交捕获法；液基薄层细胞学检测；宫颈癌前病变

宫颈癌是常见的女性生殖道恶性肿瘤之一，严重威胁着妇女的健康和生命。然而宫颈癌又是唯一病因明确的恶性肿瘤。高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染是导致宫颈癌发生的主要原因[1-2]。因此将HR-HPV检测作为宫颈癌前病变筛查的重要手段。美国Digene公司发展的第二代杂交捕获法(HC2)是目前美国食品药品监督管理局(FDA)批准的唯一一种可用于宫颈癌筛查的HR-HPV检测试验，除了具有灵敏度高、重复性强的优点外，还具有测定病毒载量的能力。本研究利用HC2联合利普液基薄层细胞制片技术(LPT)检测，对我院妇科门诊就诊的妇女进行宫颈癌前病变筛查，并评价筛查结果，探讨HR-HPV HC2检测对宫颈癌前病变筛查的临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2015年8月—2016年4月在来院妇科门诊经过LPT及HR-HPV-HC2二联检测患者443 例，其中83 例进行LPT、HR-HPV-HC2和阴道镜下多点活检三联检查。

1.2 方法

1.2.1 检测方法

宫颈细胞学检测：采用LPT专用毛刷取材，将宫颈管内和鳞柱上皮交界处采集的细胞涮洗在LPT专用取样瓶中，制成薄层涂片，经巴氏染色后镜检。

HC2技术检测：采用Digene公司发展的HC2的宫颈专用刷采样，装入标本保存管，置于2～8 ℃环境下或冻存于-20 ℃待检，可一次性检测13 种高危型HPV(16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59和68)。

宫颈活检组织病理学检测：采用阴道镜下行宫颈可疑病灶多点活检，制作石蜡切片、HE染色，显微镜下诊断。

1.2.2 标本采集前注意事项

3 d内不使用阴道内药物或阴道冲洗；24 h内不应有性行为；在非月经期进行检查；取样前均未接受任何妇科相关疾病的治疗。

1.3 诊断标准

1.3.1 宫颈细胞学诊断标准

2001年修正的TBS分类法：分为正常(NILM)和宫颈鳞状上皮内病变。鳞状上皮内病变包括：不典型鳞状细胞(ASC)；低度鳞状上皮病变(LSIL)；高度鳞状上皮病变(HSIL)；鳞状细胞癌(SCC)。

1.3.2 HR-HPV检测标准

采用美国Digene公司提供的HC2法HPV-DNA检测技术检测HR-HPV-DNA，操作按试剂盒操作说明进行。标本判断标准：标本的比值(RLU/CO)>1.0定为HPV-DNA阳性；标本的比值<1.0定为HPV-DNA阴性。

1.3.3 宫颈组织病理学诊断标准

宫颈病变分为慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤样病变I级(CINI)、宫颈上皮内瘤样病变Ⅱ级(CINⅡ)和鳞状细胞癌(SCC)。

1.4 统计学方法

计数资料以率(%)表示，用χ2检验，P<0.05表示差异有统计学意义

2 结 果

2.1 LPT和HC2二联合检查结果

同时做LPT和HC2检测HR-HPV二联检测的443 例患者中，宫颈ASC、LSIL、HSIL和SCC组HR-HPV感染率分别为38%(39/104)、93%(28/30)、100%(16/16)和100%(5/5)均明显高于NILM组22%(53/239)(P<0.05)(见表1)。

表1 HR-HPV-HC2及LPT结果比较

2.2 LPT、HC-2检测和阴道镜下多点活检结果

在LCT、HR-HPV-HC2检测和阴道镜下多点活检查的83 例患者中，宫颈CINI、CINⅡ、CINⅢ和SCC组HR-HPV感染率分别为79%(23/29)、92%(11/12)、100%(9/9)、100%(5/5)，均明显高于病理结果NILM组57%(P<0.05)(见表2)。

表2 HR-HPV-HC2及阴道镜下多点活检查结果对比

3 讨 论

目前的流行病学和生物学资料已经证明，宫颈癌及其癌前病变的发生与宫颈13 个致病性HPV病毒类型感染密切相关[3]。因此检测高危型HPV感染，可以有效预防宫颈癌的发生[4]。本研究结果显示，LPT和HR-HPV-HC2二联合筛查的443 例患者中，HR-HPV在NILM、ASC、LSIL、HSIL、和SCC的宫颈管分泌物阳性率分别22%、38%、93%、100%和100%；ASC、LSIL、HSIL、和SCC的HR-HPV感染检出率明显高于正常人群。且随着病变级别升高，尤其在HSIL和SCC的21 例患者中HR-HPV感染阳性率均达100%。LCT、HR-HPV-HC2检测和阴道镜下多点活检三联检查的83 例患者中，组织病理活检结果为宫颈慢性炎、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和SCC组，HR-HPV感染率分别为57%、79%、92%、100%和100%，CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和SCC组HR-HPV感染检出率明显高于正常人群。可见随着病变级别升高，在CINⅢ和SCC的14 例患者中HR-HPV感染阳性率高达100%，也支持了HR-HPV感染是宫颈癌的单一或者是必要、联合致癌因素这一观点。

通常宫颈癌前病变的初筛是传统涂片来完成，造成假阴性率高。而LPT进行筛查可降低假阴性。HC2检测，其方法简便、重复性好、客观性强。国外研究显示，HC2检测的灵敏度和特异性分别可达98%和86%左右[5]，本研究采用了该方法检测HR-HPV，检测结果显示，HR-HPV阳性、LPT阴性的53 例患者中有9 例阴道镜下多点宫颈活检组织病理学检查，有2 例病检结果阳性。HR-HPV阴性、LPT阳性的112 例患者中17 例阴道镜下多点宫颈活检组织病理学检查，有4 例病检结果阳性。HR-HPV感染和LPT均为阳性的92 例患者中有53 例阴道镜下多点宫颈活检组织病理学检查，51 例病检结果阳性，其敏感性达96%。本检测结果与国外研究报道类似，因此HR-HPV的检测可以增加宫颈癌前病变的阳性检出率，减少漏诊，而HR-HPV的检测是对细胞学、阴道镜检查和组织病理学检查的重要补充，在宫颈癌风险评估中起着至关的作用。

综上所述，HR-HPV感染是发生宫颈癌必要的生物学条件，LPT方法对宫颈癌及宫颈癌前病变的诊断目前仍然很有效。HR-HPV-HC2检测在临床上可用来辅助宫颈细胞学检查进行宫颈癌筛查，浓缩高危人群，提高筛查结果的客观性。阴道镜检查可以观察宫颈上皮及血管的微小变化，有针对性地进行活组织病理检查，是诊断早期宫颈癌及癌前病变的重要手段以及最终诊断。HR-HPV-HC2联合细胞学检查和阴道镜下行宫颈可疑病灶多点活检可以早期发现、早期治疗，预防宫颈癌的发生、发展，减少患者的死亡率。

[1]JEMAL A，BRAY F，CENTER M M，et al.Global cancer statistics[J].CA Cancer J Clin，2011，61(2)：69-90.

[2]王鹤，于继云，李力.广西宫颈癌患者HPV感染情况的分子流行病学调查[J].中国肿瘤临床，2012，29(24)：2070-2074.

[3]BOSCH F X，LOINCZ A，MUNOZ N，et al.The causal relation between human papillomavirus and cervical cancer[J].J Clin Pathol，2002，55(4)：244-365.

[4]李世霞.515 例妇女高危型HPV感染检测结果分析[J].中国肿瘤临床，2011，38(16)：956.

[5]SCHIFFMAN M，HERREO R，HIDESHEIN A，et al HPV DNA tesing in cervical cancer screening：results from woman in a high-risk Province of Costa Rical[J].J AMA，2000，283(1)：87-93.

2017-06-20

(本文编辑：张荣梅)

R737.33

B

1671-8631(2017)12-0928-03

*本文通讯作者：王晶

丛娟(1962— )，女，满族，辽宁省大连市人，学士学位，主任技师，主要从事病理技术工作。