脂氧素和乌司他丁对脓毒症内皮细胞Ang表达的影响对比观察及作用机制研究

李良　　蒋永泼　　杨英姿

[摘要] 目的 探讨脂氧素和乌司他丁对脓毒症内皮细胞Ang表达的影响对比观察及作用机制。 方法 选取2016年1～12月我院收治的脓毒症患者60例，随机分为两组，对照组应用乌司他丁治疗，研究组应用脂氧素和乌司他丁治疗，对比两组患者的内皮细胞Ang表达情况。 结果 治疗前两组患者的Ang表达无明显差异（P>0.05），治疗后研究组Ang-1表达显著高于对照组，Ang-2表达显著低于对照组（P<0.05）；治疗前两组患者的肾功能指标无明显差异（P>0.05），治疗后研究组患者显著优于对照组（P<0.05）；治疗前两组患者的凝血功能指标无明显差异（P>0.05），治疗后研究组患者显著优于对照组（P<0.05）。 结论 脓毒症患者应用脂氧素和乌司他丁治疗，能够降低内皮细胞Ang表达水平，改善患者的肾功能以及凝血功能相关指标，有利于改善患者预后及生活质量，临床上值得推广应用。

[关键词] 脂氧素；乌司他丁；脓毒症；内皮细胞Ang；作用机制

[中图分类号] R969 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2017）27-0019-04

Effects of lipoxin and ulinastatin on Ang expression in endothelial cells of sepsis and its mechanism

LI Liang JIANG Yongpo YANG Yingzi

Department of Emergency Medicine，Taizhou Hospital of Zhejiang Province，Linhai 317000，China

[Abstract] Objective To investigate the effects of lipoxin and ulinastatin on Ang expression in endothelial cells of sepsis and its mechanism. Methods 60 patients with sepsis treated in our hospital from January to December 2016 were randomly divided into two groups. The control group was treated with ulinastatin. The study group was treated with lipoxin and ulinastatin. The Ang expression in endothelial cell between the two groups of patients was compared. Results There was no significant difference in Ang expression between the two groups before treatment（P>0.05）. The expression of Ang-1 in the study group was significantly higher than that in the control group after treatment. And the expression of Ang-2 in the study group was significantly lower than that in the control group after treatment（P>0.05）. There was no significant difference in renal function between the two groups before treatment（P>0.05）. After treatment， the renal function of the study group was significantly better than that in the control group（P<0.05）. There was no significant difference in the coagulation function between the two groups before treatment（P>0.05）. After treatment， the coagulation function of the study group was significantly better than that in the control group（P<0.05）. Conclusion The application of lipoxin and ulinastatin in patients with sepsis can reduce the expression of angiotensin in endothelial cells， and can improve the renal function and coagulation function of patients. It is helpful to improve the prognosis and quality of life of patients and worthy of appling in clinical practice.

[Key words] Lipoxin；Ulinastatin；Sepsis；Endothelial cell Ang；Mechanism

膿毒症指的是感染诱发的全身炎症反应，严重情况下会导致患者出现多器官功能衰竭。脓毒症是人体感染之后出现的抗炎反应及炎症反应严重失衡的危重症，其中老年人群的脓毒症（MODS）发生风险显著上升，如何避免脓毒症恶化成为多器官功能障碍是临床上危重症治疗的重要课题。Ang-1及Ang-2表达是脓毒症患者的重要生物标志物。有研究在动物模型中发现，Ang-1能够保护器官维持功能，而Ang-2与脓毒症的程度存在密切的联系[1]。乌司他丁对维持血管内皮细胞的功能有重要影响，是蛋白酶活性的常用抑制剂，而脂氧素有着理想的抗炎治疗效果。我院在脓毒症患者治疗过程中联合应用脂氧素和乌司他丁，现报道如下。endprint

1资料与方法

1.1一般资料

选取2016年1～12月我院收治的脓毒症患者60例，纳入标准：患者的体温超过38℃或者低于36℃；患者额度心率超过 90 次/min；患者PaCO2（二氧化碳分压）低于4.0 kPa；患者的白细胞数超过11.0×109/L或低于3.0×109/L[2]。排除标准：合并HIV患者；长期应用强的松患者；妊娠哺乳期女性[3]。将患者随机分为两组，对照组30例，男18例，女12例，年龄19～76岁，平均（41.2±2.6）岁；研究组30例，男20例，女10例，年龄18～75岁，平均（40.3±1.9）岁。两组患者的一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05）。具有可比性。受试者均知情同意，且本研究经过医院伦理委员会批准。

1.2方法

对照组应用乌司他丁（国药准字H19990134，广东天普生化公司生产，药品规格：10万U）治疗，20万U乌司他丁+30 mL生理盐水，静脉注射给药，1次/d，持续治疗7 d[4]。研究组在对照组患者基础上联合应用脂氧素（国药准H20040505，南京金益柏生物科技有限公司，药品规格：48T/96T）治疗，1 μg/kg的脂氧素+3 mL生理盐水，静脉注射给药，1次/d，持续治疗7 d[5]。

1.3观察指标

治疗前后应用酶联免疫法（ELISA）检测Ang-1及Ang-2表达，同时检测患者的肾功能指标[6]。采集空腹静脉血5 mL，分别检测血肌酐（BUN）、尿素氮（SCr）以及胱抑素C（Cystatin C）[7]。治疗前后检测两组患者的凝血功能，采集空腹静脉血5 mL，应用自动生化仪检测凝血酶原时间（PT）、血小板计数（PLT）、D-二聚体（D-D）以及活化部分凝血活酶时间（APTT）[8]。

1.4 统计学方法

数据统计应用SPSS18.0软件，计数资料采用χ2检验，计量资料采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者治疗前后Ang表达比较

治疗前两组患者的Ang表达无明显差异（P>0.05），治疗后研究组Ang-1表达显著高于对照组，Ang-2表达显著低于对照组（P<0.05）。见表1。

2.2两组患者治疗前后肾功能比较

治疗前两组患者的肾功能指标无明显差异（P>0.05），治疗后研究组患者肾功能显著优于对照组（P<0.05）。见表2。

2.3两组患者治疗前后凝血功能比较

治疗前两组患者的凝血功能指标无明显差异（P>0.05），治疗后研究组患者凝血功能指标显著优于对照组（P<0.05）。见表3。

3讨论

相关研究结果显示，凝血活化及炎症反应在脓毒症病情发展过程中有重要的影响[9]。炎症细胞因子会损伤患者的血管内皮细胞，诱发凝血途径，导致患者处于高凝状态，微血管中血栓不断生成，加剧机体的炎症反应。在早期阶段有效阻断患者的炎症反应同时改善凝血功能，避免血管内凝血及多器官功能障碍是提高脓毒症治疗效果的核心[10]。乌司他丁是健康人群尿液当中提取的蛋白酶抑制剂，能够抑制蛋白酶、纤溶酶及脂肪水解酶等。研究显示乌司他丁能够借助于内源性凝血机制发挥效果，可以稳定人体中的溶酶体膜，从而减少溶酶体酶生成及分泌，清除氧自由基并且控制炎症介质，发挥血小板及血管内皮细胞的保护功能，避免凝血功能障碍出现[11]。随着脓毒症患者的病情恶化，凝血功能指标中的APTT、PT及D-D等都会出现显著的改变。本研究结果提示，患者应用乌司他丁治疗之后，患者的凝血功能得到显著改善（P<0.05），提示乌司他丁治疗有利于维持患者凝血及抗凝血功能之间的平衡，从而降低MODS发生风险。

本研究中，研究组患者联合应用脂氧素治疗脓毒症患者，患者的肾功能指标及凝血功能指标均显著优于对照组（P<0.05）。脂氧素是花生四烯酸的一种代谢产物，是临床上比较常用的一种内源性抗炎缓解因子，在纤维化以及肾脏炎性疾病等患者的治疗过程中受到医务人员的高度重视[12]。脂氧素作为重要的一种内源性抗炎递质，在人体中发挥着不容忽视的重要影响，几乎参与到同炎症以及免疫相关的各种疾病。在炎症性疾病当中，脂氧素借助于抑制患者的中性粒细胞，能够降低促炎因子的表达，加速巨噬细胞吞噬中性粒细胞[13]。除此之外，脂氧素治疗过程中，患者不会出现抗炎药物常见的各种不良反应，全身应用也不会降低患者的血压，同时不会影响患者的免疫功能、肾功能以及骨髓造血功能[14]。脂氧素在病理过程中发挥影响，并不是直接参与生理功能维持，但是人工合成得到的脂氧素能够显著抑制免疫功能。研究发现，脂氧素在肾脏疾病治疗过程中，能够发挥抗炎效果以及保护肾脏的效果，随着医务人员对脂氧素作用机制的认识，特别是开发结构类似物，生物学活性还有具体的作用机制日益明确，在肾脏炎症以及纤维化治疗过程当中应用潜力巨大[15]。当前情况下，在脂氧素的研究方面仍然处于实验的环节，大部分的研究为动物实验，不过在治疗疾病方面的潜力已经得到医务人员的认可[16]。研究发现脓毒症患者在血清当中的Ang-1水平显著下降，同时Ang-2水平显著上升。Ang-1及Ang-2是评估脓毒症患者风险以及预后质量当中的重要生物标记物。Ang-1能够预防毛细血管出现渗漏问题，与之相对应的是，Ang-2能够提高动脉血管的通透性[17]。Ang-1及Ang-2在人体的血管当中体现出拮抗效果，二者之间的比值越高，提示患者的血管破坏越为严重。Ang-1通过刺激内皮细胞的迁移、存活、增殖、调节以及分化，来实现内皮屏障的稳定性。相关研究的结果提示，Ang-1水平下降及Ang-2水平的显著上升，意味着脓毒症患者的风险加大以及预后质量较差[18]。Ang-1水平及Ang-2水平的相對变化方面，Ang-1的水平下降及Ang-2水平的上升，能够体现出脓毒症患者当中血管内皮的损伤状况，毛细血管损伤严重会显著加大脓毒症患者的死亡风险[19]。所以通过分析这两种截然不同的血管因子水平，可以有效确定血管内皮细胞结局，是预测脓毒症患者死亡风险的重要生物标记物之一。除此之外，研究人员在体内外研究的结果当中，脂多糖会降低人体的Ang-1的表达水平，抑制Ang-1通路，破坏内皮屏障的稳定性以及完整性，导致器官功能逐渐丧失，这也能够解释Ang-1预测患者预后的作用机制[20]。从更加全面整体的角度而言，Ang-1水平及Ang-2水平能够体现出脓毒症患者自身病理情况及血管损伤的严重程度，体现脓毒症患者的血管病理机制及死亡风险。本研究结果中，治疗前两组患者的Ang表达无明显差异（P>0.05），治疗后研究组Ang-1表达显著高于对照组，Ang-2表达显著低于对照组（P<0.05），提示患者治疗之后Ang-1及Ang-2表达得到改善，其中研究组患者联合应用脂氧素强化抗炎效果，改善水平优于对照组。需要注意的是，本研究仍然存在一定不足。第一，随机抽样进行临床判断容易导致样本出现偏差，需要在后续的研究当中进一步增加样本量从而降低误差。第二，部分患者治疗前的Ang-1水平及Ang-2水平不是在急诊科测量，难以确保样本数据的客观精确，且患者的潜在疾病同样会影响到二者的表达水平，需要在后续研究当中探索相应的处理措施。简而言之，Ang-1水平及Ang-2水平提供了一种简单有效的方法，可评估脓毒症患者的预后质量及死亡风险，能够为临床治疗提供新模式。endprint

综上所述，脓毒症患者应用脂氧素和乌司他丁治疗，能够降低内皮细胞Ang表达水平，改善患者的肾功能以及凝血功能相关指标，有利于改善患者预后以及生活质量，临床上值得推广应用。

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（收稿日期：2017-06-25）endprint