人血清KL-6对结缔组织病相关间质性肺病诊断价值的研究

卢俊慧 徐浩 宋远圆 殷松楼

人血清KL-6对结缔组织病相关间质性肺病诊断价值的研究

卢俊慧1徐浩1宋远圆2殷松楼2

目的探讨人血清Ⅱ型肺泡细胞表面抗原(KL-6)对结缔组织病相关间质性肺病(CTD-ILD)诊断的作用。方法选取117例结缔组织病(CTD)患者，根据有无合并间质性肺病(ILD)分为CTD-ILD组67例，CTD组(未合并ILD)50例，同时收集肺部感染者61例，正常对照组60例，ELISA法测定各组血清KL-6水平，比较组间差异。CTD-ILD组行肺功能及胸部HRCT检查，分析血清KL-6水平和DLCo及HRCT评分的相关性。结果CTD-ILD组KL-6水平(1383.41±1169.69U/mL)较CTD组(791.96±655.64U/mL)、肺部感染组(692.22±506.88U/mL)、正常人群组(502.87±486.32U/mL)高，差异有统计学意义(F =12.233，P<0.05)，而CTD组、肺部感染组及正常对照组之间差异无统计学意义(P >0.05)。CTD-ILD组血清KL-6水平和HRCT评分呈正相关关系(r=0.861,P<0.001)，KL-6和DLCo呈负相关相关关系(r=-0.41，P<0.05)。结论血清KL-6在CTD-ILD患者明显升高，有助于CTD-ILD的诊断和鉴别肺部感染。KL-6水平和HRCT评分呈正相关关系，和DLCo呈负相关关系，提示KL-6可作为CTD-ILD病情评估的指标。

结缔组织病；间质性肺病；KL-6；诊断

间质性肺疾病(interstitial lung disease ILD)是主要累及肺间质、肺泡腔，导致肺泡-毛细血管功能单位丧失的弥漫性肺疾病。ILD中有一部分继发于结缔组织病(connective tissue disease，CTD)，临床称为结缔组织病相关间质性肺病(CTD-ILD)，ILD是影响CTD患者预后的重要因素，早期发现、早期干预能显著改善患者预后[1]。目前，临床主要靠干咳、胸闷、憋喘等症状，肺功能检查出现通气及弥散功能障碍及肺部高分辨CT(HRCT)等来判断ILD的发生，但是CTD-ILD患者出现临床症状时大多肺部已出现较严重的结构变化，而HRCT检查可能对机体造成放射损伤，因此近年来如何早期方便快捷地发现CTD-ILD的发生成为学者关注的热点。

KL-6(Krebs von den Lungen-6)主要表达于Ⅱ型肺泡上皮细胞(ATⅡ)的顶端，肺泡结构破坏和修复过程中可释放大量KL-6，促进纤维母细胞聚集，导致肺泡内的纤维变性[2-3]。国内已有学者研究发现血清KL-6也许可作为诊断慢阻肺合并PIF的血清学指标[4-5]，本文通过对CTD-ILD患者、CTD患者、肺部感染者及健康体检者血清KL-6水平的测定，探讨KL-6对CTD-ILD患者诊断及病情评估的意义。

资料与方法

一、研究对象

1 一般资料：收集2015年8月至2016年6月在徐州医科大学附属医院风湿免疫科住院的CTD-ILD患67例，其中男性15例，女性52例，平均年龄(51.27±13.75)岁，疾病种类(见表1)。CTD组选取同期住院性别、年龄、疾病种类均相匹配的CTD而无ILD患者50例。肺部感染收集同时期住院性别年龄相匹配，经病原学检查及胸部CT确诊肺部感染且排除肺间质病变患者61例。正常对照组：选择同时期在体检中心健康体检性别、年龄均匹配的人群60例。

2 纳入标准和排除标准：RA患者符合2009年ACR/ELUAR修订的RA分类标准；SLE患者符合2012年SLICC修订的SLE分类标准；pSS患者符合ACR 2012年干燥综合征建议诊断标准；PM及DM患者符合1982年Maddin诊断标准；SSc 患者符合2013年ACR/ELUAR系统性硬化症分类标准。

CTD-ILD组入选标准：ILD诊断则依据HRCT的表现判断，HRCT 诊断ILD的标准依据高分辨率CT提示的影像学改变[6]：网格影、实变影、蜂窝影、磨玻璃影、结节影。所有入选患者均为初次诊断CTD-ILD无糖皮质激素及免疫抑制剂使用史，或已停用糖皮质激素及免疫抑制剂半年以上。

排除标准：① 合并其他肺疾病如肺结核、慢性阻塞性肺疾病、肺部感染等；② 其他原因引起的肺间质纤维化如尘肺、放射性肺炎；③ 严重脏器功能不全如：心衰、转氨酶大于正常3倍以上、肺动脉高压等；④ 恶性肿瘤患者；⑤ 妊娠及哺乳期妇女。

二、研究方法

1 血清KL-6检测方法：所有患者晨起空腹采取外周静脉血4mL，3000r/min离心15min后分离血清，保存于-80℃冰箱，检测时统一解冻。血清KL-6水平采用酶联免疫吸附法(ELISA)定量测定。试剂盒购自上海信帆生物科技有限公司，实验中使用同批号的ELISA试剂盒，并使用标准抗原作为对照，每个标准抗原及待测血清均做双孔取平均值。

2 HRCT评分方法：HRCT对间质性肺病评分：取主动脉弓上缘、隆突、膈肌上lcm水平，分别计算3个层面纤维化占相应肺野面积的百分比。分别根据毛玻璃影、小叶间隔增厚、蜂窝影的累及范围进行评分，0分：无异常；1分：累及范围1%-25%，2分：累及范围26%-50%；3分：累计范围51%-75%；4分：累及范围大于75%，将评分相加即为间质性肺病评分。所有HRCT均由两位副主任医师以上职称放射科医师共同评分，取平均值。

3 肺功能检查(PFT)：利用德国耶格公司(JAEGER)制造的组合式肺功能仪，由同一名医师在同一间检查室根据肺功能操作规范进行检测，通过测定获得用力肺活量(FVC)、及CO弥散量(DLCo)，根据患者的年龄、性别、身高和体重得到预测值，并得到上述PFT值的实测值/预测值(实/预)%。FVC≥80%为正常，否则视为通气功能障碍，DLCo≤80%视为换气功能障碍。

4 统计学分析：统计学采用SPSS17.0软件统计处理。各组血清KL-6水平采用`x±s表示，组间比较选用单因素方差分析，组间进一步两两比较选用多个样本均数两两比较的q检验，血清KL-6和DLCo的相关性比较采用pearson相关分析，血清KL-6水平和HRCT评分的相关关系选用Spearman等级相关分析，P<0.05为差异有统计学意义。

结 果

一、各组患者基本资料 (见表1)

二、各组血清KL-6水平比较

方差分析显示各组间KL-6水平总体来说有差别(F=12.23，P<0.001)，进一步行组间两两比较，CTD-ILD组血清KL-6水平高于CTD组、肺部感染组及正常人群组，差异有统计学意义，而CTD组、肺部感染组、正常人群组之间差异无统计学意义。实验结果(见表2)。

三、CTD-ILD组血清KL-6水平和DLCo相关性

CTD-ILD组中所有患者均完成了肺功能检查，其中表现为通气障碍42例(FVC<80%预计值)，换气功能障碍54例(DLCo<80%预计值)，pearson相关分析显示，血清KL-6水平和DLCo存在负相关关系(r=-0.41，P<0.05)。

四、CTD-ILD组血清KL-6水平和肺部HRCT评分的相关性

56例患者均完成了HRCT检查，Spearman等级相关分析，HRCT评分和血清KL-6水平呈正相关关系(r=0.861，P<0.001)。

表1 各研究组入选病例一般资料

注：IIM：特发性炎性肌病，RA：类风湿性关节炎，SLE：系统性红斑狼疮，SSc：系统性硬化症，SS：干燥综合征，OS：重叠综合征，MCTD：混合型结缔组织病

表2 各组血清KL-6水平和组间两两比较结果

注：*为与CTD-ILD组相比较；#为与CTD组相比较；△为与肺部感染组相比较；☆为与正常人群组相比较

讨 论

弥漫性结缔组织病是一组累及多脏器多系统，造成受累脏器功能不全的疾病，包括SLE、pSS、DM/PM等，肺是结缔组织病常累及的重要器官之一，ILD是CTD累及肺脏最常见的表现，可在疾病的任何阶段出现，CTD-ILD引起的肺功能下降直接导致患者死亡率增高，影响疾病预后[7]。目前CTD-ILD的发病机制尚不明确，多种细胞因子如血小板衍生生长因子(PDGF)、转化生长因子-β(TGF-β)，肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等参与发病。血清KL-6是在Ⅱ型肺泡上皮细胞及细支气管上皮细胞上表达的一种糖蛋白抗原，是由MUC1基因编码的高分子量球蛋白。受损的Ⅱ型肺泡上皮细胞在损伤和再生过程中分泌大量KL-6，而KL-6诱导成纤维细胞聚集，并对成纤维细胞有着抑制凋亡及促进增殖的作用，从而促进肺纤维化形成，由于KL-6并非肺泡表面活性物质，其过度表达会影响原有表面活性物质的表达，影响肺泡扩张从而影响肺顺应性，造成通气及换气功能障碍，进一步加重肺损伤，由此形成恶性循环，血清KL-6水平升高可能反应Ⅱ型肺泡上皮细胞受损和再生[8-9]。已发现多种肺部疾病均会出现血清KL-6水平增高，在RA、IIM、SSc等多种结缔组织病合并的间质性肺病中表达亦明显升高，且和疾病的严重性相关[10-11]。

本研究结果表明血清KL-6在CTD-ILD患者中显著升高，表明KL-6可能是诊断CTD-ILD的血清标志物；目前临床主要依据肺HRCT表现及DLCo来评判患者间质性肺病的严重程度，KL-6水平和肺部HRCT评分呈正相关，而和DLCo呈负相关，提示血清KL-6水平可以用来预测疾病的范围和严重程度。本研究中CTD组有少数患者KL-6水平明显升高而无明显间质性肺病的临床症状，且肺部HRCT未发现间质性肺病的影像学表现，可能该部分患者已出现肺泡结构破坏，只是尚未出现临床及影像学表现，故需对这一部分患者进行进一步随访，观察随着病情进展患者是否出现相关的临床表现及影像学表现。CTD患者长期使用糖皮质激素及免疫抑制剂，增加肺部感染机会，而CTD-ILD患者血清KL-6水平高于肺部感染者，提示KL-6有助于ILD与肺部感染的鉴别。但是本研究中未考虑吸烟因素对研究结果的影响，在此后的研究中需进一步完善。

综上，血清KL-6可以作为间质性肺病的血清学标志，可协助判断CTD-ILD的发病和评判疾病严重程度，并有助于和肺部感染的鉴别，且有着可重复性高，个体差异影响小，没有放射学污染对机体影响小等优点，但是鉴于KL-6升高可见于其他肺疾病、肝功能衰竭及部分恶性肿瘤患者中，所以在使用KL-6判断间质性肺病的发生及严重程度时需注意排除上述情况，以做出更加准确的临床判断。

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ResearchondiagnosticvalueofserumKL-6inpatientswithconnectivetissuediseaserelatedinterstitiallungdisease

LUJun-hui,XUHao,SONGYuan-yuan,YINSong-lou

GraduateSchoolofXuzhouMedicalUniversity,Xuzhou,Jiangsu223000,China

ObjectiveTo investigate the value of serum Krebs von den Lungen-6 ( KL-6 ) in the diagnosis and evaluation of the severity of connective tissue disease-interstitial lung disease (CTD-ILD).Methods117 connective tissue disease (CTD) patients were selected and divided into the CTD-ILD group (n=67) and the CTD group (n=50) according to with interstitial lung disease or not. At the same time, it selected 61 cases of pulmonary infection and 60 cases of normal physical examination. The serum KL-6 levels were measured by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) method, and were compared among the groups. For the CTD-ILD group, carbon monoxide diffusing capacity (DLCo) and lung high resolution computer test (HRCT) were also studied.ResultsThe serum KL-6 level in the CTD-ILD group (383.41±1 169.69 U/mL) was much higher than in the CTD group (791.96±655.64U/mL) (F=12.233,P<0.05). There was no significant difference in other three groups (P>0.05). In the CTD-ILD group, the level of serum KL-6 was positively correlated with pulmonary HRCT scores (r=0.861,P<0.01), and was negatively correlated with DLCo (r=-0.41,P<0.05).ConclusionIn the patients of CTD-ILD, the level of serum KL-6 increases significantly, and it is helpful in the diagnosis and differential diagnosis of pulmonary infection in CTD-ILD. KL-6 level and HRCT score are positively correlated, and DLCo is negatively correlated, which suggests that KL-6 can be used as an indicator of CTD-ILD disease assessment.

KL-6; connective tissue disease; interstitial lung disease; diagnosis

10.3969/j.issn.1009-6663.2017.010.017

1. 223000 江苏 徐州,徐州医科大学研究生院

2. 223000 江苏 徐州,徐州医科大学附属医院风湿免疫科

殷松楼，E-mail：yinsonglou@163.com

2017-02-04]