贻贝粘蛋白纤维素敷料用于慢性溃疡临床观察

殷雨林，邓建华，王小磊

（江阴贝瑞森生化技术有限公司，江苏 江阴 214437）

贻贝粘蛋白纤维素敷料用于慢性溃疡临床观察

殷雨林，邓建华，王小磊

（江阴贝瑞森生化技术有限公司，江苏 江阴 214437）

贻贝粘蛋白纤维素敷料是贻贝粘蛋白与纤维素通过共价交联形成的一种新型敷料，可用于促进创面的愈合。通过30例慢性难愈性创面或溃疡患者试用，贻贝粘蛋白纤维素敷料能有效促进溃疡、慢性难愈性创面的愈合，并且安全性好。

贻贝粘蛋白纤维素敷料创面愈合

0 引言

纤维素是一种天然的生物高聚物，由β-D-吡喃葡萄糖通过β-1，4-糖苷键连接而成的一种无分支的大分子直链聚合物[1]，具有生物活性、生物可降解性、生物适应性，具有高结晶度、高纯度、高持水性、超细纳米纤维网络、高抗张强度和弹性模量等许多独特的物理、化学和机械性能[2-3]。此外纳米纤维素持水性高，其内部有很多“孔道”，有良好的透气、透水性能，能吸收60-700倍于其干重的水分[4]。基于上述纤维素的优异性能，其在生物医用材料领域具有广泛的应用前景。但是，纤维素本身没有抗菌活性，不能防止伤口的感染，对伤口愈合的促进效果不够理想。因此，赋予纤维素原料较强抗菌性能和促愈性能对其在生物医用材料领域的应用至关重要。

贻贝粘蛋白是一种大分子蛋白质，分子中含有大量的正电荷，可吸引带负电细胞的爬行和生长，并且正电荷具有抑菌的属性[5-6]。将贻贝粘蛋白与纤维素结合形成新型的医用产品，既可发挥纤维素的优势，又可使新型敷料具有抑菌和促进创面愈合的作用。因此研制了贻贝粘蛋白纤维素敷料，并经临床观察有很好的促愈合效果，现报告如下。

1 贻贝粘蛋白纤维素敷料制备

取20克卡波姆凝胶在80℃热水中充分溶胀30分钟形成凝胶基质，边搅拌边向其中加入细菌纤维素纤维40g，持续搅拌4小时后室温放置自然冷却。搅拌条件下向其中加入3.0mg/ml贻贝粘蛋白10ml，持续搅拌30分钟至混合均匀，得到贻贝粘蛋白纤维素敷料。

2 贻贝粘蛋白纤维素敷料质量控制

（1）性状贻贝粘蛋白纤维素为凝胶状液体，透明、无杂质。

（2）蛋白含量检测采用考马斯亮蓝法检测贻贝粘蛋白含量在0.2-0.4mg/mL之间。

（3）稳定性本品室温6个月及45℃放置3个月观察性状，检测蛋白含量均符合性状及蛋白含量规定。

3 贻贝粘蛋白纤维素敷料临床疗效观察

3.1 病例选择

选择慢性难愈性创面或溃疡患者30人，年龄18-65岁，性别不限，受试者创面总面积小于20%总体表面积（TBSA），应用试验或对照产品的创面面积小于2%TBSA。随机将患者分成对照组或试验组，每组各15人。隔天换药一次，观察21天后创面的愈合情况。

3.2 治疗方法

随机将患者分成对照组或试验组，每组各15人。清洁创面后用生理盐水将清创药物冲洗2-3遍后将贻贝粘蛋白纤维素敷料或对照产品均匀喷于创面处，先上覆凡士林油纱，后上覆干燥无菌纱布，以胶带或绷带固定。隔天换药一次，观察21天后创面的愈合情况。

3.3 疗效评价标准

以治疗21天时创面愈合情况作为主要评价指标评价产品性能。创面愈合标准为创面无渗出，基底完全被新生上皮所覆盖。

按下列公式计算:创面愈合率（%） =1−测定日创面面积与受伤日创面面积的百分比。

3.4 安全性评价

在治疗前和治疗第21d，进行血常规（白细胞、中性粒细胞百分比、淋巴细胞百分比、红细胞、血红蛋白、血小板），尿常规（红细胞、白细胞、蛋白质），肝功能（总胆红素、直接胆红素、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、白蛋白），肾功能（尿素氮、肌酐）检测。应分别描述试验组和对照组各项实验室指标试验前正常，试验后异常（异常有临床意义、异常无临床意义）的例数及占各组例数的百分比。

记录试验中所发生的不良事件，并判断是否与试验产品相关，同时计算不良事件发生率，不良事件发生率计算公式如下：

不良事件发生率=（不良事件发生的次数）/（试验例数）×100%

研究中试验组和对照组各出现一例入组时各项检查均正常，试验后检测参数异常情况，经研究者判定与使用产品无关。

3.5 治疗效果对比

试验组和对照组的各15例受试者中平均年龄分别为46.20和48.39，平均体重分别为70.61和69.30公斤，平均身高分别为170.22和170.60cm，试验组和对照组均为男性13例，女性2例。从基线数据可以看出，两个受试组人员基础数据较均衡。

贻贝粘蛋白纤维素敷料和对照产品治疗深度、慢性难愈性创面效果见表1:受试者基线受伤日创面面积，试验组为9.88±6.26(%)，对照组为9.84±6.34(%)，在检验水准α为0.05的情况下，对两组基线受伤日创面面积进行比较，差异无统计学意义（P=0.2360），故可以认为试验组在基线受伤日创面面积上与对照组无统计学差异。

受试者基线试验观察创面面积，试验组为1.98±0.28(%)，对照组为1.82±0.27(%)，在检验水准α为0.05的情况下，对两组基线试验观察创面面积进行比较，差异无统计学意义（P=0.0920），故可以认为试验组在基线试验观察创面面积上与对照组无统计学差异。

使用后21天创面愈合率试验组为89.05±5.43(%)，对照组为86.67±8.66(%)，在检验水准α为0.05的情况下，对两组使用后指定时间创面愈合率进行比较，差异有统计学意义（P=0.0280），可认为试验组在使用后指定时间创面愈合率上与对照组存在差异。

表1 贻贝粘蛋白纤维素敷料与对照产品治疗效果对比

4 讨论

难愈性创面或溃疡是由一系列创伤和疾病所致，与创伤部位和宿主有关的创面，在期望的时间内不能正常愈合，一般将持续一个月不愈合创面定义为慢性创面。主要包括创伤性溃疡、下肢静脉性溃疡、压迫性溃疡以及糖尿病溃疡等。慢性创面中，成纤维细胞、表皮细胞、血管内皮细胞等组织修复细胞会出现核固缩与核染色质边缘化等典型表现。成纤维细胞是肌体修复的主要细胞，它的增殖障碍将使细胞外基质特别是胶原的合成发生障碍，其结果是创面愈合延迟。

以纤维素作为生物高聚物增强相，具有其他增强相无可比拟的特点，是制备复合凝胶的优良选择材料。将纤维素用于纳米复合凝胶符合可持续发展观点，同时也与纤维素资源高值化利用的发展趋势相符。

贻贝粘蛋白是贻贝足丝中分泌的一种蛋白质，贻贝依靠它粘附于各类物体的表面，形成抗水的结合，耐受风浪的冲击[7]。贻贝粘蛋白是碱性蛋白质，等电点pI 9.5，在生理酸碱度pH 7.4下带有很高载量的正电荷[8-9]。人体细胞，如：表皮原代细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞、神经细胞等带负电。贻贝粘蛋白通过静电相互作用，吸引各种细胞的贴壁和爬行替代，从而促进烧伤创面的愈合。具有生物相容性好、无细胞毒性、无免疫原性、无化学刺激、透气等特点[10]。贻贝粘蛋白在愈合过程中呈现了一种微观生物支架的作用——贻贝粘蛋白通过静电相互作用、疏水相互作用、DOPA（多巴）氧化交联等三种作用力与细胞和组织紧密结合，形成微观的纳米级生物支架，通过静电相互作用吸引细胞向生物支架贴壁和爬行替代，促进创面的愈合[11-12]。贻贝粘蛋白纳米纤维素敷料不仅解决纳米纤维素的抗菌性、创伤快速愈合的问题，同时克服现有贻贝粘蛋白产品存在的引流、吸湿效果差的问题。将用于烧伤、陈旧性创口、慢性溃疡、术后创口恢复等临床过程中，加速创面难愈合，不易产生疤痕。

随着对难愈创面发生机制和创面愈合过程的深入了解，以及各种有效的生长因子投送技术、医用新材料和创面治疗新技术如负压创面治疗技术的应用和成熟，针对性治疗有望变为现实。

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The Clinical Observation of Mussel Adhesive Protein Cellulose Dressing for Chronic Ulcer

YIN Yu-lin, DENG Jian-hua, WANG Xiao-lei

(Jiangyin USUN Biochemical Technology Co.,Ltd, Jiangsu Jiangyin,214437,China)

Mussel adhesive protein cellulose dressing is a new type of dressing, which is formed through MAP and cellulose covalent cross-linking and can be used to promote wound healing. Through the trial in total of 30 patients with chronic painless wound or ulcer, mussel adhesive protein cellulose dressing can effectively and safely promote the healing of ulcer and chronic painless wound.

Mussel adhesive protein; Cellulose dressing; Woundhealing

10.19335/j.cnki.2096-1219.2017.08.37